Analisis kualitatif untuk hepatitis C

8 Mac, 2017, 12:29 Artikel ahli: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10,547

Analisis kualitatif tindak balas rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam badan. Dalam keadaan makmal, struktur RNA diselidiki, yang akan merangkumi virus. Dalam kes pengesanan virus C, perlu menjalani rawatan, kerana keadaan hati yang terabaikan akan menyebabkan akibat yang teruk. PCR berkualiti tinggi dilakukan selepas pemulihan untuk mengesahkan ketiadaan antibodi. Dilantik dan untuk pemeriksaan rutin. Dengan kepekatan rendah agen penyebab dalam darah, PCR (kualitatif) tidak dapat mengesan apa-apa, kerana sistem diagnostik mempunyai ambang kepekaan sendiri. Dalam kes peringkat awal penyakit atau bentuk ringan, PCR dilakukan oleh ultradiagnostics pada peralatan ultra-sensitif.

Apakah virus RNA?

Istilah RNA virus hepatitis C (atau RNA virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C mengikat ke sel tubuh yang sihat dengan menembusi ke dalam. Lama kelamaan, tersebar di seluruh badan, hanya perlu masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen itu menembusi hati, bersatu dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hepatik (hepatosit) berfungsi di bawah pengaruhnya, menjalani perubahan, dan dari ini mereka mati. Semakin lama virus C berada di hati, semakin banyak jumlah sel mati. Lama kelamaan, penyakit berbahaya berkembang, membawa kepada kemerosotan ganas dan kematian.

Jangkitan hati dengan jenis virus ini mungkin tidak nyata secara luaran. Selama bertahun-tahun atau beberapa dekad, orang yang dijangkiti terasa sihat, dan hanya pemeriksaan rawak yang paling sering mendedahkan patologi. Apabila menderma darah untuk hepatitis, sebahagian daripada rantaian RNA (ribonucleic acid), yang merupakan sebahagian daripada gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil ujian makmal tidak boleh digunakan untuk perawatan diri, karena ini hanya penunjuk. Gambaran yang tepat dan diagnosis lanjut adalah lebih baik ditentukan oleh doktor.

Apabila selesai: petunjuk untuk penyelidikan

Dalam pengesahan HCV, analisis PCR dilakukan (tindak balas rantai polimerase). Kajian PCR membantu mencari agen penyebab dalam struktur RNA dan menetapkan terapi yang berkesan. Dilantik dalam kes berikut:

• pengesanan tanda-tanda keradangan hati;
• kajian skrining untuk pencegahan;
• pemeriksaan orang yang dihubungi;
• diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
• menentukan tahap aktiviti pembiakan virus dalam bentuk kronik;
• sirosis hati;
• untuk menentukan keberkesanan rawatan yang ditetapkan.

Penyelidikan PCR menetapkan doktor untuk menentukan keberkesanan rawatan rawatan hepatitis.

Terdapat analisis kualitatif serta analisis kuantitatif PCR. PCR kuantitatif menunjukkan peratusan RNA dengan pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan kehadiran atau ketiadaan virus. Penunjuk positif kualiti (kehadiran Hepatitis C RNA) juga memerlukan penyelidikan kuantitatif. Tahap penumpuan yang tinggi dari agen penyebab hepatitis C dikaitkan dengan risiko penularannya, iaitu, jangkitan orang lain. Nombor yang rendah lebih baik dirawat. Jumlah virus RNA dalam darah tidak berkaitan dengan intensiti penyakit ini. Analisis PCR juga dilakukan dalam kes terapi interferon untuk menetapkan tempoh dan kerumitan kursus rawatan.

Ciri-ciri analisis PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif ditugaskan dengan penunjuk tindak balas rantai polimerase bagi semua pesakit yang mempunyai antibodi untuk hepatitis C dalam darah mereka. Mereka yang telah sakit dan didapatkan mesti mengambil ujian semula. Adalah disyorkan untuk mengambil analisis untuk hepatitis B, maka, jika kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, tindak balas kualitatif yang dianalisis harus dilakukan bersamaan dengan ujian darah yang lain. Analisis akan menunjukkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil ujian, hanya ujian positif untuk hepatitis C akan kelihatan atau negatif, iaitu kehadiran atau ketiadaan virus. Jika output "dikesan", maka virus itu dan terus aktif. Penetapan "tidak dikesan" menunjukkan ketiadaan virus atau jumlahnya yang kecil. Dengan penunjuk ini, perlu diingat bahawa sensitiviti analisis sistem diagnostik adalah berbeza dan bahawa hepatitis C RNA masih boleh di dalam darah, tetapi tidak ditunjukkan dalam analisis.

Kaedah PCR yang sangat sensitif mendedahkan ultra hepatitis C walaupun dalam jumlah yang sedikit. Kajian hibridensi fluoresen digunakan, yang banyak kali lebih tinggi daripada sistem PCR standard. Kaedah ini digunakan dalam beberapa kes:

• disyaki bentuk tersembunyi hepatitis C;
• Diagnostik PCR tidak mengesahkan patogen, tetapi terdapat antibodi;
• dalam kes pemulihan;
• untuk mengesan jangkitan awal.

Kembali ke jadual kandungan

Analisis penyahkodan

Penyahkodan PCR HCV mempengaruhi keputusan muktamad ketika membuat diagnosis, khususnya dengan metode ultrametod. Kelemahan utama kajian ini adalah mematuhi syarat steril untuk sampel dan bahan. Penyimpangan sedikit kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitis yang tidak tepat, merumitkan diagnosis dan rawatan berikutnya. Analisis PCR untuk menentukan RNA hepatitis tidak senantiasa menunjukkan gambar penyakit, kadang kala ketidakakurasian dibenarkan, dan di kedua-dua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disyorkan untuk menggunakan peperiksaan yang komprehensif.

Norma petunjuk

Ketiadaan antibodi JgM kepada hepatitis C virus dalam keputusan kajian dianggap sebagai norma dalam analisis reaksi rantai polimerase. Pada masa yang sama, penemuan analisis serologi menunjukkan kehadiran antibodi terhadap virus C dan ini juga berada dalam jarak normal. Takrif kualitatif tidak menunjukkan keamatan penyakit, ia hanya mendedahkan agen penyebab hepatitis C dalam RNA. Analisis ini diulangi selepas rawatan untuk mengesahkan pemulihan sebenar.

Penyimpangan

Jika antibodi JgM kepada RNA HCV hadir, ini menunjukkan jangkitan yang membina. Penyakit ini pada masa yang sama meneruskan akut atau kronik, diwujudkan dalam pelbagai peringkat. Jika penurunan jumlah antibodi direkodkan, analisis akan menunjukkan bahawa hasil rawatan dicapai semasa pemulihan. Terdapat kes-kes penemuan positif palsu dalam diagnosis. Mereka ditemui pada wanita semasa kehamilan dan pada orang dengan penyakit berjangkit lain.

Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C

Hepatitis adalah penyakit serius yang mempunyai banyak sebab. Dasar perkembangannya adalah kerosakan langsung atau tidak langsung ke hati. Memandangkan kepentingannya untuk keseluruhan organisma, seseorang hanya boleh meneka betapa sukarnya patologi itu. Dalam artikel ini kita akan mengkaji secara terperinci ciri-ciri kursus dan diagnosis makmal hepatitis C.

Penyebab penyakit itu adalah agen virus yang merujuk kepada patogen yang mengandungi RNA. Ia mempunyai ciri tersendiri - keupayaan untuk bermutasi, iaitu mengubah strukturnya. Disebabkan ini, jangkitan itu melarikan diri daripada serangan sistem imun dan dalam kebanyakan kes menyebabkan keradangan kronik di hati.

Memandangkan kewujudan subtipe yang berlainan virus, pemilihan ubat-ubatan harus berdasarkan hasil genotip. Walaupun kajian lama terhadap penyakit dan ciri-ciri struktur HCV, belum ada kemungkinan untuk membangunkan vaksin tertentu untuk penyakit ini.

Kesukaran diagnosis awal terletak pada kursus asidtomatik hepatitis, akibatnya seseorang melawat doktor pada tahap sirosis. Untuk mengesan penyakit dalam masa, pemeriksaan perubatan yang kerap diperlukan. Hanya dengan ujian makmal darah adalah mungkin untuk mengesan HCV dan mencegah jangkitan orang di sekeliling anda. Hakikatnya ialah pembawa jangkitan itu boleh lama tidak meneka tentang patologi dan terus menghantar virus kepada orang yang sihat.

Cara Penghantaran

Dalam kebanyakan kes, virus merebak melalui darah, kerana ia mengandungi kepekatan tertinggi agen patogenik. Oleh itu, jangkitan disebarkan:

• dengan hemodialisis;
• dengan jarum yang dijangkiti;
• dalam proses pertempuran, apabila kulit cedera, dan kontak darah terjadi;
• dengan pemindahan darah (transfusi darah).

Kebarangkalian jangkitan semasa keintiman tidak signifikan, kerana terdapat sejumlah kecil patogen dalam air mani dan pembuangan vagina. Risiko jangkitan meningkat dengan ketara sebagai melanggar integriti membran mukus alat kelamin. Ini diperhatikan dengan seks agresif dan dubur.

Bagi mod penghantaran menegak, ia dijalankan dalam proses buruh. Dalam tempoh kehamilan janin, patogen tidak boleh menembusi melalui plasenta ke embrio. Dalam kelahiran semulajadi, agen patogenik dihantar ke anak apabila kulit cedera, ketika hubungan dengan darah ibu diperhatikan.

Selepas penembusan patogen ke dalam organisma yang sihat, sintesis antibodi bermula, yang merupakan perlindungan daripada jangkitan dan kepunyaan struktur imun. Mereka didapati dalam kajian awal seseorang yang menggunakan ELISA.

Untuk mengesahkan diagnosis, pesakit tertakluk kepada tindak balas rantai polimerase. Ini adalah analisis bahan genetik agen patogen dan penentuan beban virus.

Diagnosis makmal hepatitis C

Diagnosis makmal bermula dengan enzim immunoassay. Tugas utamanya adalah untuk mengesan antibodi yang dihasilkan terhadap patogen. Kecekapannya hampir 95%. Terima kasih kepada penyelidikan ini, adalah mungkin untuk mengenal pasti pembawa virus di peringkat praplinikal dan hantar untuk pemeriksaan lanjut.

Analisis kualitatif ELISA menunjukkan kehadiran atau ketiadaan imunoglobulin dalam darah pesakit. Hasilnya mungkin "positif" atau "negatif." Setelah menerima jawapan pertama, orang itu dihantar untuk pemeriksaan seterusnya - PCR. Harganya bergantung kepada kualiti reagen dan makmal. Kos tindak balas rantai polimer boleh mencapai 4 ribu rubel.

Ciri PCR

Menggunakan tindak balas rantai polimerase, walaupun sedikit bahan biologi membolehkan kita untuk menganggarkan beban virus dalam darah, iaitu, untuk mengira kepekatan patogen dalam satu mililiter cecair.

Dengan adanya PCR, diagnosis hepatitis telah menjadi lebih mudah. Analisis ini memungkinkan untuk mengenal pasti RNA HCV, untuk menubuhkan tahap proses berjangkit dan penyebaran virus pembawa.

Terdapat beberapa jenis diagnosis genetik:

1. Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C - mengesahkan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam darah subjek:
2. kuantitatif, di mana anda boleh mengira kepekatan virus dan menubuhkan tahap penyakit. Hasilnya diberikan dalam IU / ml atau salinan / ml (bergantung kepada makmal);
3. genotip - diperlukan untuk menentukan genotip HCV. Ini diperlukan untuk pemilihan ubat yang tepat yang akan menjadi yang paling berkesan dalam kes ini. Analisis secara tidak langsung menunjukkan keterukan proses patologi di hati. Oleh itu, dalam genotip ketiga patogen, steatosis paling sering diperhatikan, asasnya ialah pengumpulan lemak dalam hepatosit (sel-selnya). Di samping itu, jenis virus menjejaskan hasil dan tempoh kursus terapeutik.

Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C

Pertama sekali, bahan biologi diperiksa di makmal untuk kehadiran RNA HCV. Adalah penting untuk diingat bahawa analisis kualitatif terhadap hepatitis C mempunyai tahap kepekaan tertentu, dan oleh itu mungkin tidak selalu memberikan jawapan yang tepat. Dalam kes ini, disyorkan untuk menjalankan semula diagnostik makmal menggunakan reagen-reagen lain.

Untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai, sistem ujian dengan kepekaan sekurang-kurangnya 50 IU / ml harus digunakan.

Hasil diagnostik boleh sama ada "positif" atau "negatif". Jika patogen tidak terdapat dalam darah, kajian itu selesai. Jika ejen patogenik dikesan dalam sampel, maka beban virus dikira.

Satu tindak balas negatif palsu diperoleh apabila proses itu dilanggar, sebagai contoh, komponen aktif yang menyekat pembinaan salinan patogen yang memasuki medium. Oleh itu, tidak mungkin memaparkan gambar darah yang benar, sebab itu jangkitan seseorang tidak didiagnosis.

Hasil positif palsu boleh diperolehi jika tiub untuk pengumpulan bahan biologi, serta persekitaran untuk kajian itu tercemar. Di samping itu, respons analisa seperti itu mungkin dilakukan dengan jangkitan campuran, apabila hati terjejas oleh beberapa virus, contohnya, hepatitis C dan D.

Petunjuk untuk penyelidikan kualitatif

Doktor boleh menetapkan pesakit kajian kualitatif mengenai pengenalpastian RNA virus hepatitis C:

• setelah menerima respons immunoassay enzim yang positif atau meragukan;
• untuk pengesahan diagnosis;
• menentukan viral load;
• menetapkan tahap penyakit;
• diagnosis jangkitan bercampur. Hepatitis C kerap menjangkiti hati serentak dengan virus "D";
• penentuan taktik terapeutik dengan mempertimbangkan genotip agen penyebab;
• menilai dinamika perubahan semasa rawatan dengan ubat-ubatan antiviral.

Kelebihan reaksi polimerase termasuk:

1. sensitiviti tinggi teknik, yang membolehkan untuk mewujudkan fakta jangkitan di peringkat praslinik;
2. pengenalpastian bahan genetik patogen, dan bukannya antibodi;
3. kemungkinan menubuhkan subjenis daripada agen patogenik;
4. kadar diagnostik yang tinggi, kerana tiada pembenihan bahan pada medium nutrien diperlukan, dan ia mencukupi untuk menggunakan sistem ujian tertentu. Seorang mendapat keputusan selepas 5 jam;
5. serba boleh. Analisis ini membolehkan untuk mengenal pasti sebarang bahan genetik (RNA, DNA). Terima kasih kepada ini, doktor boleh mengesahkan hepatitis C dan jenis penyakit lain (B);
6. keupayaan untuk mengesan jangkitan laten.

Penyelidikan kuantitatif

Dalam kajian darah menggunakan tindak balas rantai polimer boleh menghitung jumlah patogen dalam jumlah tetap bahan biologi. Penunjuk ditunjukkan dalam IU / ml. Melalui analisis, adalah mungkin untuk menentukan tahap penularan pesakit, menentukan tahap proses menular, dan juga menilai keberkesanan terapi ubat.

Berdasarkan PCR, pakar memutuskan bahawa dos ubat dapat menghalang pembiakan patogen. Di samping itu, tempoh rawatan dan prognosis antiviral untuk jangka hayat ditentukan. Adalah penting untuk diingat bahawa sistem ujian mempunyai sensitiviti yang tinggi, oleh itu, kaedah ini memungkinkan untuk mengesahkan jangkitan seseorang di peringkat praslinik.

Genotyping

Memandangkan keupayaan patogen untuk bermutasi, genotipnya diperlukan untuk menentukan taktik rawatan dan pilihan ubat antiviral. Sebagai contoh, rawatan HCV 1 berlangsung selama 48 minggu, dengan trend positif hanya dapat dilihat dalam 60% kes. Genotip 2 dan 3 mempunyai prognosis yang lebih baik. Ubat antiviral ditetapkan selama 8 bulan, dan keberkesanannya mencapai 85%.

Menurut statistik, dalam kebanyakan kes, HCV 1, 2 dan 3 didaftarkan di Persekutuan Rusia.

Apabila menafsirkan ujian makmal, jawapan ini boleh ditunjukkan - "tidak ditaip". Ini bermakna bahawa virus beredar dalam sistem peredaran pesakit dan tidak boleh diiktiraf oleh sistem ujian. Hasil analisis dalam hal ini menunjukkan bahwa patogen tidak tipikal untuk kawasan geografis tertentu.

Bagaimana untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai?

Untuk kajian kualitatif PCR untuk mengesan RNA agen penyebab hepatitis C menunjukkan keputusan yang betul, adalah perlu untuk mematuhi keperluan untuk menyediakan diagnostik makmal:

1. pensampelan darah dijalankan pada perut kosong, dan jurang "lapar" tidak boleh lebih pendek daripada 8 jam;
2. dua hari sebelum kajian, disyorkan untuk berhenti meminum minuman beralkohol dan meninggalkan masakan pedas, berlemak dan salai;
3. membatalkan pengenalan dadah yang mengurangkan pembekuan darah, misalnya, heparin. Sekiranya ubat-ubatan ini ditetapkan untuk sebab-sebab kesihatan, anda mesti memberitahu doktor. Di samping itu, pakar perlu menyedari kemasukan ubat lain yang boleh menjejaskan hasil penyelidikan makmal;
4. Pada malam pengumpulan bahan biologi, prosedur physiotherapeutic tidak boleh dijalankan dan harus tertakluk kepada penuaan fizikal yang teruk.

Hasil analisis dapat dipengaruhi bukan hanya oleh orang yang menyumbangkan darah, tetapi juga oleh faktor-faktor lain, yaitu:

• pensampelan darah berkualiti rendah;
• tidak mematuhi saranan pengangkutan bahan biologi;
• latihan pekerja makmal yang tidak mencukupi;
• tidak mematuhi teknik penyelidikan;
• pengenalan antikoagulan (heparin) pada malam pensampelan darah. Kumpulan ubat ini mengurangkan pembekuan, sekali gus memperlahankan kerja reagen.

Di makmal yang berbeza, tindak balas diagnostik mungkin berbeza sedikit, tetapi kesilapan ini tidak menjejaskan hasil akhir kajian.

Perhatian khusus diberikan kepada jenis sistem ujian yang digunakan di makmal. Selalunya keutamaan diberikan kepada reagen dengan sensitiviti yang tinggi. Ini penting bagi pesakit yang mempunyai viral load yang rendah kerana sukar untuk dikesan.

Berapa kerapkah ujian makmal dilakukan?

Reaksi rantai polimer primer dilakukan pada orang yang telah dikesan oleh immunoassay untuk antibodi kepada patogen hepatitis. Dalam kes ini, ia ditugaskan untuk mengesahkan fakta jangkitan seseorang dan menubuhkan tahap penyakit. Di samping itu, analisis ini membolehkan untuk menentukan subtipe virus, yang sangat penting untuk pilihan ubat-ubatan.

Tempoh berikutnya untuk ujian makmal wajib adalah 3 bulan dari permulaan terapi antiviral. Diagnostik memungkinkan untuk menilai keberkesanan ubat, laraskan dos atau menggantikannya.

Sebagai tambahan kepada ujian asas, PCR boleh dilakukan pada 4 dan 24 minggu dari permulaan rawatan. Prognosis positif penyakit itu disahkan oleh penurunan dalam viral load selepas tiga bulan terapi. Contohnya, ia harus berkurang dari 1 juta IU / ml kepada beberapa ratus ribu.

Jika kepekatan agen patogenik dalam darah kekal pada tahap yang sama atau bertambah sedikit, ini menandakan keberkesanan ejen antiviral dan memerlukan penggantiannya. Menggunakan PCR pada akhir rawatan, adalah mungkin untuk mengesahkan pemulihan pesakit.

Untuk menerangkan dengan betul hasil diagnostik makmal, perundingan pakar hepatologi atau pakar penyakit berjangkit diperlukan. Memandangkan frekuensi tinggi tindak balas palsu dalam ELISA, analisis ini digunakan secara eksklusif untuk penyaringan utama. Untuk pemeriksaan yang lebih menyeluruh terhadap pesakit yang menggunakan reaksi rantai polimerase.

Analisis PCR untuk Hepatitis C

Hepatitis C beralih dari akut kepada kronik dalam 80% kes. Replikasi virus patogen dalam sel hati berfungsi membawa kepada disfungsi organ. Ini disebabkan oleh hakikat bahawa tisu parenchymal digantikan dengan penyambung. Akibatnya, sejarah pesakit ditambah dengan pendarahan di saluran gastrointestinal, mabuk badan, masalah dengan pembekuan darah. Oleh itu, perubahan patologi yang terdahulu terdiagnosis, semakin besar peluang pesakit untuk pulih. Analisis PCR untuk hepatitis C dianggap kaedah penyelidikan yang paling tepat.

Kaedah diagnostik ini dibenarkan dijalankan beberapa hari selepas jangkitan. Tindak balas rantai polimer dapat menentukan genotip dan konsentrasi virus dalam darah. Untuk melakukan analisis, pesakit diambil bahan biologi di mana agen penyebab RNA boleh hadir.

PCR untuk hepatitis C dijalankan dalam tiga peringkat:

• Analisis kualitatif - menggunakannya untuk menentukan bahan genetik patogen.
• Penyelidikan kuantitatif - dengan itu mendedahkan viral load.
• Genotyping - pada peringkat ini, doktor akan mengenali jenis penyakit.

Teknik ini dibangunkan kira-kira 30 tahun yang lalu. Ia digunakan untuk mendiagnosis banyak penyakit berjangkit. PCR membolehkan anda mengesan bahan genetik unik. Untuk melakukan ini, gunakan primer. Jadi dipanggil helai pendek RNA, yang dilampirkan pada permulaan gen.

Akibatnya, bilangan serpihan virus patogen didarabkan. Setiap fasa memerlukan rejim suhu khas dan tempoh masa tertentu. Molekul DNA terbentuk dalam masa 3 minit. Amplifikasi termasuk kira-kira 30 kitaran. PCR dilakukan di makmal melalui peralatan khas.

Petunjuk untuk pelantikan

Penyerahan analisis PCR mungkin disebabkan oleh gejala klinikal hepatitis C. Prosedur ini ditunjukkan untuk orang yang:

• menghubungi orang yang dijangkiti;
• menderita penyakit hati akut dan kronik;
• dirawat untuk perubahan patologi dalam tisu parenkim;
• berisiko;
• adalah penderma darah dan komponennya.

PCR dijalankan bukan sahaja dengan hepatitis C. Analisis ini digunakan dalam bidang perubatan, biologi, forensik. Penentuan petunjuk khusus - tahap yang diperlukan untuk pemilihan skim ubat.

Faedah analisis

Dalam skema pemeriksaan diagnostik termasuk analisis immunofluorescence dan PCR. Menggunakan yang pertama, anda boleh menentukan kepekatan immunoglobulin. Bahan-bahan ini dihasilkan oleh mekanisme perlindungan selepas kemasukan virus patogen ke dalam tubuh. Berbeza dengan PCR, ELISA tidak berkesan semasa tempoh inkubasi. Dengan bantuan tindak balas rantai polimerase, hepatitis C boleh dikesan dalam 7 hari pertama selepas jangkitan.

Kajian klinikal ini mempunyai ciri-ciri berikut:

• Kebarangkalian minimum hasil palsu.
• Kecekapan tinggi.
• Spesifikasi.
• Kepekaan.
• Ketepatan.
• Automasi proses.
• Keselamatan
• Kadar mendapatkan indikator.

Satu-satunya kelemahan PCR adalah kerumitan teknikalnya. Hal ini disebabkan oleh fakta bahawa doktor perlu memilih komposisi nukleotida yang tepat, yang berfungsi sebagai sintesis DNA. Disebabkan peningkatan kepekaan kaedah, adalah mungkin untuk mendapatkan hasil palsu-palsu atau palsu-negatif.

Untuk mencapai ketepatan petunjuk penting, bahan biologi dibersihkan secara menyeluruh daripada ubat-ubatan dan sebatian protein. Untuk mengesahkan keputusan, perbandingan sampel yang diuji sebelum ini diperlukan. Faktor-faktor yang menimbulkan kesilapan termasuk:

Pelanggaran analisis teknik pensampelan

• Pelanggaran teknik analisis.
• Perubahan dalam urutan serpihan RNA.
• Kebetulan nukleotida disintesis dan gen virus patogenik.

Kebarangkalian mendapatkan hasil palsu dalam hepatitis C hadir kerana tidak dapat menentukan dasar genetik penyakit. Diagnostik PCR boleh mengenal pasti patogen secara langsung. Menggunakan penguatan DNA, patogen dikesan dalam makanan, air dan tanah.

Batasan kaedah ini tidak mengurangkan keberkesanan dan popularitinya. Penyelidikan klinikal dijalankan secara berkala. Oleh itu, doktor boleh menilai keberkesanan langkah-langkah rawatan yang diambil. Keperluan untuk ini adalah kerana virus hepatitis C dapat bermutasi. Ketiadaan kesan positif bermakna penyesuaian virus kepada ubat-ubatan yang digunakan.

Penyediaan untuk penghantaran

Untuk melakukan tindak balas rantai polimer dalam pesakit yang menderita hepatitis C, darah vena diambil. Biasanya dua bahagian bahan biologi diperlukan untuk belajar. Melalui satu, PCR dilakukan secara langsung, dan yang lain dihantar untuk immunoassay.

Darah untuk analisis PCR diambil dari urat

Penyediaan adalah penting. Pesakit menderma darah untuk PCR pada waktu pagi dengan perut kosong. Beberapa hari sebelum prosedur itu perlu meninggalkan makanan, alkohol, nikotin dan dadah yang berbahaya. Pesakit harus mengelakkan hubungan seks, tekanan fizikal dan emosi yang berlebihan. Kolam renang dan pusat gim dilarang. Ia perlu untuk menyediakan dalam apa jua keadaan.

Terdapat petunjuk khusus mengenai ubat-ubatan perubatan. Ini terpakai untuk antibiotik dan antidepresan. Wanita yang telah menstruasi harus melambatkan ujian untuk hepatitis C. Colposcopy juga merupakan sebab untuk menolak prosedur.

Peraturan yang disenaraikan agak mudah. Terima kasih kepada mereka, anda boleh mencapai kebolehpercayaan maksimum kaedah diagnostik ini. Menyahsulit keputusan mesti pakar. Secara bebas menafsirkan mereka dalam pesakit tidak mungkin berjaya.

Proses analisis

Diagnostik PCR adalah seperti berikut:

Darah diletakkan dalam termostat.

• Pertama, ambil bahan biologi. Darah diletakkan dalam alat yang disterilkan. Jumlah yang diperlukan tidak melebihi 1-1.5 ml. Pastikan darah dan komponennya tidak melebihi 24 jam. Suhu penyimpanan tidak boleh melebihi 4 darjah Celsius.
• Selepas memulakan kajian klinikal. Darah yang disediakan diletakkan dalam termostat bersama dengan campuran amplifikasi. Biasanya tidak memerlukan lebih daripada 25 ml komposisi khas. Pengukuhan dijalankan secara automatik selama beberapa jam.
• Secara selari, buat ujian kawalan. Untuk melakukan ini, gunakan bahan biologi yang diambil dari orang yang sihat. Ini akan membantu mengelakkan hasil palsu.
• Pengekodan dan pendaftaran penunjuk. Bahan genetik dikesan menggunakan etida bromida. Oleh kerana kesan spesifik, serpihan DNA diserlahkan. Kewujudan (ketiadaan) virus ini didedahkan dengan memberi tumpuan kepada jadual-jadual ini.

Keputusan penyahkodan

Hanya pakar penyakit berjangkit dan pakar hepatologi boleh menentukan nilai penunjuk ini. Analisis PCR diberikan kompleks diagnostik bersama dengan ujian darah biokimia, ultrasound, ELISA dan biopsi. Diagnosis dibuat berdasarkan semua keputusan. Prosedur untuk menyahkodkan ujian bergantung pada peringkat pemeriksaan diagnostik.

Pada tahap pertama PCR, hasil ujian yang positif adalah pengesanan fragmen DNA virus patogenik. Apabila melakukan analisis kuantitatif menentukan tahap beban virus. Ia boleh rendah (kurang daripada 8 * 10 ^ 5 IU / ml), sederhana (dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml), tinggi (lebih daripada 2.4 * 10 ^ 7 IU / ml). Ketiadaan antibodi spesifik dan zarah RNA virus dianggap sebagai norma (hasil negatif). Di peringkat genotip, jangkitan dengan jangkitan ditunjukkan oleh RNA genotip tertentu.

Setelah menerima keputusan positif, pesakit ditetapkan rejimen terapeutik yang berkesan. Pada masa yang sama, maklumat mengenai kehadiran virus dalam darah, tahap aktiviti dan genotip mesti diambil kira. Harga prosedur bergantung pada kaedah ujian, jenis bahan biologi. Kos untuk mengambil darah atau cecair lain boleh ditambah kepada jumlah kos. Yang terakhir ini adalah kerana hakikat bahawa patogen sering dijumpai dalam air kencing, najis dan air mani.

Ciri ujian untuk hepatitis C dan kaedah yang paling tepat

Hepatitis C adalah salah satu daripada virus yang paling berbahaya, kerana ia mungkin tidak memberikan gejala selama bertahun-tahun dan ramai yang tidak menyedari kehadiran penyakit ini. Virus Hepatitis C sering didiagnosis semasa pemeriksaan am, atau walaupun ia memberi komplikasi dalam bentuk sirosis hati atau komplikasi serius lain.

Perhatian! Hepatitis C adalah salah satu bentuk yang paling biasa. Lebih kerap, hanya hepatitis B yang didiagnosis.

Ia telah lama dianggap tidak tepat untuk mengatakan bahawa hepatitis C tidak dapat diubati dan sekarang terdapat banyak ubat yang agak berkesan dan kaedah terapi. Walau bagaimanapun, ramalan yang paling konservatif, yang memberikan WHO, dalam tempoh dua dekad akan datang, hepatitis C boleh menjadi wabak sebenar di kebanyakan negara.

Dalam masa untuk mengenal pasti jangkitan dan memulakan rawatan ini akan membantu analisis, yang boleh dilakukan di mana-mana bandar utama di negara kita.

Bila dan siapa perlu diuji untuk hepatitis C

Ujian hepatitis (semua bentuk) disyorkan untuk setiap orang setiap beberapa tahun sebagai langkah pencegahan.

Apakah ciri hepatitis C? Siapa yang disyorkan untuk ujian? Seperti yang kita tahu, borang ini dihantar hanya melalui darah, dan untuk mengambil jangkitan, sebagai contoh, udara, mustahil.

Walau bagaimanapun, seseorang tidak boleh berfikir bahawa hepatitis C adalah banyak penagih dadah. Berada dengan risiko boleh dengan mudah, sebagai contoh, memutuskan untuk mendapatkan menindik atau tatu.

Sebelum ini, sebilangan besar kes jangkitan berlaku semasa pemindahan darah penderma, tetapi sekarang, semuanya telah diperiksa dan ujian untuk hepatitis C dibuat sebelum prosedur pemindahan.

Ujian untuk hepatitis C disyorkan:

• sebelum kehamilan yang akan datang;
• perubahan pasangan seksual;
• menerima suntikan atau luka dengan objek yang diragui;
• mendiagnosis penyakit kronik;
• dengan tujuan pencegahan.

Perlu, analisis hepatitis adalah manifestasi gejala seperti:

• penampilan kulit dan mata yang berjerawat;
• rasa tidak selesa, berat, sakit di bawah tulang rusuk di sebelah kanan badan;
• reaksi negatif badan kepada makanan pedas dan lemak;
• perubahan warna air kencing ke coklat;
• pemutihan kotoran.

Ujian untuk hepatitis adalah perlu bagi semua yang memerlukan buku perubatan, dan ini adalah senarai profesi yang besar. Di samping itu, mereka juga wajib untuk strata sosial tertentu, misalnya, pengguna dadah berdaftar atau di klinik penyakit kulit dan kelamin.

Ujian darah

Apakah ciri-ciri ujian darah untuk hepatitis C? Kumpulan ini termasuk enam jenis virus. Oleh itu, untuk menjalankan analisis lengkap memerlukan analisis menyeluruh.

Kenal pasti antibodi kepada virus, yang akan menunjukkan jangkitan mungkin dalam 14 hari pertama dari tarikh jangkitan. Walau bagaimanapun, analisis semacam itu hanya memberi tindak balas kumulatif dan mustahil untuk membuat diagnosis akhir, kerana ini boleh menjadi permulaan bentuk akut dan keadaan selepas jangkitan.

Ujian apa yang anda ada untuk disyaki hepatitis C

Hasil ujian boleh sama ada positif atau negatif. Dalam kes kedua, dalam kajian makmal mengenai serum darah tidak ada antibodi terhadap virus. Sekiranya hasilnya positif, antibodi tersebut dikesan, yang menunjukkan:

• jangkitan pada tempoh akut;
• WASH kronik;
• sebelum ini dipindahkan hepatitis C.

Oleh itu, ujian pengesahan tambahan dibuat untuk membuat diagnosis akhir dan sifat antibodi yang dikesan ditentukan. Senarai lengkap ujian ditetapkan untuk setiap pesakit secara individu.

Kaedah PCR untuk diagnostik kualitatif

PCR bermaksud tindak balas rantai polymerase dan, setakat ini, adalah salah satu yang terbaik, dari kaedah yang sedia ada setakat ini, mengenal pasti hepatitis C, baik dari segi kualitatif dan kuantitatif.

Perbezaan utama antara kaedah PCR dengan analisis serologi adalah bahawa ia bukan sahaja mengesan kewujudan antibodi, tetapi juga mengenal pasti RNA (asid ribonucleic) Hepatitis C virus

Sebagaimana diketahui, antibodi untuk hepatitis hadir bukan sahaja pada pesakit dengan bentuk kronik atau akut, tetapi juga pada orang yang telah mendapat jangkitan dan pulih. Terdapat juga kes-kes apabila antibodi dikesan hanya beberapa bulan selepas jangkitan. Itulah sebabnya mengapa diagnostik PCR mengatakan bahawa ia adalah yang paling bermaklumat. Lagipun, ia boleh digunakan untuk menghasilkan analisis kualitatif, berdasarkan kesimpulan yang boleh diambil tentang bagaimana virus itu mengalir dalam tubuh dan bagaimana berkesan rawatan antiviral dijalankan.

Bagi kepekaan analisis kaedah ini, ia berkisar antara 50 hingga 100 zarah virus setiap 5 μl.

Hepatitis C boleh dikesan oleh PCR pada hari pertama dan minggu selepas jangkitan, apabila penanda serologis masih tidak hadir sepenuhnya. Pada masa yang sama, kebarangkalian hasil ujian positif palsu tidak boleh dikecualikan. Kajian lain diperlukan untuk diagnosis definitif.

Perhatian! Terdapat khas cadangan WHO, mengikut mana diagnosis hepatitis C perlu tidak lebih awal daripada selepas 3 kali untuk mengenalpasti RNA virus.

PCR juga digunakan untuk:

• pemasangan kebolehpercayaan kajian serologi, jika ada alasan untuk keraguan tentang hasilnya;
• menetapkan bentuk tepat hepatitis;
• mengenal pasti kawanan penyakit atau jangkitan yang telah dipindahkan;
• memantau keberkesanan terapi.

Kaedah PCR untuk diagnosis kuantitatif

Diagnosis kuantitatif pada asasnya berbeza dari satu kualitatif dan berfungsi untuk menentukan keamatan yang mana hepatitis C berkembang di dalam tubuh pesakit. Ia juga memungkinkan untuk menentukan seberapa berkesan terapi yang dipilih dan untuk mengetahui bahawa penentangan terhadap ubat tertentu telah mula berkembang dalam pesakit.

Semakin rendah tahap viremia dikenal pasti, prognosis lebih baik.

Di samping itu, kaedah ini adalah kaedah yang paling tepat untuk mewujudkan sub-jenis hepatitis C, bergantung kepada yang mungkin pelbagai komplikasi dan mungkin terdapat perbezaan dalam rawatan.

Yang paling berbahaya adalah subjenis 1b, di mana borang kronik terbentuk dalam 90% kes, walaupun 2a subjenis dan kronik aliran 3a tidak lebih daripada 33-50% daripada kes didiagnosis.

Kaedah ELISA

Singkatan ELISA ini bermaksud immunoassay enzim. Berdasarkan analisis ini, pengesanan virus hepatitis C adalah berdasarkan pengesanan penanda serologis. Oleh itu, satu ulasan EIA tidak begitu jelas kerana ia dapat mengesan kehadiran antibodi, tetapi tidak memberi maklumat jelas mengenai patogen.

Setelah menganalisis serum darah oleh ELISA, perlu dilakukan ujian pengesahan dan menentukan jenis hepatitis yang spesifik, sama ada jangkitan dalam bentuk akut atau sudah dipindahkan lebih awal, dsb.

Kelebihan kaedah ini adalah ketepatan pengesanan antibodi yang sangat tinggi dan hari ini industri perubatan menghasilkan banyak sistem ujian seperti ini, jadi ujian ELISA, tidak seperti jenis lain, boleh didapati untuk semua orang. Anda boleh mengambil analisis sedemikian di hampir mana-mana klinik atau pusat perubatan, dan kosnya sangat rendah.

PCR kuantitatif untuk hepatitis C

Virus hepatitis C dapat melipatgandakan sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Oleh kerana pelbagai mutasi, pertahanan imun badan semakin lemah, genotip dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan jenis yang tepat dan tepat pada masanya, keberkesanan terapi antiviral bergantung. Bahaya jangkitan adalah bahawa penyakit ini adalah asimtomatik. Hanya 15 peratus daripada 100 boleh mengalami loya dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Pengesanan virus Hepatitis C

Kadar standard hepatitis C dalam saiz 40 hingga 60 nm, dengan kebanyakan lipid, kerosakan hati yang disebabkan oleh penyakit akut atau kronik penyakit ini. Hepatitis C, iaitu, RNA virus keluarga Togaviridae, sangat tahan, disebarkan melalui pemindahan darah atau penggunaan barang tidak steril, bekalan kebersihan yang tidak betul, dan lain-lain. Analisis kuantitatif membolehkan anda memeriksa darah dan mengenal pasti struktur genetik virus yang dijangkiti.

Untuk hepatitis C dan genotipnya ditentukan, menjalankan analisis kuantitatif. Bergantung kepada penganalisis yang boleh menentukan tiga tahap kejadian virus RNA.

Subtipe boleh menghasilkan pelbagai modifikasi, jadi kekhususan dan kepekaan penganalisis mesti seratus peratus. Di samping mengesan penyakit itu dalam pesakit, perlu menentukan tahap keterukannya. Sesetengah makmal tidak mempunyai semua data mengenai penyahkodan virus RNA, terdapat kemungkinan tindak balas positif palsu.

Penyelidikan mengenai hepatitis C akan lebih tepat apabila mengkaji petunjuk ini:

ALAT, Asat; Perisai alkali; LDH.

Menarik perhatian kepada hasil penunjuk ini dan keadaan umum badan, hasilnya dipaparkan menunjukkan tahap jangkitan, bentuk, dan jumlah sel-sel hepatitis C dalam darah. Ini menyumbang kepada proses penyembuhan dan keberkesanan terapi antiviral.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Reaksi rantai multi-dimensi (PCR) memberi idea tentang bilangan zarah DNA dalam analisis pesakit yang diambil, dengan tepat mengenal pasti agen berjangkit.

Agen penyebab penyakit berjangkit boleh berlaku. Jangkitan hati, seperti hepatitis C, boleh dirawat pada masa kita apabila ia dikesan pada masa yang tepat. Jika virus disyaki, analisis PCR dilakukan.

Memandangkan sekian lama gejala virus dapat bertopeng, seseorang mungkin tidak merasakan permulaan penyakit ini. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh dalam 60-70% kes, hepatitis C dikesan, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis ini dijalankan dalam tempoh tertentu untuk menentukan peringkat penyakit dan menetapkan rawatan yang sesuai. Untuk melakukan tanpa itu, tanpa memohon semua prosedur ini, adalah mungkin, diberi vaksin terhadap hepatitis.

Analisis itu, termasuk diagnostik PCR, memberikan gambaran tentang penyakit ini, bagaimana virus itu aktif pada tempoh pembangunan yang berlainan.

Pertama, terdapat analisis kualitatif yang hanya mengesahkan hipotesis mengenai jangkitan, dan kemudian kuantitatif, menentukan beban pada hati. Pilihan yang ideal akan menjadi hasil negatif untuk hepatitis C dalam bahan genetik pesakit.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Terdapat analisis kualitatif dan kuantitatif. Intipati pertama ialah ia menentukan kehadiran jangkitan dalam darah. Dan ini bermakna virus menjangkiti sel-sel hati yang sihat. Apabila antibodi kepada hepatitis C ditemui dalam pesakit, ujian kualitatif dilakukan dengan segera. Kadar yang harus diberikan adalah "tidak dikesan dalam darah". Apabila menentukan kepekatan virus, ada keperluan untuk mengetahui kepekaan sistem diagnostik, kerana orang yang menjalani terapi antiviral boleh melakukan analisis. Tahap kepekaan penganalisis tidak boleh kurang daripada 50 IU / ml.

Apabila virus dikesan, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, beban virus, yang menentukan kepekatan virus dalam darah dan keparahan penyakit.

RNA virus, yang dalam jumlah tertentu darah, ditakrifkan sebagai norma pada kadar 1 ml setiap 1 sentimeter padu. Selepas mengukur beban virus, adalah mungkin untuk menilai tahap jangkitan persekitaran yang masih tidak dijangkiti. Sebaik sahaja kepekatan hepatitis C meningkat dalam darah, perlu untuk mengasingkan diri dari alam sekitar.

Adalah penting pada peringkat awal untuk mengesan tahap konsentrasi hepatitis, untuk menentukan kadar pemulihan. Sekiranya kadar hepatitis C melebihi melebihi 800 ribu IU / ml, ia dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan sehingga satu juta kritikal. Jika jarak kuantitatif kurang daripada 400 ribu IU / ml, dianggap jangkitan orang-orang di sekitar akan berkurangan. Angka ini menjelaskan bahawa hepatitis C hadir dalam tubuh dalam dos yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif zarah RNA virus, jadi ia dilantik semula beberapa kali untuk ketepatan diagnosis.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pesakit adalah mengenal pasti tahap jangkitan kepada orang lain.

Ujian hepatitis C

membolehkan anda menilai keberkesanan terapi antiviral, tahap infeksi dan jumlah tisu yang dijangkiti.

Adalah penting untuk mencegah perkembangan penyakit itu, mengambil langkah pencegahan tepat pada masanya, menetapkan rawatan yang betul berdasarkan diagnostik PCR. Jika menurut keputusan, paras viral load kurang daripada 400 ribu IU / ml, maka kepekatannya mungkin sedikit, yang menunjukkan pemulihan penuh mungkin. Norma untuk mendapatkan hasil positif ialah ketiadaan jangkitan.

Keputusan analisis PCR:

Jawapan positif bermakna jangkitan dalam bahan biologi. Analisis ini dapat menentukan bilangan sel yang dijangkiti. Jawapan negatif menunjukkan ketiadaan jangkitan, yang dicari dengan teliti di dalam badan.

Kaedah penentuan kuantitatif hepatitis C adalah tepat dan bermaklumat, yang dilakukan pada peralatan yang mempunyai kepekaan tinggi. Memutuskan hasil analisis membolehkan anda mengetahui sama ada jangkitan dan kekhususannya, untuk melihat bilangan terkecil sel yang terinfeksi pada penganalisis yang sangat sensitif.

Keputusan palsu atau bertentangan jarang diberikan oleh analisis, lebih kerap ini berlaku dalam kajian immunoassay.

Hepatitis C adalah salah satu yang paling berbahaya dan sukar untuk mendiagnosis penyakit virus. Untuk menentukan penyakit ini, kaedah PCR hepatitis C digunakan. Ini adalah teknik berteknologi tinggi baru yang membolehkan anda menyiasat bahan genetik untuk kewujudan kehidupan di zarah-zarah terkecil (molekul) dan kuantiti terkecil. Virus hepatitis sangat berterusan, ia boleh hidup di alam sekitar untuk jangka masa yang panjang dan mantap di dalam tubuh manusia.

Apakah PCR?

Hari ini terdapat sejumlah besar pelbagai penyakit. Dan bukannya kaedah yang lebih kecil untuk penentuan mereka. Oleh kerana agen-agen jangkitan telah belajar mengambil akar dalam alam sekitar dan berkembang dengan mudah, teknologi terkini digunakan untuk mendiagnosis mereka. Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah kaedah yang lebih cepat dan lebih tepat yang bertujuan untuk mencari agen penyebab penyakit dengan meningkatkan jumlah DNA virus hepatitis dalam sampel. Tentang dia sering menulis: mencari jarum dalam jerami, dan kemudian membina jarum jarum.

Jenis kaedah PCR

Ujian kualitatif akan membantu menentukan kehadiran virus hepatitis C di dalam badan.

Alokasikan analisis kualitatif dan kuantitatif terhadap hepatitis. Untuk menentukan sama ada virus itu ada di dalam badan, dan mereka yang telah menemui antibodi untuk hepatitis C, menjalankan ujian yang berkualiti tinggi. Analisis pengekodan memberikan hasil: "positif"; "Negatif." Makna negatif bermaksud: sama ada seseorang itu sihat atau tidak ada ejen yang cukup dalam darah dan mereka tidak dapat dijumpai. Oleh itu, patut dilakukan pemeriksaan semula selepas beberapa waktu.

Hasil positif menunjukkan adanya jangkitan. Ini hampir selalu nilai sebenar. Keputusan yang salah biasanya bergantung pada faktor manusia (penyimpanan tidak wajar atau ketidakpatuhan terhadap peraturan prosedur). Apabila kadarnya adalah, hasilnya adalah negatif. Sebelum ujian tidak ada peraturan khusus, hanya ambil darah dari urat.

Jika ditemui, lakukan analisis kuantitatif (viral load) - ia memberikan nilai berangka: berapa banyak RNA virus hepatitis pada masa ini dalam jumlah yang ditetapkan bahan dalam kajian. Dengan perkembangan jangkitan aktif, ia boleh dikesan pada 1-2 minggu pada orang yang dijangkiti. Darah juga biasanya diperiksa kerana agen beredar secara bebas di dalamnya.

Ciri-ciri analisis PCR kuantitatif

PCR kuantitatif akan membantu anda memilih rawatan yang paling berkesan untuk hepatitis C.

Perbezaan analisis kuantitatif adalah bahawa tidak semuanya berlalu. Kualitatif - menentukan kehadiran, dan kuantitatif - membantu dengan pengesahan kesimpulan "virus hepatitis", prognosis perjalanan penyakit dan menentukan perjalanan rawatan. Seberapa berkesan terapinya adalah dengan bilangan RNA sebelum dan semasa rawatan. Juga dengan bantuannya menentukan pelantikan dos ubat.

Sebagai peraturan, ia dihasilkan sebelum permulaan rawatan. Petunjuk utama boleh:

penentuan viral load dan kawalan terapi antiviral, PCR berkualiti tinggi yang menemui antibodi hepatitis C, mencari hepatitis C akut dan kronik, kewujudan hepatitis bercampur, ketika merencanakan rawatan, jika kajian kualitatif masih menemukan kehadiran penyakit itu setelah minggu ke-12 terapi.

Lihat juga, apa viral load dalam hepatitis: terapi rendah dilaksanakan dengan jayanya; meningkat - rawatan tidak berkesan dan perlu diubah.

Apakah yang dilakukan pada pelbagai peringkat penyakit ini?

Analisis ini akan membantu memantau keputusan terapi di semua peringkat rawatan.

Pada fasa-fasa yang berlainan penyakit ini, satu kajian dilakukan untuk mengkaji semula manfaat rawatan dan perancangan tempohnya. Dengan tindak balas yang baik terhadap terapi, ia dipendekkan. Jika tidak, dengan penarikan balik virus secara perlahan, rawatan itu berpanjangan. PCR untuk hepatitis melakukan terapi 1.4, 12, 24 minggu. Apabila penunjuk tidak jatuh selepas 12 minggu, mereka menyimpulkan bahawa terapi tidak sesuai untuk organisma ini. Analisis ini digunakan untuk menentukan sejauh mana jangkitannya dan sejauh mana ia mungkin untuk menghantarnya. Sebagai contoh, semasa hamil terdapat risiko untuk menjangkiti bayi. Selepas terapi, kenali risiko pengulangan penyakit ini.

Decryption

Selepas kajian ini, analisis dapat menguraikan tidak dalam angka, tetapi dengan kata-kata: "di bawah julat ukur" dan "tidak dikesan." PCR kuantitatif lebih peka terhadap kualitatif. Kesimpulan "tidak dapat dikesan" boleh mengatakan bahawa jangkitan tidak dijumpai. "Di bawah julat ukuran" - ujian itu tidak menemui virus, tetapi ia adalah dalam nilai yang kecil. Dalam keadaan ini, lakukan kajian kedua.

Beban virus adalah penentuan jumlah RNA berjangkit dalam jumlah darah yang ditetapkan (1 ml = 1 meter padu secara kuantitatif). Dirumuskan dalam pengukuran antarabangsa IU / ml. Makmal berasingan menyatakan salinan / ml. Sistem ujian yang berbeza dapat menguraikan terjemahan komponen menjadi nilai-nilai antarabangsa dengan cara mereka sendiri. Jadual 1. Menguraikan analisis kuantitatif RNA virus

Diagnosis hepatitis termasuk pelbagai ujian untuk menentukan kehadiran virus dalam darah. Satu cara untuk mengesan penyakit adalah kaedah penyelidikan seperti PCR untuk hepatitis C. Apakah itu, mengapa analisis PCR untuk hepatitis sama pentingnya dilakukan dan didekodkan?

Apa itu

Reaksi rantai polimerase, atau PCR, digunakan untuk mendiagnosis ulser gastrik, kolitis, enteritis. Tetapi kelebihan utamanya ialah ia membantu mengesan dalam badan kedua-dua virus hepatitis C dan antibodi kepadanya, yang mempunyai keupayaan untuk tidak menyebabkan reaksi sistem imun kerana kemampuan mereka untuk bermutasi.

Kajian dan intipatinya terletak pada penciptaan keadaan-keadaan tertentu di mana tindak balas rantai Hepatitis RNA berlaku. Jika, jika dibandingkan dengan urutan nukleotida virus hepatitis C, kebetulan dijumpai, ini menunjukkan bahawa ada zarah virus dalam darah, dan proses pemisahan berlaku di hati. Jika jumlah virus berada di bawah tahap tertentu, diagnosis negatif dibuat, dan jika lebih tinggi, yang positif.

Terdapat dua jenis ujian darah menggunakan kaedah PCR untuk hepatitis: analisis kuantitatif dan analisis kualitatif.

PCR kuantitatif, seperti yang dinyatakan di atas, menentukan kepekatan RNA virus hepatitis. Di samping itu, beliau dapat memberi maklumat tentang intensiti yang patologi berkembang, dan keberkesanan rawatan yang ditetapkan. Analisis kuantitatif hepatitis C sangat penting kerana ia memperbaiki rintangan terhadap tindakan ubat antivirus dan membolehkan anda menyesuaikan terapi.

Selepas pesakit menjalani rawatan, PCR membantu menentukan urutan pelantikan selanjutnya. Dalam beberapa kes, keperluan untuk tinjauan tambahan. Sebagai contoh, jika tahap ALP meningkat (tetapi tidak lebih daripada 2 kali dalam tempoh enam bulan), dan transkrip analisis menunjukkan beban virus di atas 105 IU / ml, pesakit ditetapkan sebagai biopsi. Jika analisis kuantitatif PCR mendedahkan keradangan yang teruk dan fibrosis, pesakit dirawat sebagai rawatan dengan ubat-ubatan antiviral.

Dalam keadaan di mana sejumlah besar zarah virus digabungkan dengan ALT yang tinggi, pesakit harus segera dirawat tanpa langkah diagnostik tambahan.

Ambil ujian ini dan ketahui jika anda mempunyai masalah hati.

Hanya pakar yang berkelayakan dan berpengalaman yang dapat menguraikan secara kualitatif dalam analisis kuantitatif darah untuk hepatitis, dan teknologi moden membantu melakukan ini dengan kepekatan rendah virus dalam darah.

Analisis kualitatif PCR bertujuan untuk menentukan dan mengesahkan kehadiran sebenar virus dalam tubuh. Ia dilakukan apabila antibodi untuk hepatitis dikesan dalam darah. Ia adalah analisis kualitatif mengenai hepatitis yang menjamin ketepatan hasilnya sebanyak 100% dan membolehkan anda membuat diagnosis pada peringkat awal penyakit, yang memungkinkan untuk memulakan perjuangan terhadap hepatitis yang sudah ada pada minggu pertama selepas jangkitan dan meningkatkan kemungkinan pemulihan lengkap (dalam kes penyakit jenis B).

Faedah PCR

Dalam kajian oleh PCR dan menguraikan ujian darah untuk hepatitis, anda juga boleh menentukan genotip patogen tersebut. Secara keseluruhan, terdapat 6 genotip virus dan sebilangan besar subtipe, bagaimanapun, di rantau kita, 1, 2 dan 3 genotip telah menjadi biasa.

Kelebihan lain dari diagnosis jenis ini adalah:

• ketepatan tinggi penunjuk yang diperoleh dan kemungkinan kebarangkalian yang rendah di dalamnya;
• tahap kepekaan yang tinggi terhadap zarah virus dalam darah;
• kemungkinan mengenal pasti beberapa patogen sekaligus;
• diagnosis mikroorganisma patogen intraselular dengan variasi antigenik tinggi;
• bekerja dengan analisis penyahkodean untuk hepatitis membolehkan anda mengesan jangkitan semasa tersembunyi.

Siapa yang dilantik?

Kategori orang berikut harus lulus analisis PCR untuk hepatitis:

• wanita hamil;
• kakitangan penjagaan kesihatan;
• penderma darah dan organ yang berpotensi;
• mereka yang mempunyai ciri-ciri tanda penyakit;
• Individu yang dijangkiti HIV;
• penagih;
• pekerja seks rambang.

Bagaimanakah analisa dijalankan dan adakah perlu untuk mempersiapkannya

Sampel darah untuk PCR dilakukan dari urat. Sebagai peraturan, ini berlaku pada waktu pagi sebelum orang itu dimakan, kerana selepas makan, sekurang-kurangnya 8 jam harus lulus. Dalam kes-kes yang teruk, darah boleh diambil untuk pemeriksaan pada waktu siang atau pada waktu petang, tetapi jurang masa antara analisis dan pengambilan makanan harus sekurang-kurangnya 5 jam.

Faktor manusia secara kuantitatif boleh menjejaskan keputusan: ketepatan mereka dalam beberapa kes berkurangan dari 100% hingga 95%, oleh itu, perlu untuk menyediakan derma darah terlebih dahulu. Kualiti biomaterial untuk analisis akan sesuai apabila pesakit mengikuti peraturan berikut:

• sebelum menderma darah, anda hanya boleh minum air bersih;
• dua hari sebelum kajian, adalah perlu untuk meninggalkan pengambilan makanan goreng dan lemak, serta minuman beralkohol;
• satu hari sebelum lawatan ke makmal harus berhenti mengambil ubat. Jika ini tidak mungkin, adalah penting untuk memberitahu juruteknik makmal dan doktor yang hadir;
• hari sebelum anda perlu mengelakkan situasi tekanan dan usaha fizikal;
• ultrasound, pemeriksaan sinar-X dan ujian instrumental tidak boleh dilakukan sejurus sebelum derma darah;
• selama sejam sebelum analisis, anda mesti menahan diri dari merokok;
• 20 minit sebelum menderma darah, anda perlu terganggu, tenang dan bernafas.

Sekiranya seorang kanak-kanak berusia di bawah 5 tahun lulus kajian, ibu bapa mesti memastikan bahawa dia minum air rebus setiap 10 minit selama setengah jam sebelum mengambil biomaterial.

Dekripsi data yang diterima

Pengekodan analisis boleh diwakili oleh kata-kata (dalam hal kajian kualitatif), contohnya, "tidak dapat dikesan" atau "di bawah jangkauan perubahan" Dalam kes pertama, ini menunjukkan bahawa jangkitan tidak dikesan. Pada yang kedua - bahawa virus hadir, tetapi dalam kuantiti yang kecil. Keadaan ini memerlukan penyelidikan semula.

Beban virus ditentukan oleh jumlah RNA berjangkit dan dirujuk sebagai IU / ml atau salinan / ml.

Penunjuk normal (norma) analisis kuantitatif untuk hepatitis C adalah julat dari 1.8x102 hingga 2.4x107 IU / ml.

Kepekatan virus dalam darah boleh:

• rendah: dari 600 IU / ml hingga 3x10 4 / ml;
• sederhana: dari 3x10 4 IU / ml hingga 8x10 5 IU / ml;
• tinggi: lebih daripada 8x10 5 IU / ml.

Analisis kuantitatif dan kualitatif PCR untuk hepatitis membolehkan untuk menentukan kehadiran virus dalam badan dan tahap kepekatannya. Reaksi rantai multi-dimensi mampu mendiagnosis penyakit ini pada peringkat awal, tetapi untuk ini, pesakit secepat mungkin beralih kepada institusi perubatan untuk mendapatkan bantuan dan tegas mengikuti saran-saran dari doktor yang hadir.

Virus hepatitis C dapat melipatgandakan sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Oleh kerana pelbagai mutasi, pertahanan imun badan semakin lemah, genotip dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan jenis yang tepat dan tepat pada masanya, keberkesanan terapi antiviral bergantung. Bahaya jangkitan adalah bahawa penyakit ini adalah asimtomatik. Hanya 15 peratus daripada 100 boleh mengalami loya dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Pengesanan virus Hepatitis C

Kadar standard hepatitis C dalam saiz 40 hingga 60 nm, dengan kebanyakan lipid, kerosakan hati yang disebabkan oleh penyakit akut atau kronik penyakit ini. Hepatitis C, iaitu, RNA virus keluarga Togaviridae, sangat tahan, disebarkan melalui pemindahan darah atau penggunaan barang tidak steril, bekalan kebersihan yang tidak betul, dan lain-lain. Analisis kuantitatif membolehkan anda memeriksa darah dan mengenal pasti struktur genetik virus yang dijangkiti.

Untuk hepatitis C dan genotipnya ditentukan, menjalankan analisis kuantitatif. Bergantung kepada penganalisis yang boleh menentukan tiga tahap kejadian virus RNA.

Subtipe boleh menghasilkan pelbagai modifikasi, jadi kekhususan dan kepekaan penganalisis mesti seratus peratus. Di samping mengesan penyakit itu dalam pesakit, perlu menentukan tahap keterukannya. Sesetengah makmal tidak mempunyai semua data mengenai penyahkodan virus RNA, terdapat kemungkinan tindak balas positif palsu.

Penyelidikan mengenai hepatitis C akan lebih tepat apabila mengkaji petunjuk ini:

Menarik perhatian kepada hasil penunjuk ini dan keadaan umum badan, hasilnya dipaparkan menunjukkan tahap jangkitan, bentuk, dan jumlah sel-sel hepatitis C dalam darah. Ini menyumbang kepada proses penyembuhan dan keberkesanan terapi antiviral.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Reaksi rantai multi-dimensi (PCR) memberi idea tentang bilangan zarah DNA dalam analisis pesakit yang diambil, dengan tepat mengenal pasti agen berjangkit.

Agen penyebab penyakit berjangkit boleh berlaku. Jangkitan hati, seperti hepatitis C, boleh dirawat pada masa kita apabila ia dikesan pada masa yang tepat. Jika virus disyaki, analisis PCR dilakukan.

Memandangkan sekian lama gejala virus dapat bertopeng, seseorang mungkin tidak merasakan permulaan penyakit ini. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh dalam 60-70% kes, hepatitis C dikesan, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis ini dijalankan dalam tempoh tertentu untuk menentukan peringkat penyakit dan menetapkan rawatan yang sesuai. Untuk melakukan tanpa itu, tanpa memohon semua prosedur ini, adalah mungkin, diberi vaksin terhadap hepatitis.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Terdapat analisis kualitatif dan kuantitatif. Intipati pertama ialah ia menentukan kehadiran jangkitan dalam darah. Dan ini bermakna virus menjangkiti sel-sel hati yang sihat. Apabila antibodi kepada hepatitis C ditemui dalam pesakit, ujian kualitatif dilakukan dengan segera. Kadar yang harus diberikan adalah "tidak dikesan dalam darah". Apabila menentukan kepekatan virus, ada keperluan untuk mengetahui kepekaan sistem diagnostik, kerana orang yang menjalani terapi antiviral boleh melakukan analisis. Tahap kepekaan penganalisis tidak boleh kurang daripada 50 IU / ml.

Apabila virus dikesan, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, beban virus, yang menentukan kepekatan virus dalam darah dan keparahan penyakit.

RNA virus, yang dalam jumlah tertentu darah, ditakrifkan sebagai norma pada kadar 1 ml setiap 1 sentimeter padu. Selepas mengukur beban virus, adalah mungkin untuk menilai tahap jangkitan persekitaran yang masih tidak dijangkiti. Sebaik sahaja kepekatan hepatitis C meningkat dalam darah, perlu untuk mengasingkan diri dari alam sekitar.

Adalah penting pada peringkat awal untuk mengesan tahap konsentrasi hepatitis, untuk menentukan kadar pemulihan. Sekiranya kadar hepatitis C melebihi melebihi 800 ribu IU / ml, ia dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan sehingga satu juta kritikal. Jika jarak kuantitatif kurang daripada 400 ribu IU / ml, dianggap jangkitan orang-orang di sekitar akan berkurangan. Angka ini menjelaskan bahawa hepatitis C hadir dalam tubuh dalam dos yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif zarah RNA virus, jadi ia dilantik semula beberapa kali untuk ketepatan diagnosis.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pesakit adalah mengenal pasti tahap jangkitan kepada orang lain.

Keputusan analisis PCR:

1. Jawapan positif bermakna jangkitan dalam bahan biologi. Analisis ini dapat menentukan bilangan sel yang dijangkiti.
2. Jawapan negatif menunjukkan ketiadaan jangkitan, yang dicari dengan teliti di dalam badan.

Kaedah penentuan kuantitatif hepatitis C adalah tepat dan bermaklumat, yang dilakukan pada peralatan yang mempunyai kepekaan tinggi. Memutuskan hasil analisis membolehkan anda mengetahui sama ada jangkitan dan kekhususannya, untuk melihat bilangan terkecil sel yang terinfeksi pada penganalisis yang sangat sensitif.

Keputusan palsu atau bertentangan jarang diberikan oleh analisis, lebih kerap ini berlaku dalam kajian immunoassay.

Virus Hepatitis C adalah virus yang mengandungi molekul RNA. Dia mampu mengelakkan tindak balas imun tubuh kerana kemampuannya bermutasi tinggi. Terdapat enam genotip utama virus dan banyak subtipe. Di rantau kita, genotip 1, 2 dan 3 kebanyakannya diedarkan.

Dalam 75-80%, penyakit menjadi kronik, yang menyebabkan fibrosis hati, suatu keadaan di mana tisu hati digantikan oleh tisu penghubung. Fibrosis, seterusnya, membawa kepada kanser atau sirosis. Cara utama penyebaran penyakit adalah melalui darah. Jika seseorang mempunyai petunjuk untuk ujian untuk hepatitis C, dia akan diberi dua ujian asas. Antibodi kepada virus ditentukan, dan jika tidak ada, ia percaya bahawa dia tidak mempunyai hepatitis. Jika kehadiran antibodi kepada virus hepatitis dikesan dalam darah, analisis PCR dilakukan.

RNA oleh kaedah ini ditentukan dalam darah dalam tempoh 10-12 hari selepas jangkitan dan menunjukkan bahawa virus itu secara aktif mereplikasi dalam badan. Dalam tempoh ini, adalah mustahil untuk mengesan virus dengan cara yang lain, kerana ia masih tidak menghasilkan antibodi tertentu dan kerosakan hati tidak dapat dilihat dengan ujian biokimia dan biopsi.

Pelbagai kajian PCR

Analisis reaksi rantai polimerase mempunyai kelebihan tertentu:

1. Dalam kajian ini, virus itu sendiri ditentukan, dan bukan produk metaboliknya. Dalam kes ini, adalah mungkin untuk menentukan jenis patogen.
2. Teknik ini mempunyai kekhususan yang tinggi kerana fakta bahawa hanya seksyen DNA tertentu yang sedang dikaji, kebarangkalian keputusan yang salah akan berkurangan.
3. Ia mempunyai sensitiviti yang sangat tinggi, bahkan ditentukan jumlah minimum virus dalam darah.

Terdapat dua kaedah utama untuk menguji darah untuk hepatitis C menggunakan PCR: analisis kualitatif dan kuantitatif PCR. Kaedah kualitatif digunakan untuk menentukan sama ada virus hadir. Sesiapa yang mempunyai antibodi untuk hepatitis telah dikesan dalam darah, analisis seperti itu dijalankan. Hasilnya hanya boleh terdiri dari dua jenis: "dikesan" dan "tidak dikesan", nilai terakhir dianggap sebagai norma.

Hasil ujian yang positif bermaksud bahawa serpihan RNA virus dijumpai dalam sampel, yang, pada gilirannya, menunjukkan bahawa orang itu dijangkiti hepatitis. Dalam kes keputusan negatif, dua pilihan adalah mungkin: tiada jangkitan atau kepekatannya begitu rendah sehingga tidak dapat dikesan oleh teknik ini.

Kaedah kuantitatif berbeza daripada bahan penyelidikan, dalam tugas dan petunjuknya. Tidak semua pesakit dengan hepatitis menjalani analisis sedemikian. Dia, seperti yang lain, mempunyai matlamat tertentu. Penentuan beban virus atau analisis kuantitatif PCR untuk RNA virus digunakan:

• untuk penentuan RNA virus dalam darah dan diagnosis "hepatitis virus";
• untuk meramalkan kronik hepatitis dan perjalanan penyakit;
• untuk memantau rawatan antiviral dan memutuskan sambungan, pengurangan atau perubahan dalam taktik rawatan.

Kajian ini dilakukan dengan adanya tanda-tanda seperti berikut:

• Hepatitis C dikesan oleh kajian kualitatif dan antibodi dikesan dalam darah;
• dengan hepatitis bercampur;
• jika terapi antiviral dirancang;
• semasa dan selepas rawatan untuk hepatitis C;
• dengan kehadiran hepatitis C. kronik dan akut

Ujian ini dijalankan untuk menganggarkan bilangan unit virus dalam jumlah darah contoh 1 cm³ atau 1 ml. Keputusan diberikan dalam nombor. Petunjuk yang digunakan: IU / ml, yang bermaksud unit antarabangsa setiap mililiter dan salinan per ml, bilangan salinan RNA dalam 1 ml sampel. Semakin tinggi penunjuk kuantitatif analisis, semakin besar kemungkinan penyebaran virus itu ke orang lain.

R-DNA adalah kaedah DNA bercabang. Kaedah yang lebih mudah dan murah. Digunakan untuk lebih banyak sampel, mempunyai kepekaan yang rendah, dari 500 IU / ml. Dengan kepekaan sedemikian, ada peluang untuk tidak mengenal pasti virus itu, walaupun ia ada dalam darah.

TMA adalah kaedah penguatan transkripsi. Teknik ini mengesan asid nukleik dalam darah. Ia mempunyai kos rendah dan kepekaan yang tinggi, dari 5-10 IU / ml. Teknik yang agak baru yang membolehkan anda mempercepat dan mengurangkan kos proses ujian.

Hasil analisis kuantitatif definisi virus RNA, yang disampaikan oleh makmal, ditafsirkan sebagai berikut: