Analisis ELISA - dari pemeriksaan untuk HbsAg kepada diagnostik kompleks

Dengan pengenalan teknologi moden dalam bidang perubatan, kemungkinan kaedah diagnostik imunokimia, yang dapat dengan cepat dan tepat mengenali penyakit ini, apabila kaedah lain tidak berkuasa, semakin berkembang. Memahami bahawa virus hepatitis B mampu berada di dalam badan dalam kepekatan yang sangat rendah, di mana ia tidak dapat dikesan walaupun dengan cara yang boleh dipercayai seperti PCR, menjadikannya perlu untuk melihat wajah baru mengenai masalah mendiagnosis penyakit ini dan untuk menghargai kemungkinan immunoassay.

Dalam bahan ini kita akan menganalisis secara terperinci semua yang berkaitan dengan jenis penyelidikan makmal ini. Anda akan belajar apa yang immunoassay enzim dan bagaimana ia dilakukan, apa antigen Australia dan bagaimana ia ditentukan, apa yang tidak dapat difahami oleh singkatan Hbs ag, Hbcor, dengan makna dan peranan mereka dalam mentafsirkan analisis, dan juga mendapatkan banyak maklumat berguna dan menarik.

Kandungan artikel:

Maklumat am mengenai ELISA

ELISA (disingkat ELISA) adalah kaedah diagnostik makmal yang dapat mengesan antigen dan antibodi dari pelbagai jenis jangkitan, termasuk hepatitis B. Pengetahuan semasa sifat-sifat virus dan ciri-ciri tindak balas imun tubuh, bukan hanya mengesan jangkitan, tetapi juga mengenal pasti peringkat, keberkesanan vaksinasi dan menilai keberkesanan rawatan.

Intipati enzim immunoassay

ELISA didasarkan pada reaksi antigen-antibodi, atau sebaliknya sifatnya.

Sebagai tindak balas terhadap pencerobohan bahan asing (antigen), yang khususnya adalah protein virus, tubuh menghasilkan protein pelindung - antibodi. Antibodi memasuki reaksi yang kompleks dengan antigen, menyekat aktivitinya.

Kami akan membincangkan lebih lanjut mengenai antigen dan antibodi di bawah, tetapi sekarang kita akan perhatikan bahawa bagi setiap antigen ada individu yang tegas, atau sebagai doktor mengatakan, antibodi homologus. Oleh itu, jika kita ingin mengesan antigen tertentu dalam darah, kita akan menggunakan tablet diagnostik dengan antibodi untuknya. Jika ada antigen dalam darah, ia akan bertindak balas dengan antibodi, yang dapat dikesan dalam pelbagai cara. Dan sebaliknya. Sekiranya kita ingin mencari sebarang antibodi, maka kita memerlukan tablet dengan antigen yang sesuai.

Selalunya, nilai diagnostik beruang hanya antibodi yang mana anda boleh mendiagnosis hampir apa-apa jangkitan. Walau bagaimanapun, keunikan virus hepatitis B adalah peranan utama dalam diagnosis yang dimainkan oleh salah satu antigen - antigen Australia.

Bagaimanakah IFA

Pertimbangkan prosedur ELISA yang biasa untuk contoh khusus apabila anda ingin mengenal pasti antibodi terhadap patogen.

Untuk diagnostik, tablet dengan 96 telaga digunakan, yang sebelum ini tepu dengan antigen yang sepadan. Selanjutnya, prosedurnya adalah seperti berikut:

serum digunakan untuk semua sel;

antibodi homologus bertindak balas dengan antigen dan dilampirkan pada plat;

membasuh tablet, membuang antibodi tidak terikat;

maka label enzimatik diperkenalkan ke dalam sel - bahan yang bertindak balas dengan antibodi dan menyebabkan pewarnaan kandungan sel.

Ini adalah prosedur piawai ELISA dengan pewarnaan, yang digunakan, contohnya, dalam jalur ujian immunochromatographic.

ELISA tidak terhad kepada penentuan kualitatif antibodi atau antigen patogen. Semakin banyak antibodi terkandung dalam sel-sel tablet, semakin kuat larutan berwarna. Membandingkan ketumpatan optiknya dengan kawalan, peralatan moden dapat mengira kepekatan antibodi per unit secara tepat dengan tepat. Oleh itu, ELISA kuantitatif dijalankan, ukuran pengukuran yang paling kerap ialah unit ketumpatan optik (EOP).

Analisis immunochemiluminescent

Hari ini terdapat beberapa dozen jenis ELISA, masing-masing mempunyai skop pilihan. Yang paling popular dalam diagnosis hepatitis B ialah analisis immunochemiluminescent.

Label enzimatik untuk analisis ini bukan kromatin, seperti dalam piawai ELISA, tetapi bahan khas - fosfor yang menyebabkan kompleksnya bercahaya dalam cahaya ultraviolet.

Dengan bantuan alat khas - luminometer, anda boleh menentukan tahap pelepasan dengan tepat dan, sebagai akibatnya, kepekatan bahan yang dikehendaki.

Menggunakan kaedah ELISA menentukan hampir semua antigen sedia ada virus hepatitis B dan antibodi kepada mereka.

Antigen virus Hepatitis B: Hbs, Hbe dan Hbc

Antigen istilah (antigen) berasal dari dua perkataan Inggeris: antibodi - antibodi dan penjana - pengeluar. Oleh itu, di bawah antigen memahami apa-apa bahan yang menyebabkan pembentukan antibodi dalam badan itu. Antigen yang paling biasa adalah sebatian protein.

Hari ini, tiga antigen virus hepatitis B dikenali: hbsag, hbc dan hbe.

Antigen Australia

Protein yang merupakan sebahagian daripada cacing luar hepatitis B patogen telah dikesan jauh sebelum penemuan virus itu sendiri. Antigen ini mendapat namanya kerana ia mula-mula dikenal pasti dari penduduk asli Australia. Walau bagaimanapun, pada mulanya, protein tidak dianggap sebagai antigen, tetapi unsur darah yang sama sekali normal di kalangan penduduk pribumi, dan kesedaran tentang hubungannya dengan penyakit hati datang sedikit kemudian.

Pemeliharaan jangka panjang antigen dalam darah dan ketiadaan antibodi menunjukkan kemungkinan pembentukan hepatitis B kronik HBeAg positif

Hari ini dalam kesusasteraan profesional nama "antigen Australia" tidak dapat dijumpai dan digantikan oleh singkatan antarabangsa - HbsAg (antigen permukaan hepatitis b - antigen permukaan hepatitis B). Di samping itu, anda boleh mencari singkatan hbs antigen atau hanya hbs. Mana-mana singkatan ini boleh diterima dan boleh ditambah dengan merakam HBV atau HBV - virus hepatitis B (virus hepatitis b).

Antigen permukaan virus hepatitis B mempunyai satu ciri yang luar biasa yang menjadikannya penanda diagnostik yang sangat diperlukan - kepekatannya dalam darah dapat mencapai tahap yang sangat tinggi, sehingga setengah miligram per mililiter darah. Ini kerana hanya sebahagian kecil daripada HBsAg baru, yang terbentuk semasa pembiakan virus hepatitis B, membina membran zarah-zarah virus baru, dan selebihnya - bebas mengedarkan darah. Akibatnya, bilangan zarah hbs dalam darah boleh melebihi jumlah berair beratus ribu kali.

Ciri ini menjadikan antigen Australia penanda utama dalam diagnosis penyaringan hepatitis B, yang dijumpai dalam darah seawal 4-6 minggu selepas jangkitan. Sebagai bentuk antibodi, antigen permukaan secara beransur-ansur digantikan oleh mereka. Jika selepas 6 bulan HBsAg berterusan, maka ini menunjukkan peralihan jangkitan kepada bentuk kronik.

Baru-baru ini, apabila menjadi mungkin untuk menentukan kepekatan hbs hbv, peranannya dalam diagnosis semakin meningkat, kerana bergantung pada tahap antigen dapat membedakan hepatitis B kronik (HBV) dari keadaan pembawa yang sihat, serta memantau keberkesanan rawatan.

Antigen teras

Di inti virus - nucleocapsid - adalah protein yang mengawal penghasilan semula virus HBcoreAg dan HBeAg.

HBcoreAg, yang juga boleh dipanggil HBCore-antigen, hbc atau antigen teras, hanya boleh didapati di tisu hati, secara langsung di dalam nuclei hepatosit. Antigen ini tidak dikesan dalam darah dan tidak mempunyai nilai diagnostik.

Struktur virus hepatitis

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - sebaliknya, memainkan peranan penting dalam diagnosis. HBeAg dan HBcoreAg adalah saudara terdekat. Mereka mempunyai persamaan hebat struktur dan berbeza terutamanya dalam kedudukan ruang molekul. Tidak seperti HBcore, HBe bukan sebahagian daripada dinding nukleokapsid, dan beredar secara bebas dalam darah.

Peranan HBe dalam proses menular tidak cukup jelas, bagaimanapun, keunikan tingkah laku dan hubungan mereka dengan proses berjangkit telah pun dipelajari dengan cukup. HBeAg menunjukkan pembiakan virus aktif dan membolehkan anda untuk menentukan fasa CHB - HBeAg positif atau HBeAg negatif.

HBe boleh dikesan dalam darah yang sudah dalam tempoh inkubasi virus hepatitis B akut (HBV), sementara kepekatan tinggi HBeAg selama 3 minggu kemungkinan besar menunjukkan ancaman proses kronik. Kepekatan HBe secara langsung berkaitan dengan kandungan partikel Dane (yang dikenali sebagai zarah virus hepatitis B) - semakin tinggi jumlah HBe, semakin tinggi kepekatan DNA HBV dalam darah.

HBeAg adalah penanda utama penyakit menular. Darah pesakit HBeAg positif lebih menular daripada HBeAg-negatif. Contohnya, pada wanita mengandung positif untuk HBe dan Hbs, kebarangkalian pemindahan jangkitan kepada kanak-kanak mencapai 50%, manakala kebarangkalian kejadian seperti ini dalam HBe negatif, tetapi Hbs ibu positif adalah 10-30%.

Hbe menentukan perjalanan hepatitis kronik. HBeAg-positif hepatitis B kronik mempunyai prognosis yang jauh lebih buruk dari segi perkembangan sirosis.

Itu mungkin semua yang anda perlu tahu mengenai antigen HBV, dan kami teruskan ke kumpulan kedua penanda hepatitis B - antibodi.

Esensi dan diagnosis hepatitis B

Sebaik sahaja peringkat berubah menjadi penyakit kuning, integumen dan membran mukosa mula menjadi kuning, keadaan kesihatan merosot dengan mendadak. Adalah penting untuk menekankan bahawa hati tumbuh dalam saiz dan menonjol dari bawah gundik kostum. Mengotorkan kulit dalam naungan berwarna kuning berlaku secara beransur-ansur. Jumlah enzim hati berkembang dalam darah, dan sampel thymol tidak berubah.

Mendiagnosis penyakit: kaedah asas dan konsep

Diagnosis hepatitis B dijalankan dengan beberapa cara:

1. Bermula, doktor mesti mengambil anamnesis dan menjalankan kajian menyeluruh terhadap orang itu. Semasa tinjauan, penekanan diberikan pada saat-saat seperti:

• sama ada pengenalan dadah atau cara lain untuk intravena;
• sama ada terdapat pemindahan darah;
• sama ada campur tangan pembedahan dijalankan;
• sama ada kerosakan kepada integriti kulit hadir;
• apa hubungan seksual;
• sama ada pesakit mempunyai hubungan dengan pesakit dengan hepatitis B atau pengangkutnya.

Jika mana-mana perkara tersebut berlaku, maka ia ditentukan berapa lama. Biasanya, jangkitan berlaku apabila menghubungi dari 6 minggu hingga enam bulan sebelum gejala pertama terjadi hepatitis.

2. Diagnosis makmal hepatitis B, analisis ELISA darah untuk antigen dan antibodi untuk hepatitis B. Pemeriksaan jenis ini bertujuan mengenal pasti 3 antigen:

• HBsAg (antigen, yang terletak secara dangkal),
• HBcAg (terletak di dalam)
• HBeAg (bersambung dengan antigen sebelumnya). Penyakit ini dicirikan oleh pengesanan awal antigen ini dalam darah.

Orang yang menderita hepatitis B dan mengandung antigen ini dalam darah sangat menular. Mereka mampu menjangkiti orang lain. Jika HBsAg tidak ada dalam darah manusia, ini menunjukkan bahawa dia sihat. Sekiranya seseorang itu sakit, maka tubuh mula mengeluarkan antibodi antigen yang ada.

3. Diagnosis hepatitis B menggunakan teknik PCR yang direka untuk mengesan DNA HBV dalam sistem peredaran darah. Sekiranya hasilnya positif, maka orang itu mempunyai hepatitis. Analisis DNA HBV dipanggil kualitatif. Terdapat juga PCR kuantitatif. PCR kuantitatif memberi peluang untuk mengenal pasti beban dengan kehadiran virus hepatitis. Apakah viral load? Ini adalah bilangan salinan DNA HBV dalam 1 ml darah. Analisis kuantitatif hepatitis menunjukkan aktiviti virus itu.

4. Ujian darah untuk biokimia. Analisis ini melibatkan penentuan bilangan enzim yang dihasilkan oleh hati. Enzim sedemikian termasuk ALT, AST. Mereka terletak di dalam sel hati - hepatosit. Jika sel hati rosak, enzim dibebaskan dan masuk ke dalam darah. Analisis positif dianggap hanya apabila bilangan enzim hati melebihi norma. Kajian menunjukkan sama ada terdapat proses keradangan di hati dan aktiviti mereka.

5. Pemeriksaan ultrabunyi, elastometri, dll. Diagnosis hepatitis boleh dijalankan dan kaedah bukan makmal. Menggunakan ultrasound memeriksa organ perut. Ultrasound memberikan gambaran yang jelas dalam apa-apa proses keradangan hati dan kapalnya. Berkesan menjalankan elastometri hati. Kaedah elastometri memberi idea tentang tahap fibrosis dalam tisu hati.

6. Analisis yang paling penting ialah kehadiran antigen hepatitis B dalam jisim sel darah merah. Jika wujud, ini menunjukkan kehadiran jangkitan dalam tubuh manusia.

7. Jenis makmal diagnosis hepatitis termasuk penentuan antigen dan antibodi dalam jisim erythrocyte. HBsAg yang paling biasa ditunjukkan dalam sistem peredaran darah walaupun dalam tempoh inkubasi hepatitis. Seseorang tidak tahu tentang perkembangan penyakitnya, dan dalam perubahan darah sudah ada. Apabila hepatitis akut, HBsAg hilang daripada darah. Biasanya HBsAg tidak hadir semasa bulan pertama tempoh icterik, dan antibodi antigen ini mula dapat dilihat dalam sistem peredaran darah 90 hari selepas jangkitan.

Ujian antibodi positif tidak bermakna seseorang mempunyai hepatitis. Ada kemungkinan dia pernah mengalami hepatitis tanpa agen D. Jika tidak ada HBsAg dalam darah pesakit selepas rawatan, tetapi ada antibodi, ini menunjukkan prognosis yang baik yang menunjukkan bahawa pesakit sedang pulih. Sekiranya pesakit mempunyai hepatitis kronik atau teruk, maka antibodi boleh muncul dari hari-hari pertama tempoh icterik.

Setaraf yang boleh dipercayai ialah IgM anti-HBc dalam darah. Mereka diturunkan pada akhir tempoh preikterik. Mereka hadir sepanjang tempoh manifestasi jelas. Sekiranya analisis mengandungi IgM anti-HBc, maka itu bermakna virus terus berkembang. Apabila permulaan pemulihan, IgM anti-HBc hilang. Fasa akut penyakit ini boleh menghasilkan ujian IgG anti-HBc. Mereka akan dikesan sepanjang hayat seseorang.

Apabila tempoh inkubasi hepatitis (terutama autoimun) selesai, HBeAg mula muncul dalam darah. Mereka memaklumkan tentang bahagian aktif dan peningkatan zarah berjangkit. Sebaik sahaja tempoh icterik bermula, NVAAg hilang. Ia digantikan oleh anti-HBe. Anti-HBe menunjukkan bahawa aktiviti jangkitan dikurangkan dan pemulihan tidak lama lagi akan datang. Tetapi pembiakan virus tidak berhenti!

Hepatitis akut boleh berubah menjadi kronik. Mengenai ini akan bercakap yang dikenal pasti dalam darah HVеAg. Sekiranya ia hadir, ini bermakna kebarangkalian mengubah proses menjadi bentuk kronik adalah tinggi. Kehadiran HeVag menunjukkan pesakit yang sangat berjangkit.

Perlu diingat bahawa diagnosis laboratorium hepatitis B, yang memberikan hasil negatif untuk HBsAg, tidak mengecualikan diagnosis itu sendiri. Unsur penting adalah kehadiran IgM anti-HBc dalam darah. Antibodi ini akan mengesahkan penyakit dengan tepat. Sekiranya ujian darah tidak mengandungi IgM anti-HBc, maka ini mungkin menunjukkan kehadiran HBV, dan kehadiran antibodi ini menunjukkan peningkatan jangkitan.

Pengesanan DNA Hepatitis B

Kajian yang paling penting untuk menentukan kehadiran DNA virus adalah PCR. Analisis ini menunjukkan aktiviti proses menular. Dengan kaedah ini, anda boleh mengetahui tentang prognosis penyakit ini.

Sekiranya hepatitis lebih baik, maka DNA HBV hilang dari darah semasa proses awal jangkitan. Diagnosis makmal dalam bentuk PCR memberikan data mengenai mutu rawatan (apakah kesan ubat tertentu).

Untuk memahami apa taktik yang perlu diambil untuk pelantikan langkah-langkah terapeutik, adalah perlu untuk menjalankan kaedah kuantitatif PCR. PCR kuantitatif memberikan bukti tindak balas positif daripada terapi.

Asas untuk diagnosis

Untuk membuat diagnosis yang sesuai, peperiksaan berikut diperlukan:

1. Pemeriksaan harian, palpation.
2. Ultrasound hati.
3. Analisis biokimia darah (dijalankan berulang kali).
4. Pemeriksaan untuk HBsAg, HBeAg, anti-HBe, IgM anti-HBc, jumlah anti-HBc, HBV DNA.
5. Penanda HBV dan HCV (hepatitis virus dikecualikan).
6. Tebukan hati.
7. Biopsi hati. Dengan bantuan jarum khas, dinding abdomen dibubarkan dan sekeping kecil hati dikeluarkan untuk peperiksaan histologi (sekeping mempunyai saiz tidak lebih dari setengah gram). Biopsi adalah kaedah ujian terkini untuk hepatitis. Terima kasih kepadanya, anda boleh membincangkan mengenai tahap aktiviti jangkitan, fibrosis hati dengan tepat. Biopsi adalah prosedur pembedahan. Ia boleh membawa kepada komplikasi, jadi ia sering tidak digunakan untuk diagnosis.
8. Fibroelastografi. Ia boleh digunakan untuk menganggarkan kepadatan tisu hati. Teknik ini sama dengan ultrasound. Kajian ini menggunakan sensor khas yang dipasang pada kulit di tapak unjuran hati.
9. Fibrotest. Ia berdasarkan pada menghitung jumlah darah tertentu.

Hepatitis B kronik

Fasa hepatitis B kronik:

Fasa 1 - Replikasi virus. Virus ini didarab dengan peningkatan aktiviti.

Fasa 2 - integrasi. Virus berhenti mendarab. Genom virus mula berintegrasi ke dalam DNA sel-sel hati biasa, hepatosit.

Untuk menentukan kadar perkembangan virus, penting untuk memahami keterukan proses, hasil, tahap gangguan sel-sel hati. Diagnosis makmal hepatitis kronik adalah berdasarkan pengesanan:

Jika hepatitis HBeAg-positif (analisis positif), maka dalam jisim erythrocyte akan:

• dalam peringkat pembiakan - HBsAg, HBeAg, IgM anti-HBc, anti-HBc (jumlah), DNA HBV;
• di peringkat penyisipan hepatosit menjadi DNA - HBsAg, anti-HBe, anti-HBc (jumlah), DNA HBV.

Jika hepatitis seronegatif, maka HBsAg, anti-HBe, IgM anti-HBc, anti-HBc, HBV DNA akan hadir dalam jisim darah. Lebih-lebih lagi, kehadiran mereka tidak bergantung kepada peringkat proses menular.

Diagnostik yang berbeza

Apabila membuat diagnosis, doktor diwajibkan membezakan hepatitis B dengan penyakit lain - hepatitis A, C, E, D. Diagnosis akhir boleh dibuat hanya selepas tanda-tanda tertentu khusus untuk setiap hepatitis telah dikenalpasti dalam jisim darah.

Hepatitis perlu dibezakan dengan penyakit penting lain: jangkitan virus pernafasan akut, batu empedu, keracunan makanan, jangkitan usus, patologi pembedahan organ perut dan banyak lagi penyakit lain.

Hepatitis autoimun

Untuk hepatitis autoimun, diagnosis termasuk peperiksaan yang paling penting berikut:

1. Analisis jisim sel darah merah (OAK). Penjelasan: anemia (normocytic) dalam darah diperhatikan dalam hepatitis autoimun, kandungan leukosit, platelet, dan ROE yang meningkat. Tetapi tahap anemia yang lebih tinggi dapat dijangkakan.
2. Urin. Memecahkan urinalisis: mengandungi protein, sel darah merah, bilirubin.
3. Ujian darah untuk biokimia. Analisis yang sangat relevan. Tafsiran: peningkatan jumlah bilirubin, peningkatan arginase, pengurangan albumin, peningkatan γ-globulin, dan ujian thymol. Ujian sublimat dikurangkan. Sesetengah penunjuk boleh ditingkatkan sebanyak 2 kali atau lebih. Ini ujian positif untuk hepatitis autoimun.
4. Analisis imunologi. Pengekodan: Penindas T-limfosit menurun, sel-sel lupus muncul dalam jisim erythrocyte, jumlah peningkatan imunoglobulin, antibodi untuk eritrosit.

Ujian positif untuk hepatitis boleh dikesan melalui kaedah penyelidikan serologi. Hepatitis autoimun adalah penyakit heterogen.

ELISA untuk hepatitis virus

9 Mac 2017, 16:25 Artikel ahli: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3,608

Untuk mengesan hepatitis virus dalam badan, ubat meluas menggunakan immunoassay enzim berdasarkan pengesanan kepekatan dan jenis antigen menggunakan antibodi dan enzim. Ia dijalankan secara berperingkat-peringkat, oleh penyelidikan makmal, dengan ketepatan tinggi petunjuk. Bergantung kepada jumlah dan kelas antibodi, warna dan kepekatan enzim yang menggunakan ELISA dan, dengan itu, doktor mengesahkan penyakit itu, perubahan.

Apa itu ELISA?

Kehadiran hepatitis virus dalam tubuh pesakit ditentukan menggunakan kaedah serologi analisis darah untuk kehadiran virus HCV dan penanda (badan dan antibodi) yang menunjukkannya. Enzim imunosorben berkaitan enzim (ELISA) mengkaji pelbagai virus, sebatian berat molekul yang rendah, makromolekul, penunjuk kualitatif dan kuantitatif mereka, menggunakan manifestasi reaksi terhadap antigen mereka. Untuk melakukan ini, gunakan enzim sebagai label untuk pendaftaran isyarat. Ia semakin digunakan dalam bidang perubatan, kerana ELISA jelas mendapati antigen yang jelas, tanpa membingungkannya dengan orang lain, mempunyai kepekaan tinggi terhadap kehadiran pencerobohan dalam hepatitis virus.

Kelemahan diagnosis seperti ini adalah ketidakupayaan untuk mengenal pasti punca penyakit, kerana kaedah ini hanya menunjukkan tindak balas sistem kekebalan tubuh. Keputusan analisis dipengaruhi oleh vaksinasi yang dilakukan sebelumnya. Selama 8 jam sebelum analisis disyorkan untuk menahan diri dari makan, nikotin, alkohol. Asas ujian ELISA adalah tindak balas enzim dan imun tubuh terhadap virus. Molekul biologi mengikat sel dan unsur-unsurnya, mikroorganisma, mengesan virus, kemudian kerja enzim yang membolehkan anda untuk menyatakan tindak balas imun dalam parameter yang dapat dilihat dan terukur.

Petunjuk untuk analisis

Hepatitis virus dalam tubuh boleh menyebabkan kanser dan sirosis hati. Pentingnya diagnosis tepat pada masanya tidak dapat dipertikaikan. Kaedah diagnosis utama adalah ujian ELISA, yang dengan ketepatan tinggi menentukan kehadiran virus HCV (IgM dan IgG) dan aktiviti unsur jejaknya. Ujian mandatori untuk lulus hepatitis virus:

1. Orang yang mempunyai kumpulan risiko (penagih dadah, orang yang mempunyai AIDS, pekerja institusi penguatkuasaan perubatan dan undang-undang).
2. Orang yang mempunyai hepatitis akut atau kronik.
3. Mengandung dan merancang wanita kehamilan.

ELISA mengiktiraf penyakit ini di mana-mana peringkat. Keputusan analisis, secara purata, sudah siap dalam 2 hari.

Kriteria yang menentukan kepentingan analisis

Ujian ELISA menentukan kehadiran antibodi kelas IgG, IgM, IgA. Apabila mendiagnosis hepatitis virus, doktor tidak memberi perhatian kepada jenis mereka, kerana kehadiran mana-mana manifestasi seperti virus HCV sudah menunjukkan peringkat akut atau kronik penyakit ini. Pada peringkat awal penyakit, tahap peningkatan IgM (5 hari selepas jangkitan); pada hari ke 15 - 20, antibodi IgG muncul dan boleh kekal dalam darah manusia untuk masa yang lama walaupun selepas menyembuhkan; IgA - muncul selepas 10-14 hari, menurun selepas rawatan.

Jika IgG dan IgA dikesan selepas penggunaan dadah dan tahap mereka tetap pada kadar yang sama - pembawa mempunyai bentuk hepatitis kronik. Kriteria penting ujian akan menjadi definisi yang jelas tentang kelas antibodi yang tersedia dan kuantiti mereka. Berdasarkan ini, anda boleh mengetahui bukan sahaja tentang kehadiran penyakit ini, tetapi juga tahap perkembangannya. Pengesanan unsur-unsur sedemikian dalam darah pesakit menjadikannya mungkin untuk menetapkan rawatan yang tepat dan tepat pada masanya untuk mencegah lebih banyak kesan yang serius.

Bagaimana ia dilakukan?

Alokasikan ujian ELISA langsung dan tidak langsung. Tahap langsung:

1. Mengumpul bahan biologi dan meletakkannya di lubang khas.
2. Dalam masa 15-30 minit antigen dilampirkan ke permukaan telaga.
3. Menambah antibodi ke telaga kepada antigen yang dijumpai. Semua ditinggalkan selama 1-5 jam.
4. Keluarkan antigen yang tidak terlabel (menuangkan kandungan telaga).
5. Bilas telaga dengan penyelesaian khusus.
6. Tambah penyelesaian enzim ke telaga. Biarkan selama 30 minit - 1 jam.
7. Penggunaan colorimetry (pengesanan warna dan kepekatan warna kandungan telaga, perbandingan dengan petunjuk yang berkadar terus dengan kepekatan virus).

Penggunaan untuk diagnosis ELISA tidak langsung akan memberikan hasil yang lebih tepat.

Kaedah ELISA tidak langsung berlaku dengan penggunaan antibodi yang tidak dilabelkan kepada antigen yang dijumpai dan penambahan selanjutnya dilabelkan kepada mereka. Pertama, darah diambil dari pesakit dan merebak melalui telaga selama 15-30 minit. (antibodi tetap dengan lubang). Kemudian antibodi tidak dilabel dimasukkan ke dalamnya selama 1-5 jam (sambungan antibodi dengan antigen terbentuk - kompleks imun). Seterusnya microelements tidak dilampirkan dari telaga dan dibasuh dengan penyelesaian khas. Pada peringkat seterusnya, juruteknik makmal menambah unsur jejak berlabel ke dalam telaga selama 15-30 minit. (ini mengikat tidak dilabel dengan label dengan pembentukan kompleks "antibodi antibodi-antigen"). Ekstra (longgar) dikeluarkan lagi semasa mengalir dan mencuci dengan penyelesaian. Seterusnya ialah enzim yang mengubah warna dalam masa 5-30 minit. tinggal di lubang dan data berwarna berbanding dengan data penunjuk jadual. ELISA tidak langsung lebih tepat.

Apakah yang ditunjukkan oleh ELISA untuk hepatitis virus?

ELISA membolehkan mengesan kehadiran jangkitan (virus hepatitis semua jenis, HIV, herpes, sifilis, sitomegalovirus, campak, rubella, virus gumps, virus Epstein-Barr), adalah penanda penyakit autoimun, sel-sel kanser. Menunjukkan pencabulan fungsi pembiakan (perubahan testosteron, prolaktin, estradiol dan progesteron), kerosakan tiroid, serangan helmint, klamidia. Berkesan untuk mengesan ureaplasmosis, batuk kokol, virus Dange, virus West Nile, Borrelia. Senarai definisi yang tinggi, termasuk banyak item.

Pengesahan keputusan

Penentuan antigen virus HCV oleh ELISA memberikan ketepatan 98%. Ia juga digunakan untuk menguji semula bahan biologi dengan petunjuk sebelumnya yang kabur. Kehadiran antigen IgM bukan merupakan petunjuk untuk hepatitis akut dan memerlukan penyelidikan tambahan. Apabila ujian ELISA diulang, hasilnya bersamaan dengan 90-100%. Dalam kes percanggahan minimum, nilai purata diambil sebagai penunjuk. Untuk ketepatan maksimum dari segi pakar menasihati secara selari untuk menjalankan analisis biokimia darah. Untuk menguji keputusan selepas immunoassay enzim, anda boleh menggunakan kaedah diagnostik lain.

Kajian mengenai virus hepatitis B (ELISA dan PCR)

Hepatitis B virus "s" antigen (HBsAg)

Antigen permukaan Hepatitis B dalam serum biasanya tidak hadir.
Pengesanan antigen permukaan hepatitis B (HBsAg) dalam serum mengesahkan jangkitan akut atau kronik dengan virus hepatitis B.

Dalam penyakit akut, HBsAg dikesan dalam serum dalam 1-2 minggu terakhir tempoh inkubasi dan 2-3 minggu pertama dalam tempoh klinikal. Sirkulasi HBsAg dalam darah mungkin terhad kepada beberapa hari, jadi anda harus berusaha untuk pemeriksaan awal awal pesakit. Kaedah ELISA membolehkan mengesan HBsAg di lebih daripada 90% pesakit. Hampir 5% pesakit, kaedah penyelidikan yang paling sensitif tidak mengesan HBsAg, dalam kes-kes seperti etiologi hepatitis B virus disahkan oleh kehadiran anti-HBcAg JgM atau PCR.

Kepekatan HBsAg serum dalam semua bentuk keparahan hepatitis B pada ketinggian penyakit ini mempunyai pelbagai turun naik yang signifikan, namun ada corak tertentu: dalam tempoh akut ada hubungan songsang antara konsentrasi serum HBsAg dan keparahan penyakit.

Kepekatan HBsAg yang tinggi adalah lebih biasa dalam bentuk penyakit ringan dan sederhana. Dalam bentuk yang teruk dan malignan, kepekatan HBsAg dalam darah seringkali rendah, dan pada 20% pesakit dengan bentuk teruk dan dalam 30% dengan antigen malignan di dalam darah mungkin tidak dapat dikesan sama sekali. Penampilan latar belakang ini pada pesakit dengan antibodi kepada HBsAg dianggap sebagai tanda diagnostik yang tidak baik; ia ditentukan dalam bentuk-bentuk hepatitis B.

Dalam akut akut hepatitis B, kepekatan HBsAg dalam darah secara beransur-ansur berkurang sehingga hilangnya antigen ini. HBsAg menghilangkan kebanyakan pesakit dalam masa 3 bulan dari permulaan jangkitan akut.

Penurunan kepekatan HBsAg lebih daripada 50% menjelang akhir minggu ke-3 tempoh akut, sebagai peraturan, menunjukkan proses jangkitan yang hampir selesai. Biasanya pada pesakit dengan kepekatan tinggi HBsAg pada ketinggian penyakit ini, ia dikesan dalam darah selama beberapa bulan.
Pada pesakit dengan kepekatan rendah HBsAg menghilang lebih awal (kadang-kadang beberapa hari selepas permulaan penyakit). Pada amnya, masa pengesanan HBsAg berkisar antara beberapa hari hingga 4-5 bulan. Tempoh maksimum pengesanan HBsAg dengan kursus lancar hepatitis B akut tidak melebihi 6 bulan dari permulaan penyakit.

HBsAg boleh didapati di kalangan orang yang sihat, sebagai peraturan, dalam kajian profilaksis atau tidak sengaja. Dalam kes sedemikian, penanda lain hepatitis B virus, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg, diperiksa dan fungsi hati dipelajari.

Sekiranya keputusan negatif, kajian berulang pada HBsAg diperlukan.
Sekiranya ujian darah berulang selama lebih dari 3 bulan mendedahkan HBsAg, pesakit ini dikelaskan sebagai pesakit kronik dengan hepatitis B.
Kehadiran HBsAg adalah perkara biasa. Terdapat lebih daripada 300 juta syarikat penerbangan di dunia, dan di negara kita terdapat sekitar 10 juta syarikat penerbangan.
Penamatan peredaran HBsAg dengan seroconversion seterusnya (pembentukan anti-HBs) selalu menandakan pemulihan badan.

Ujian darah untuk kehadiran HBsAg digunakan untuk tujuan berikut:

untuk diagnosis hepatitis akut B:

• tempoh pengeraman;
• penyakit akut;
• pemulihan awal;
  

untuk diagnosis hepatitis B virus kronik;

untuk penyakit:

• hepatitis kronik yang berterusan;
• sirosis hati;

untuk pemeriksaan dan mengenal pasti pesakit dalam kumpulan risiko:

pesakit dengan hemotransfusi yang kerap;

pesakit dengan kegagalan buah pinggang kronik;

pesakit dengan pelbagai hemodialisis;

pesakit dengan keadaan imunodefisiensi, termasuk AIDS.

Penilaian hasil penyelidikan

Hasil kajian dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan ketiadaan serum HBsAg. Hasil positif - pengenalan HBsAg menunjukkan tempoh inkubasi atau akut hepatitis B virus akut, serta dalam hepatitis B. Virus kronik

Antibodi kepada antigen nuklear virus hepatitis B JgG (anti- HBcAg JgG)

Biasanya, serum anti-HBcAg tidak hadir dalam serum.
Pada pesakit dengan anti-HBcAg JgG muncul dalam tempoh akut hepatitis B virus dan berterusan sepanjang hayat. Anti-HBcAg JgG adalah penanda utama pemindahan HBV.

Ujian darah untuk anti-HBcAg JgG digunakan untuk mendiagnosis:

hepatitis B virus kronik dengan kehadiran antigen HBs dalam serum;

hepatitis B. virus

Penilaian hasil penyelidikan

Hasil kajian dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan ketiadaan serum anti-HBcAg JgG. Hasil positif - pengenalan anti-HBcAg JgG menunjukkan jangkitan akut, pemulihan atau sebelum pemindahan virus hepatitis B.

Hepatitis B virus "e" antigen (HBeAg)

Biasanya, HBeAg dalam serum tidak hadir.
HBeAg boleh dijumpai dalam serum kebanyakan pesakit dengan hepatitis B. Virus akut biasanya hilang dalam darah sebelum antigen HBs. Tahap tinggi HBeAg pada minggu pertama penyakit atau pengesanannya selama lebih dari 8 minggu memberikan alasan untuk mengesyaki jangkitan kronik.

Antigen ini sering dikesan dalam hepatitis aktif kronik etiologi virus. Kepentingan tertentu dalam definisi HBeAg adalah fakta bahawa pengesanannya mencirikan fasa replikasi aktif proses menular. Telah ditubuhkan bahawa kepekatan tinggi HBeAg sesuai dengan aktiviti polimerase DNA yang tinggi dan mencirikan replikasi aktif virus.

Kehadiran HBeAg dalam darah menunjukkan jangkitan yang tinggi, i.e. Kehadiran jangkitan hepatitis B aktif dalam badan yang diperiksa, dan hanya dapat dikesan dengan kehadiran antigen HB dalam darah. Pada pesakit dengan hepatitis aktif kronik, ubat antiviral hanya digunakan apabila HBeAg dikesan dalam darah. HBeAg - antigen - penanda fasa akut dan replikasi virus hepatitis B.

Ujian darah untuk kehadiran antigen HBe digunakan untuk mendiagnosis:

tempoh inkubasi hepatitis B virus;

tempoh prodromal hepatitis B virus;

tempoh akut hepatitis B virus;

hepatitis B. virus kronik berterusan

Penilaian hasil penyelidikan

Hasil kajian dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan ketiadaan serum HBeAg. Hasil positif - pengesanan HBeAg menunjukkan tempoh inkubasi atau akut hepatitis B virus akut atau replikasi berterusan virus dan jangkitan pesakit.

Antibodi kepada antigen "e" virus hepatitis B (anti-HBeAg)

Anti-HBeAg dalam serum biasanya tidak hadir. Penampilan anti-HBeAg antibodi biasanya menunjukkan penyingkiran intensif dari badan virus hepatitis B dan jangkitan kecil pesakit.

Antibodi ini muncul dalam tempoh yang teruk dan berterusan sehingga 5 tahun selepas jangkitan. Dalam hepatitis berterusan kronik, anti-HBeAg terdapat dalam darah pesakit bersama dengan HBsAg. Serokonversi, i.e. peralihan HBeAg ke anti-HBeAg, dengan hepatitis aktif kronik, lebih kerap prognostically menguntungkan, tetapi serokonversi yang sama tidak memperbaiki prognosis transformasi hati kirrotik yang teruk.

Ujian darah untuk kehadiran anti-HBeAg digunakan dalam kes berikut dalam diagnosis hepatitis B virus:

menubuhkan peringkat awal penyakit;

jangkitan akut;

pemulihan awal;

pemulihan;

pemulihan peringkat lewat.

diagnosis virus hepatitis B yang baru dipindahkan;

diagnosis hepatitis B. virus kronik berterusan

Penilaian hasil penyelidikan

Hasil kajian dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan ketiadaan antibodi untuk HBeAg dalam serum. Hasil positifnya adalah pengesanan antibodi kepada HBeAg, yang mungkin menunjukkan tahap awal hepatitis B virus akut, tempoh jangkitan akut, peringkat awal penyembuhan, pemulihan, baru-baru ini memindahkan hepatitis B virus atau hepatitis B. Virus yang berterusan

Kriteria untuk kehadiran hepatitis B kronik adalah:

mengesan atau secara berkala mengesan DNA HBV dalam darah;

peningkatan berterusan atau berkala dalam aktiviti ALT / AST dalam darah;

tanda morfologi hepatitis kronik dalam pemeriksaan histologi biopsi hati.

Pengesanan virus hepatitis B oleh PCR (secara kualitatif)

Virus Hepatitis B dalam darah biasanya tidak wujud.
Penentuan kualitatif virus hepatitis B oleh kaedah PCR dalam darah menjadikannya dapat mengesahkan kehadiran virus di dalam tubuh pesakit dan dengan itu menubuhkan etiologi penyakit.

Kajian ini memberikan maklumat berguna untuk diagnosis hepatitis B virus akut di dalam inkubasi dan peringkat perkembangan awal penyakit ini, apabila penanda serologi utama pesakit dalam darah mungkin tidak hadir. DNA virus serum dikesan dalam 50% pesakit jika tiada HBeAg. Kepekaan analitikal kaedah PCR tidak kurang daripada 80 zarah virus dalam 5 μl, sampel pengesanan DNA terakhir, kekhususan - 98%.

Kaedah ini penting untuk mendiagnosis dan memantau perjalanan HBV kronik. Kira-kira 5-10% daripada kes sirosis dan penyakit hati kronik yang lain disebabkan oleh pembawa kronik virus hepatitis B. Penanda aktiviti penyakit tersebut adalah kehadiran HBeAg dan DNA virus hepatitis B dalam darah.

Kaedah PCR memungkinkan untuk menentukan darah DNA DNA virus hepatitis B secara kualitatif dan kuantitatif. Serpihan yang ditentukan dalam kedua-dua kes adalah urutan DNA unik gen protein protein virus hepatitis B.

Pengesanan DNA virus hepatitis B dalam biomaterial menggunakan PCR adalah perlu untuk:

penyelesaian keputusan ujian serologi yang dipersoalkan;

pengesanan tahap akut penyakit berbanding dengan jangkitan atau hubungan sebelumnya;

mengawal keberkesanan rawatan antiviral.

Kehilangan DNA hepatitis B dari darah adalah tanda keberkesanan terapi

Pengesanan virus hepatitis B oleh PCR (kuantitatif)

Kaedah ini memberikan maklumat penting mengenai intensiti perkembangan penyakit, keberkesanan rawatan dan pembangunan rintangan terhadap ubat aktif.
Untuk diagnosis hepatitis virus oleh PCR dalam serum, sistem ujian digunakan, sensitiviti yang 50-100 salinan dalam sampel, yang memungkinkan untuk mengesan virus pada kepekatan 5 X 10 ^ 3 -10 ^ 4 salinan / ml. PCR dalam hepatitis B virus semestinya perlu untuk menilai replikasi virus.

DNA virus serum dikesan dalam 50% pesakit jika tiada HBeAg. Serum darah, limfosit, dan hepatobiopsi boleh menjadi bahan untuk mengesan DNA virus hepatitis B.

• Penilaian tahap viremia adalah seperti berikut:
• kurang daripada 2.10 ^ 5 salinan / ml (kurang daripada 2.10 ^ 5 IU / ml) - viremia rendah;
• dari 2.10 ^ 5 salinan / ml (2.10 ^ 5 IU / ml) kepada 2.10 ^ 6 salinan / ml (8.10 ^ 5 IU / ml) - viremia sederhana;
• lebih daripada 2.10 ^ 6 salinan / ml - viremia tinggi.

Terdapat hubungan antara hasil hepatitis B virus akut dan kepekatan DNA HBV dalam darah pesakit. Dengan tahap viremia yang rendah, proses penjadualan jangkitan hampir sama dengan sifar, dengan purata, proses itu dikira pada 25-30% pesakit, dan dengan tahap viremia yang tinggi, hepatitis B virus akut yang paling sering menjadi kronik.

Tanda-tanda untuk rawatan interferon-alfa HBV kronik harus dianggap sebagai penanda tanda-tanda replikasi virus aktif (pengesanan HBV HBV, HBeAg dan DNA HBV dalam serum darah dalam tempoh 6 bulan sebelumnya.).

Kriteria untuk menilai keberkesanan rawatan adalah kehilangan HBEAg dan DNA HBV dalam darah, yang biasanya disertai dengan normalisasi tahap transaminase dan pengampunan jangka panjang penyakit, HBV DNA menghilang dari darah pada bulan ke-5 rawatan dalam 80% pesakit. Mengurangkan tahap viremia sebanyak 85% atau lebih pada hari ketiga dari permulaan rawatan berbanding dengan garis dasar adalah kriteria yang cepat dan tepat untuk meramal keberkesanan terapi.

Penyelidikan mengenai hepatitis virus dengan kaedah ife

ELISA dalam diagnosis hepatitis virus. Keupayaan immunoassay enzim

Diagnosis makmal spesifik hepatitis virus adalah berdasarkan kepada kaedah penyelidikan biologi imunokimia dan molekul. Kaedah imunokimia utama adalah radioisotop atau radioimun (RIA) dan immunoassay (ELISA). Kaedah diagnostik imunokimia adalah berdasarkan interaksi tertentu antigen - antibodi dengan pengenalan selanjutnya kompleks dengan bantuan label khas. Enzim immunoassay yang paling biasa.

Laporan pertama mengenai penggunaan enzim immunoassay. sebagai kaedah untuk menentukan sebarang bahan diterbitkan pada tahun 1971 secara bersamaan oleh dua kumpulan penyelidikan - B. Van Weemen, A. Schuurs dan E. Engvall, P. Perlmann. Enzim immunoassay berdasarkan prinsip berikut: pada fasa pepejal, yang terutamanya menggunakan permukaan telaga tablet polistirena, antigen agen atau antibodi berjangkit (selalunya campuran antibodi) kepada antigen untuk dikesan adalah tetap. Antigen atau antibodi ini, yang ditetapkan pada fasa pepejal, dipanggil immunosorbent.

Hasil daripada inkubasi imunosorben dan serum ujian dengan kehadiran agen yang dapat dikesan, ia terikat kepada kompleks antigen - antibodi. Selepas prosedur pembersihan, di mana antigen dan antibodi yang tidak terhingga dikeluarkan, pengeraman dengan konjugasi dilakukan. Sebagai konjugasi untuk mengesan HBsAg, anti-HBs digunakan, dalam pengesanan antibodi kepada virus hepatitis C - antibodi kepada immunoglobulins manusia (conjugate antivirus) yang dilabelkan dengan peroksidase kuda. Akibat inkubasi ini, lampiran kepada kompleks antigen yang sudah ada berlaku - antibodi konjugat yang diperkenalkan tambahan. Selepas penyingkiran konjugasi tidak dibekalkan (basuh), substrat dimasukkan ke dalam telaga. Apabila menggunakan konjugasi peroxidase, hidrogen peroksida digunakan sebagai substrat dalam kombinasi dengan penunjuk, yang paling sering digunakan sebagai orthophenylenediamine (OPD) atau tetramethylbenzidine (TMB). Hasilnya dianggarkan secara fotometrik.

Kualiti dan kebolehpercayaan keupayaan analisis kaedah immunoassay enzim dicirikan oleh beberapa kriteria, yang merangkumi kepekaan, kekhususan, ketepatan dan reproduktif.

Kepekaan adalah jumlah minimum bahan yang dapat dikesan oleh immunoassay enzim. Dalam kes ini, batasan bawah sensitiviti kaedah ini adalah kepekatan bahan ujian dalam sampel, yang sepadan dengan hasil positif terkecil penentuan, yang secara statistiknya berbeza secara signifikan daripada petunjuk sampel negatif yang sengaja. Kepekaan sesuatu IFTS bergantung kepada beberapa keadaan yang berkaitan dengan reka bentuk sistem ujian (pertalian imunosorben, kualiti sistem pengekstrakan dan penyangga), dan penyelesaian dan ketepatan kaedah pendaftaran.

Keistimewaan - keupayaan untuk mengenalpasti dengan tepat komponen untuk penentuan yang mana immunoassay enzim ini direka. Kekhususan ELISA ditentukan oleh tindak balas silang antibodi atau antigen (iaitu, komposisi yang digunakan sebagai immunosorbent) dengan sebatian yang berkait rapat, serta komposisi medium inkubasi (kesan matriks).

Ketepatan - korespondensi nilai purata hasil penentuan berulang sampel kawalan yang sama dengan nilai sebenar parameter yang diukur. Ketepatan penentuan dalam ELISA bergantung kepada kualiti sistem ujian dan sampel kawalan. Untuk sistem ujian immunoassay yang baik, penunjuk ketepatan berada dalam lingkungan 90-110%. Keanehan penyelidikan bioperubatan dalam ELISA adalah tidak mustahil untuk menetapkan nilai yang tepat, dan oleh itu purata beberapa makmal pakar diambil sebagai nilai sebenar. Kriteria statistik untuk ketepatan adalah rata-rata aritmetik dan tahap penyelewengannya dari nilai sebenar, dinyatakan sebagai peratusan.

Reproduktif - keupayaan sistem ujian untuk menunjukkan nilai yang sama dengan kajian berulang dari sampel yang sama. Reproducibility bergantung pada kesalahan rawak (kesalahan) semasa prosedur reaksi, dan pada sistem uji mutu dan ketepatan metode pencatatan hasilnya. Adalah dipercayai bahawa reproduktibiliti sampel kawalan yang sama dari syarikat yang sama di makmal yang berbeza tidak boleh melebihi nilai pekali variasi sebanyak 15%.

Terdapat beberapa skim ELISA tertentu untuk penentuan penanda hepatitis virus: a) immunoassay enzim langsung; b) immunoassay enzim tidak langsung; c) perencatan kompetitif; c) kaedah "perangkap", atau "menangkap".

Kaedah biologi molekular untuk diagnosis hepatitis virus, tindak balas rantaian polimerase dan hibridasi lebih kerap digunakan. Kaedah-kaedah ini, terutama PCR, memungkinkan untuk mengesan sejumlah kecil virus DNA atau RNA tertentu dan, dengan itu, menghukum replikasi, dan dalam sesetengah kes, aktiviti replikasi.

Ujian darah hepatitis C

Hepatitis C adalah salah satu penyakit hati yang paling biasa yang berlaku apabila dijangkiti dengan virus hepatitis C (HCV), yang memasuki tubuh terutamanya apabila ia berhubungan dengan darah seseorang yang dijangkiti. Hepatitis C kronik dan akut yang dihadapi Di 70-80 peratus pesakit dengan hepatitis C akut, tiada gejala penyakit, hanya dalam sesetengah kes, selepas beberapa jangkamasa selepas jangkitan, terdapat manifestasi penyakit, yang dinyatakan dalam keletihan, sakit perut, kehilangan selera makan, kegelapan air kencing, muntah-muntah, loya, najis ringan, jaundis, sakit di sendi. Sebagai peraturan, gejala berlaku 6-7 minggu selepas jangkitan, tetapi tempoh permulaan tanda-tanda penyakit berbeza dari 2 minggu hingga enam bulan. Sekiranya gejala di atas berlaku, anda perlu berunding dengan doktor penyakit berjangkit dan menjalani ujian darah untuk hepatitis C. Diagnosis hepatitis, yang dijalankan pada masa yang tepat, dapat mengesan penyakit itu pada tahap awal dan meningkatkan peluang pemulihan.

Apabila ujian hepatitis C dijadualkan

Situasi apabila ujian Hepatitis C diperlukan:

• semasa kehamilan dan perancangan keluarga;
• pesakit dengan gejala hepatitis kronik atau akut;
• orang itu berisiko. Ini adalah pekerja perubatan, orang dalam penjara, pegawai penguatkuasa undang-undang, orang yang menggunakan dadah, mempunyai banyak pasangan seksual, mempunyai AIDS, berada di hemodialisis, dan lain-lain.

Persediaan untuk Analisis Hepatitis C

Persediaan khusus untuk analisis hepatitis C tidak diperlukan. Untuk analisis, darah diambil dari urat pada perut kosong, pada masa yang sama, sekurang-kurangnya lapan jam harus lewat selepas makan terakhir.

Pemeriksaan hepatitis C ELISA

Analisis pertama, biasanya ditetapkan untuk diagnosis ujian hepatitis C - ELISA (ujian imunosorben berkaitan enzim). Pemeriksaan hepatitis C ELISA memungkinkan untuk mengesan kehadiran antibodi kepada virus hepatitis C (anti-HCVAb) dalam darah. Sekiranya keputusan ujian ELISA adalah positif, maka ia menunjukkan kehadiran sentuhan badan dengan virus hepatitis C. Tetapi 40% orang yang mempunyai ELISA positif tidak mengesan virus dalam darah. Fenomena ini dipanggil hasil positif palsu. Juga, dengan bantuan ELISA, darah penderma diperiksa.

RIBA untuk Hepatitis C

Analisis RIBA untuk hepatitis C digunakan untuk mengesahkan keputusan ELISA yang positif. Kaedah imunoblotting rekombinan (RIBA) adalah kajian yang lebih tepat tentang kehadiran antibodi terhadap virus hepatitis C. Kehadiran virus hepatitis C di dalam badan juga tidak menentukan hasil yang positif, tetapi hanya mengesahkan kehadiran antibodi.

Ujian hepatitis C PCR

Untuk mengesan kehadiran virus hepatitis C dalam darah (RNA HCV) dan membuat diagnosis, mereka paling sering menggunakan analisis dengan kaedah tindak balas rantai polimer (PCR). Kajian ini memungkinkan untuk mengesan dengan ketepatan yang tinggi kehadiran dalam darah walaupun sedikit virus. Analisis PCR untuk hepatitis C boleh mendedahkan kehadiran virus yang telah 5 hari selepas jangkitan, jauh sebelum penampilan antibodi. Apabila hasil analisis PCR adalah positif, itu bermakna adanya jangkitan aktif.

Terdapat variasi analisis PCR:

• PCR kuantitatif, yang membolehkan menentukan bukan sahaja fakta kehadiran virus itu, tetapi juga virus (jumlah virus). Penunjuk ini sangat penting untuk menentukan keberkesanan rawatan;
• genotip yang menubuhkan genotip virus hepatitis C, yang penting untuk menentukan tempoh dan taktik rawatan. Terdapat lebih daripada 10 genotip virus hepatitis C, tetapi untuk amalan klinikal, cukup untuk menentukan lima jenis yang paling biasa: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Analisis PCR kuantitatif dilakukan:

• dengan ujian positif kualitatif untuk kehadiran virus RNA hepatitis C dalam serum;
• untuk penilaian yang tepat tentang keberkesanan rawatan;
• untuk menentukan taktik rawatan pesakit.

Tidak ada hubungan langsung antara keterukan hepatitis C dan jumlah virus dalam darah. Kepekatan virus menjejaskan infektivitas penyakit, iaitu semakin besar jumlah virus dalam darah pesakit, semakin besar risiko penyebaran virus, misalnya, melalui hubungan seksual atau dari ibu ke anak. Juga, keberkesanan rawatan bergantung kepada kepekatan virus. Semasa terapi, faktor yang menguntungkan adalah beban virus yang rendah, dan yang sangat tinggi tidak menguntungkan.

Analisis genotyping dilakukan:

• dengan ujian positif kualitatif untuk kehadiran virus RNA hepatitis C dalam serum;
• untuk penilaian yang tepat tentang keberkesanan rawatan;
• untuk menentukan taktik rawatan pesakit;
• untuk meramal kronisasi proses berjangkit;
• untuk menentukan perkembangan penyakit.

Pengesanan genotip virus sangat penting untuk menentukan tempoh rawatan, yang penting, kerana interferon mempunyai pelbagai kesan sampingan dan toleransi pesakit yang rendah.

Analisis penyahkodan untuk hepatitis C

Biasanya, RNA virus, antibodi kepada mereka dan antigen sepenuhnya tidak hadir. Kehadiran antibodi dalam darah menunjukkan kehadiran hepatitis C kronik atau akut atau tempoh pemulihan. Jika RNA HCV hadir dalam darah, yang ditentukan oleh analisis PCR, ini menunjukkan kehadiran virus dalam darah.

Dengan teknik ujian yang salah, pengangkutan dan keabnormalan darah, analisis PCR kadangkala menunjukkan hasil positif palsu. Analisis ELISA dan RIBA pada peringkat awal penyakit, apabila badan belum menghasilkan jumlah antibodi yang mencukupi, mungkin menunjukkan hasil negatif palsu.

Sekiranya, apabila memecahkan ujian untuk hepatitis C, keputusan positif diperolehi, adalah perlu untuk menghubungi doktor penyakit berjangkit dan pakar gastroenterologi untuk mendapatkan rawatan lanjut dan rawatan.

Neutrophil segmen diturunkan

Platelet kanak-kanak adalah normal, tinggi, menurunkan

TGT hormon yang merangsang tiroid

Diagnosis Hepatitis

Orang tidak boleh menentukan kehadiran hepatitis di dalam badan dengan serta-merta, sejak tempoh inkubasi penyakit ini boleh bertahan hingga empat minggu. Apabila tanda-tanda pertama timbul, perubahan radikal dalam komposisi darah berlaku di organisma yang terkena: analisis biokimia melaporkan masalah kesihatan yang serius dan kehadiran virus patogen. Walau bagaimanapun, untuk membuat diagnosis akhir, tidak cukup untuk menderma darah untuk hepatitis, serta diagnosis terperinci hepatitis.

Diagnosis makmal hepatitis

Adalah wajar untuk menjalankannya selepas berakhirnya tempoh inkubasi, supaya doktor dengan ketepatan yang paling tepat dapat menentukan penyakit hati yang ada di dalam tubuh. Jika tidak, rawatan yang ditetapkan tidak akan memberikan kesan terapeutik yang diingini dan malah memburukkan gambaran klinikal yang lazim.

Diagnosis Hepatitis A

Lazimnya, diagnosis hepatitis A bermula dengan persoalan terperinci mengenai pesakit dan pelantikan sejumlah ujian yang harus dilakukan secepat mungkin. Ini adalah:

• ujian darah biokimia;
• jumlah darah yang lengkap;
• Kaedah PCR;
• ELISA;
• coagulogram.

Jika penyakit Botkin berlangsung, maka lompat bilirubin, AlAT dan Asat yang tidak normal, sampel thymol diperhatikan mengikut hasil analisis darah biokimia. Lebih-lebih lagi, IgM anti-HAV spesifik dihasilkan, yang merupakan fakta yang tidak dapat disangkal tentang kehadiran hepatitis A.
Secara umum, analisis darah ditentukan oleh penurunan leukosit, lompat dalam ESR dan limfositosis. Dan, bagaimanapun, yang paling boleh dipercayai adalah kaedah PCR, yang menentukan penunjuk RNA virus patogenik.
Di samping itu, doktor mengkaji gejala-gejala penyakit itu, dan selepas itu ia dapat membuat diagnosis akhir dan menjalani terapi yang paling berkesan. Keperluan pemeriksaan instrumental sangat jarang berlaku. Selepas rawatan konservatif yang berjaya dalam keadaan kemasukan ke hospital dan kuarantin pesakit, pemulihan akhir menanti, dan hepatitis A tidak berulang lagi.

Diagnosis Hepatitis B

Untuk menentukan kehadiran virus hepatitis B juga mungkin berdasarkan keputusan ujian makmal, dan untuk ini hal pertama diperlukan untuk menderma darah untuk hepatitis. Secara semula jadi, virus patogen mempunyai tiga antigen utama - HBsAg, HBcAg dan HBeAg, yang mana antibodi dihasilkan dalam tubuh. Ciri utama gambar klinikal ini adalah ELISA - ELISA, yang hanya mengungkapkan penanda spesifik hepatitis B.
Segera ia perlu dijelaskan bahawa antigen HBsAg muncul di dalam darah walaupun sebelum gejala pertama hepatitis dan ditentukan dengan pasti dalam tempoh yang lebih lama. Walau bagaimanapun, ujian negatif tidak mengecualikan kehadiran hepatitis B, dan dengan itu memerlukan penggunaan kaedah reaksi rantai polimerase (PCR) yang sama berkesan.
Jika anda mengesyaki bahawa hepatitis B adalah wajib adalah ujian darah biokimia, yang disyorkan untuk lulus di tempat pertama. Melakukan biopsi hati dan ultrasound organ-organ peritoneal dibincangkan secara individu, tetapi apabila sejarah penyakit itu sangat jelas, tidak ada keperluan untuk kaedah pemeriksaan klinikal.

Echogram hati dalam hepatitis autoimun di peringkat hepatitis kronik

Diagnosis Hepatitis C

Untuk membuat diagnosis ini, ia tidak mencukupi untuk menderma darah untuk hepatitis, kerana virus itu mungkin berlaku di dalam tubuh dalam bentuk laten. Dan, bagaimanapun, ujian makmal utama adalah semua analisis yang dibentangkan di atas, serta prestasi tambahan biopsi hati. Pemeriksaan mikroskopik bahan biologi (dalam kes kita, sekeping tisu hati) menentukan sejauh mana proses patologi dan fibrosis tisu. Pensampelan bahan dilakukan di bawah anestetik tempatan, komplikasi prosedur sedemikian amat jarang berlaku dalam amalan perubatan.
Jika disyaki hepatitis C, kaedah utama pemeriksaan klinikal adalah ultrasound organ-organ peritoneal. Alasannya mudah: penyakit ini sering ditunjukkan oleh perubahan visual pada hati yang terjejas, perubahan struktur dan saiznya. Dengan cara ini anda boleh menentukan:

• saiz hati, limpa, pankreas dan pundi hempedu;
• perubahan patologi dalam organ-organ ini;
• aliran darah umum di organ peritoneal;
• kawasan yang optimum untuk melakukan biopsi hati.

Kaedah pemeriksaan klinikal ini menentukan semua pathologi fokus organ di peringkat mikroskopik. Jika hati diwakili pada skrin dalam skala kelabu, biopsi segera diperlukan, kerana warna kelabu menggambarkan tisu-tisu yang terkena "penapis manusia".

Pencegahan hepatitis

Oleh kerana penyakit itu tidak muncul dengan segera, ia jauh dari semua gambar klinikal yang meneruskan rawatan segera. Pesakit mungkin tidak menyedari kewujudan virus patogen dalam tubuh, yang, sebaliknya, dengan cepat merebak ke aliran darah dan menjangkiti sel-sel hati yang sihat.
Untuk mengelakkan nasib tragis, disyorkan untuk mematuhi semua langkah pencegahan. Kewaspadaan sedemikian akan mengurangkan risiko morbiditi dan menyelamatkan anda daripada masalah kesihatan yang serius pada masa akan datang. Peraturan pencegahan asas dibentangkan di bawah:

• basuh tangan anda selepas jalan;
• tertakluk kepada pemprosesan sayur-sayuran dan buah-buahan yang berkualiti tinggi;
• untuk menjalankan semua vaksin pencegahan yang dinyatakan dalam pelan kalendar tahunan;
• sikap selektif terhadap pasangan seksual;
• elakkan bersentuhan dengan orang yang sakit;
• gunakan hanya jarum suntikan sekali pakai dan lebih berhati-hati di stesen pemindahan darah.

Ia juga disyorkan untuk kerap (sekali setiap enam bulan) menderma darah untuk hepatitis, untuk memastikan bahawa virus itu tidak menembus ke dalam badan, dan tidak menjangkiti sel-sel hati yang pernah sihat. Jika diagnosis ditentukan, ia dikehendaki segera menjadi akaun dispensari dan mengikuti semua cadangan pakar.

Pengarang penerbitan:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Pendidikan: Universiti Perubatan Negeri Rostov (Universiti Perubatan Negeri Rostov), ​​Jabatan Gastroenterologi dan Endoskopi.
Ahli gastroenterologi
Doktor Sains Perubatan