ELISA untuk hepatitis virus

9 Mac 2017, 16:25 Artikel ahli: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3,608

Untuk mengesan hepatitis virus dalam badan, ubat meluas menggunakan immunoassay enzim berdasarkan pengesanan kepekatan dan jenis antigen menggunakan antibodi dan enzim. Ia dijalankan secara berperingkat-peringkat, oleh penyelidikan makmal, dengan ketepatan tinggi petunjuk. Bergantung kepada jumlah dan kelas antibodi, warna dan kepekatan enzim yang menggunakan ELISA dan, dengan itu, doktor mengesahkan penyakit itu, perubahan.

Apa itu ELISA?

Kehadiran hepatitis virus dalam tubuh pesakit ditentukan menggunakan kaedah serologi analisis darah untuk kehadiran virus HCV dan penanda (badan dan antibodi) yang menunjukkannya. Enzim imunosorben berkaitan enzim (ELISA) mengkaji pelbagai virus, sebatian berat molekul yang rendah, makromolekul, penunjuk kualitatif dan kuantitatif mereka, menggunakan manifestasi reaksi terhadap antigen mereka. Untuk melakukan ini, gunakan enzim sebagai label untuk pendaftaran isyarat. Ia semakin digunakan dalam bidang perubatan, kerana ELISA jelas mendapati antigen yang jelas, tanpa membingungkannya dengan orang lain, mempunyai kepekaan tinggi terhadap kehadiran pencerobohan dalam hepatitis virus.

Kelemahan diagnosis seperti ini adalah ketidakupayaan untuk mengenal pasti punca penyakit, kerana kaedah ini hanya menunjukkan tindak balas sistem kekebalan tubuh. Keputusan analisis dipengaruhi oleh vaksinasi yang dilakukan sebelumnya. Selama 8 jam sebelum analisis disyorkan untuk menahan diri dari makan, nikotin, alkohol. Asas ujian ELISA adalah tindak balas enzim dan imun tubuh terhadap virus. Molekul biologi mengikat sel dan unsur-unsurnya, mikroorganisma, mengesan virus, kemudian kerja enzim yang membolehkan anda untuk menyatakan tindak balas imun dalam parameter yang dapat dilihat dan terukur.

Petunjuk untuk analisis

Hepatitis virus dalam tubuh boleh menyebabkan kanser dan sirosis hati. Pentingnya diagnosis tepat pada masanya tidak dapat dipertikaikan. Kaedah diagnosis utama adalah ujian ELISA, yang dengan ketepatan tinggi menentukan kehadiran virus HCV (IgM dan IgG) dan aktiviti unsur jejaknya. Ujian mandatori untuk lulus hepatitis virus:

Orang yang mempunyai kumpulan risiko (penagih dadah, orang yang mempunyai AIDS, pekerja institusi penguatkuasaan perubatan dan undang-undang).
Orang yang mempunyai hepatitis akut atau kronik.
Mengandung dan merancang wanita kehamilan.

ELISA mengiktiraf penyakit ini di mana-mana peringkat. Keputusan analisis, secara purata, sudah siap dalam 2 hari.

Kriteria yang menentukan kepentingan analisis

Ujian ELISA menentukan kehadiran antibodi kelas IgG, IgM, IgA. Apabila mendiagnosis hepatitis virus, doktor tidak memberi perhatian kepada jenis mereka, kerana kehadiran mana-mana manifestasi seperti virus HCV sudah menunjukkan peringkat akut atau kronik penyakit ini. Pada peringkat awal penyakit, tahap peningkatan IgM (5 hari selepas jangkitan); pada hari ke 15 - 20, antibodi IgG muncul dan boleh kekal dalam darah manusia untuk masa yang lama walaupun selepas menyembuhkan; IgA - muncul selepas 10-14 hari, menurun selepas rawatan.

Jika IgG dan IgA dikesan selepas penggunaan dadah dan tahap mereka tetap pada kadar yang sama - pembawa mempunyai bentuk hepatitis kronik. Kriteria penting ujian akan menjadi definisi yang jelas tentang kelas antibodi yang tersedia dan kuantiti mereka. Berdasarkan ini, anda boleh mengetahui bukan sahaja tentang kehadiran penyakit ini, tetapi juga tahap perkembangannya. Pengesanan unsur-unsur sedemikian dalam darah pesakit menjadikannya mungkin untuk menetapkan rawatan yang tepat dan tepat pada masanya untuk mencegah lebih banyak kesan yang serius.

Bagaimana ia dilakukan?

Alokasikan ujian ELISA langsung dan tidak langsung. Tahap langsung:

Mengumpul bahan biologi dan meletakkannya di lubang khas.
Dalam masa 15-30 minit antigen dilampirkan ke permukaan telaga.
Menambah antibodi ke telaga kepada antigen yang dijumpai. Semua ditinggalkan selama 1-5 jam.
Keluarkan antigen yang tidak terlabel (menuangkan kandungan telaga).
Bilas telaga dengan penyelesaian khusus.
Tambah penyelesaian enzim ke telaga. Biarkan selama 30 minit - 1 jam.
Penggunaan colorimetry (pengesanan warna dan kepekatan warna kandungan telaga, perbandingan dengan petunjuk yang berkadar terus dengan kepekatan virus).

Penggunaan untuk diagnosis ELISA tidak langsung akan memberikan hasil yang lebih tepat.

Kaedah ELISA tidak langsung berlaku dengan penggunaan antibodi yang tidak dilabelkan kepada antigen yang dijumpai dan penambahan selanjutnya dilabelkan kepada mereka. Pertama, darah diambil dari pesakit dan merebak melalui telaga selama 15-30 minit. (antibodi tetap dengan lubang). Kemudian antibodi tidak dilabel dimasukkan ke dalamnya selama 1-5 jam (sambungan antibodi dengan antigen terbentuk - kompleks imun). Seterusnya microelements tidak dilampirkan dari telaga dan dibasuh dengan penyelesaian khas. Pada peringkat seterusnya, juruteknik makmal menambah unsur jejak berlabel ke dalam telaga selama 15-30 minit. (ini mengikat tidak dilabel dengan label dengan pembentukan kompleks "antibodi antibodi-antigen"). Ekstra (longgar) dikeluarkan lagi semasa mengalir dan mencuci dengan penyelesaian. Seterusnya ialah enzim yang mengubah warna dalam masa 5-30 minit. tinggal di lubang dan data berwarna berbanding dengan data penunjuk jadual. ELISA tidak langsung lebih tepat.

Apakah yang ditunjukkan oleh ELISA untuk hepatitis virus?

ELISA membolehkan mengesan kehadiran jangkitan (virus hepatitis semua jenis, HIV, herpes, sifilis, sitomegalovirus, campak, rubella, virus gumps, virus Epstein-Barr), adalah penanda penyakit autoimun, sel-sel kanser. Menunjukkan pencabulan fungsi pembiakan (perubahan testosteron, prolaktin, estradiol dan progesteron), kerosakan tiroid, serangan helmint, klamidia. Berkesan untuk mengesan ureaplasmosis, batuk kokol, virus Dange, virus West Nile, Borrelia. Senarai definisi yang tinggi, termasuk banyak item.

Pengesahan keputusan

Penentuan antigen virus HCV oleh ELISA memberikan ketepatan 98%. Ia juga digunakan untuk menguji semula bahan biologi dengan petunjuk sebelumnya yang kabur. Kehadiran antigen IgM bukan merupakan petunjuk untuk hepatitis akut dan memerlukan penyelidikan tambahan. Apabila ujian ELISA diulang, hasilnya bersamaan dengan 90-100%. Dalam kes percanggahan minimum, nilai purata diambil sebagai penunjuk. Untuk ketepatan maksimum dari segi pakar menasihati secara selari untuk menjalankan analisis biokimia darah. Untuk menguji keputusan selepas immunoassay enzim, anda boleh menggunakan kaedah diagnostik lain.

Penyelidikan mengenai hepatitis virus dengan kaedah ife

ELISA dalam diagnosis hepatitis virus. Keupayaan immunoassay enzim

Diagnosis makmal spesifik hepatitis virus adalah berdasarkan kepada kaedah penyelidikan biologi imunokimia dan molekul. Kaedah imunokimia utama adalah radioisotop atau radioimun (RIA) dan immunoassay (ELISA). Kaedah diagnostik imunokimia adalah berdasarkan interaksi tertentu antigen - antibodi dengan pengenalan selanjutnya kompleks dengan bantuan label khas. Enzim immunoassay yang paling biasa.

Laporan pertama mengenai penggunaan enzim immunoassay. sebagai kaedah untuk menentukan sebarang bahan diterbitkan pada tahun 1971 secara bersamaan oleh dua kumpulan penyelidikan - B. Van Weemen, A. Schuurs dan E. Engvall, P. Perlmann. Enzim immunoassay berdasarkan prinsip berikut: pada fasa pepejal, yang terutamanya menggunakan permukaan telaga tablet polistirena, antigen agen atau antibodi berjangkit (selalunya campuran antibodi) kepada antigen untuk dikesan adalah tetap. Antigen atau antibodi ini, yang ditetapkan pada fasa pepejal, dipanggil immunosorbent.

Hasil daripada inkubasi imunosorben dan serum ujian dengan kehadiran agen yang dapat dikesan, ia terikat kepada kompleks antigen - antibodi. Selepas prosedur pembersihan, di mana antigen dan antibodi yang tidak terhingga dikeluarkan, pengeraman dengan konjugasi dilakukan. Sebagai konjugasi untuk mengesan HBsAg, anti-HBs digunakan, dalam pengesanan antibodi kepada virus hepatitis C - antibodi kepada immunoglobulins manusia (conjugate antivirus) yang dilabelkan dengan peroksidase kuda. Akibat inkubasi ini, lampiran kepada kompleks antigen yang sudah ada berlaku - antibodi konjugat yang diperkenalkan tambahan. Selepas penyingkiran konjugasi tidak dibekalkan (basuh), substrat dimasukkan ke dalam telaga. Apabila menggunakan konjugasi peroxidase, hidrogen peroksida digunakan sebagai substrat dalam kombinasi dengan penunjuk, yang paling sering digunakan sebagai orthophenylenediamine (OPD) atau tetramethylbenzidine (TMB). Hasilnya dianggarkan secara fotometrik.

Kualiti dan kebolehpercayaan keupayaan analisis kaedah immunoassay enzim dicirikan oleh beberapa kriteria, yang merangkumi kepekaan, kekhususan, ketepatan dan reproduktif.

Kepekaan adalah jumlah minimum bahan yang dapat dikesan oleh immunoassay enzim. Dalam kes ini, batasan bawah sensitiviti kaedah ini adalah kepekatan bahan ujian dalam sampel, yang sepadan dengan hasil positif terkecil penentuan, yang secara statistiknya berbeza secara signifikan daripada petunjuk sampel negatif yang sengaja. Kepekaan sesuatu IFTS bergantung kepada beberapa keadaan yang berkaitan dengan reka bentuk sistem ujian (pertalian imunosorben, kualiti sistem pengekstrakan dan penyangga), dan penyelesaian dan ketepatan kaedah pendaftaran.

Keistimewaan - keupayaan untuk mengenalpasti dengan tepat komponen untuk penentuan yang mana immunoassay enzim ini direka. Kekhususan ELISA ditentukan oleh tindak balas silang antibodi atau antigen (iaitu, komposisi yang digunakan sebagai immunosorbent) dengan sebatian yang berkait rapat, serta komposisi medium inkubasi (kesan matriks).

Ketepatan - korespondensi nilai purata hasil penentuan berulang sampel kawalan yang sama dengan nilai sebenar parameter yang diukur. Ketepatan penentuan dalam ELISA bergantung kepada kualiti sistem ujian dan sampel kawalan. Untuk sistem ujian immunoassay yang baik, penunjuk ketepatan berada dalam lingkungan 90-110%. Keanehan penyelidikan bioperubatan dalam ELISA adalah tidak mustahil untuk menetapkan nilai yang tepat, dan oleh itu purata beberapa makmal pakar diambil sebagai nilai sebenar. Kriteria statistik untuk ketepatan adalah rata-rata aritmetik dan tahap penyelewengannya dari nilai sebenar, dinyatakan sebagai peratusan.

Reproduktif - keupayaan sistem ujian untuk menunjukkan nilai yang sama dengan kajian berulang dari sampel yang sama. Reproducibility bergantung pada kesalahan rawak (kesalahan) semasa prosedur reaksi, dan pada sistem uji mutu dan ketepatan metode pencatatan hasilnya. Adalah dipercayai bahawa reproduktibiliti sampel kawalan yang sama dari syarikat yang sama di makmal yang berbeza tidak boleh melebihi nilai pekali variasi sebanyak 15%.

Terdapat beberapa skim ELISA tertentu untuk penentuan penanda hepatitis virus: a) immunoassay enzim langsung; b) immunoassay enzim tidak langsung; c) perencatan kompetitif; c) kaedah "perangkap", atau "menangkap".

Kaedah biologi molekular untuk diagnosis hepatitis virus, tindak balas rantaian polimerase dan hibridasi lebih kerap digunakan. Kaedah-kaedah ini, terutama PCR, memungkinkan untuk mengesan sejumlah kecil virus DNA atau RNA tertentu dan, dengan itu, menghukum replikasi, dan dalam sesetengah kes, aktiviti replikasi.

Ujian darah hepatitis C

Hepatitis C adalah salah satu penyakit hati yang paling biasa yang berlaku apabila dijangkiti dengan virus hepatitis C (HCV), yang memasuki tubuh terutamanya apabila ia berhubungan dengan darah seseorang yang dijangkiti. Hepatitis C kronik dan akut yang dihadapi Di 70-80 peratus pesakit dengan hepatitis C akut, tiada gejala penyakit, hanya dalam sesetengah kes, selepas beberapa jangkamasa selepas jangkitan, terdapat manifestasi penyakit, yang dinyatakan dalam keletihan, sakit perut, kehilangan selera makan, kegelapan air kencing, muntah-muntah, loya, najis ringan, jaundis, sakit di sendi. Sebagai peraturan, gejala berlaku 6-7 minggu selepas jangkitan, tetapi tempoh permulaan tanda-tanda penyakit berbeza dari 2 minggu hingga enam bulan. Sekiranya gejala di atas berlaku, anda perlu berunding dengan doktor penyakit berjangkit dan menjalani ujian darah untuk hepatitis C. Diagnosis hepatitis, yang dijalankan pada masa yang tepat, dapat mengesan penyakit itu pada tahap awal dan meningkatkan peluang pemulihan.

Apabila ujian hepatitis C dijadualkan

Situasi apabila ujian Hepatitis C diperlukan:

semasa kehamilan dan perancangan keluarga;
pesakit dengan gejala hepatitis kronik atau akut;
orang itu berisiko. Ini adalah pekerja perubatan, orang dalam penjara, pegawai penguatkuasa undang-undang, orang yang menggunakan dadah, mempunyai banyak pasangan seksual, mempunyai AIDS, berada di hemodialisis, dan lain-lain.

Persediaan untuk Analisis Hepatitis C

Persediaan khusus untuk analisis hepatitis C tidak diperlukan. Untuk analisis, darah diambil dari urat pada perut kosong, pada masa yang sama, sekurang-kurangnya lapan jam harus lewat selepas makan terakhir.

Pemeriksaan hepatitis C ELISA

Analisis pertama, biasanya ditetapkan untuk diagnosis ujian hepatitis C - ELISA (ujian imunosorben berkaitan enzim). Pemeriksaan hepatitis C ELISA memungkinkan untuk mengesan kehadiran antibodi kepada virus hepatitis C (anti-HCVAb) dalam darah. Sekiranya keputusan ujian ELISA adalah positif, maka ia menunjukkan kehadiran sentuhan badan dengan virus hepatitis C. Tetapi 40% orang yang mempunyai ELISA positif tidak mengesan virus dalam darah. Fenomena ini dipanggil hasil positif palsu. Juga, dengan bantuan ELISA, darah penderma diperiksa.

RIBA untuk Hepatitis C

Analisis RIBA untuk hepatitis C digunakan untuk mengesahkan keputusan ELISA yang positif. Kaedah imunoblotting rekombinan (RIBA) adalah kajian yang lebih tepat tentang kehadiran antibodi terhadap virus hepatitis C. Kehadiran virus hepatitis C di dalam badan juga tidak menentukan hasil yang positif, tetapi hanya mengesahkan kehadiran antibodi.

Ujian hepatitis C PCR

Untuk mengesan kehadiran virus hepatitis C dalam darah (RNA HCV) dan membuat diagnosis, mereka paling sering menggunakan analisis dengan kaedah tindak balas rantai polimer (PCR). Kajian ini memungkinkan untuk mengesan dengan ketepatan yang tinggi kehadiran dalam darah walaupun sedikit virus. Analisis PCR untuk hepatitis C boleh mendedahkan kehadiran virus yang telah 5 hari selepas jangkitan, jauh sebelum penampilan antibodi. Apabila hasil analisis PCR adalah positif, itu bermakna adanya jangkitan aktif.

Terdapat variasi analisis PCR:

PCR kuantitatif, yang membolehkan menentukan bukan sahaja fakta kehadiran virus itu, tetapi juga virus (jumlah virus). Penunjuk ini sangat penting untuk menentukan keberkesanan rawatan;
genotip yang menubuhkan genotip virus hepatitis C, yang penting untuk menentukan tempoh dan taktik rawatan. Terdapat lebih daripada 10 genotip virus hepatitis C, tetapi untuk amalan klinikal, cukup untuk menentukan lima jenis yang paling biasa: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Analisis PCR kuantitatif dilakukan:

dengan ujian positif kualitatif untuk kehadiran virus RNA hepatitis C dalam serum;
untuk penilaian yang tepat tentang keberkesanan rawatan;
untuk menentukan taktik rawatan pesakit.

Tidak ada hubungan langsung antara keterukan hepatitis C dan jumlah virus dalam darah. Kepekatan virus menjejaskan infektivitas penyakit, iaitu semakin besar jumlah virus dalam darah pesakit, semakin besar risiko penyebaran virus, misalnya, melalui hubungan seksual atau dari ibu ke anak. Juga, keberkesanan rawatan bergantung kepada kepekatan virus. Semasa terapi, faktor yang menguntungkan adalah beban virus yang rendah, dan yang sangat tinggi tidak menguntungkan.

Analisis genotyping dilakukan:

dengan ujian positif kualitatif untuk kehadiran virus RNA hepatitis C dalam serum;
untuk penilaian yang tepat tentang keberkesanan rawatan;
untuk menentukan taktik rawatan pesakit;
untuk meramal kronisasi proses berjangkit;
untuk menentukan perkembangan penyakit.

Pengesanan genotip virus sangat penting untuk menentukan tempoh rawatan, yang penting, kerana interferon mempunyai pelbagai kesan sampingan dan toleransi pesakit yang rendah.

Analisis penyahkodan untuk hepatitis C

Biasanya, RNA virus, antibodi kepada mereka dan antigen sepenuhnya tidak hadir. Kehadiran antibodi dalam darah menunjukkan kehadiran hepatitis C kronik atau akut atau tempoh pemulihan. Jika RNA HCV hadir dalam darah, yang ditentukan oleh analisis PCR, ini menunjukkan kehadiran virus dalam darah.

Dengan teknik ujian yang salah, pengangkutan dan keabnormalan darah, analisis PCR kadangkala menunjukkan hasil positif palsu. Analisis ELISA dan RIBA pada peringkat awal penyakit, apabila badan belum menghasilkan jumlah antibodi yang mencukupi, mungkin menunjukkan hasil negatif palsu.

Sekiranya, apabila memecahkan ujian untuk hepatitis C, keputusan positif diperolehi, adalah perlu untuk menghubungi doktor penyakit berjangkit dan pakar gastroenterologi untuk mendapatkan rawatan lanjut dan rawatan.

Neutrophil segmen diturunkan

Platelet kanak-kanak adalah normal, tinggi, menurunkan

TGT hormon yang merangsang tiroid

Diagnosis Hepatitis

Orang tidak boleh menentukan kehadiran hepatitis di dalam badan dengan serta-merta, sejak tempoh inkubasi penyakit ini boleh bertahan hingga empat minggu. Apabila tanda-tanda pertama timbul, perubahan radikal dalam komposisi darah berlaku di organisma yang terkena: analisis biokimia melaporkan masalah kesihatan yang serius dan kehadiran virus patogen. Walau bagaimanapun, untuk membuat diagnosis akhir, tidak cukup untuk menderma darah untuk hepatitis, serta diagnosis terperinci hepatitis.

Diagnosis makmal hepatitis

Adalah wajar untuk menjalankannya selepas berakhirnya tempoh inkubasi, supaya doktor dengan ketepatan yang paling tepat dapat menentukan penyakit hati yang ada di dalam tubuh. Jika tidak, rawatan yang ditetapkan tidak akan memberikan kesan terapeutik yang diingini dan malah memburukkan gambaran klinikal yang lazim.

Diagnosis Hepatitis A

Lazimnya, diagnosis hepatitis A bermula dengan persoalan terperinci mengenai pesakit dan pelantikan sejumlah ujian yang harus dilakukan secepat mungkin. Ini adalah:

ujian darah biokimia;
jumlah darah yang lengkap;
Kaedah PCR;
ELISA;
coagulogram.

Jika penyakit Botkin berlangsung, maka lompat bilirubin, AlAT dan Asat yang tidak normal, sampel thymol diperhatikan mengikut hasil analisis darah biokimia. Lebih-lebih lagi, IgM anti-HAV spesifik dihasilkan, yang merupakan fakta yang tidak dapat disangkal tentang kehadiran hepatitis A.
Secara umum, analisis darah ditentukan oleh penurunan leukosit, lompat dalam ESR dan limfositosis. Dan, bagaimanapun, yang paling boleh dipercayai adalah kaedah PCR, yang menentukan penunjuk RNA virus patogenik.
Di samping itu, doktor mengkaji gejala-gejala penyakit itu, dan selepas itu ia dapat membuat diagnosis akhir dan menjalani terapi yang paling berkesan. Keperluan pemeriksaan instrumental sangat jarang berlaku. Selepas rawatan konservatif yang berjaya dalam keadaan kemasukan ke hospital dan kuarantin pesakit, pemulihan akhir menanti, dan hepatitis A tidak berulang lagi.

Diagnosis Hepatitis B

Untuk menentukan kehadiran virus hepatitis B juga mungkin berdasarkan keputusan ujian makmal, dan untuk ini hal pertama diperlukan untuk menderma darah untuk hepatitis. Secara semula jadi, virus patogen mempunyai tiga antigen utama - HBsAg, HBcAg dan HBeAg, yang mana antibodi dihasilkan dalam tubuh. Ciri utama gambar klinikal ini adalah ELISA - ELISA, yang hanya mengungkapkan penanda spesifik hepatitis B.
Segera ia perlu dijelaskan bahawa antigen HBsAg muncul di dalam darah walaupun sebelum gejala pertama hepatitis dan ditentukan dengan pasti dalam tempoh yang lebih lama. Walau bagaimanapun, ujian negatif tidak mengecualikan kehadiran hepatitis B, dan dengan itu memerlukan penggunaan kaedah reaksi rantai polimerase (PCR) yang sama berkesan.
Jika anda mengesyaki bahawa hepatitis B adalah wajib adalah ujian darah biokimia, yang disyorkan untuk lulus di tempat pertama. Melakukan biopsi hati dan ultrasound organ-organ peritoneal dibincangkan secara individu, tetapi apabila sejarah penyakit itu sangat jelas, tidak ada keperluan untuk kaedah pemeriksaan klinikal.

Echogram hati dalam hepatitis autoimun di peringkat hepatitis kronik

Diagnosis Hepatitis C

Untuk membuat diagnosis ini, ia tidak mencukupi untuk menderma darah untuk hepatitis, kerana virus itu mungkin berlaku di dalam tubuh dalam bentuk laten. Dan, bagaimanapun, ujian makmal utama adalah semua analisis yang dibentangkan di atas, serta prestasi tambahan biopsi hati. Pemeriksaan mikroskopik bahan biologi (dalam kes kita, sekeping tisu hati) menentukan sejauh mana proses patologi dan fibrosis tisu. Pensampelan bahan dilakukan di bawah anestetik tempatan, komplikasi prosedur sedemikian amat jarang berlaku dalam amalan perubatan.
Jika disyaki hepatitis C, kaedah utama pemeriksaan klinikal adalah ultrasound organ-organ peritoneal. Alasannya mudah: penyakit ini sering ditunjukkan oleh perubahan visual pada hati yang terjejas, perubahan struktur dan saiznya. Dengan cara ini anda boleh menentukan:

saiz hati, limpa, pankreas dan pundi hempedu;
perubahan patologi dalam organ-organ ini;
aliran darah umum di organ peritoneal;
kawasan yang optimum untuk melakukan biopsi hati.

Kaedah pemeriksaan klinikal ini menentukan semua pathologi fokus organ di peringkat mikroskopik. Jika hati diwakili pada skrin dalam skala kelabu, biopsi segera diperlukan, kerana warna kelabu menggambarkan tisu-tisu yang terkena "penapis manusia".

Pencegahan hepatitis

Oleh kerana penyakit itu tidak muncul dengan segera, ia jauh dari semua gambar klinikal yang meneruskan rawatan segera. Pesakit mungkin tidak menyedari kewujudan virus patogen dalam tubuh, yang, sebaliknya, dengan cepat merebak ke aliran darah dan menjangkiti sel-sel hati yang sihat.
Untuk mengelakkan nasib tragis, disyorkan untuk mematuhi semua langkah pencegahan. Kewaspadaan sedemikian akan mengurangkan risiko morbiditi dan menyelamatkan anda daripada masalah kesihatan yang serius pada masa akan datang. Peraturan pencegahan asas dibentangkan di bawah:

basuh tangan anda selepas jalan;
tertakluk kepada pemprosesan sayur-sayuran dan buah-buahan yang berkualiti tinggi;
untuk menjalankan semua vaksin pencegahan yang dinyatakan dalam pelan kalendar tahunan;
sikap selektif terhadap pasangan seksual;
elakkan bersentuhan dengan orang yang sakit;
gunakan hanya jarum suntikan sekali pakai dan lebih berhati-hati di stesen pemindahan darah.

Ia juga disyorkan untuk kerap (sekali setiap enam bulan) menderma darah untuk hepatitis, untuk memastikan bahawa virus itu tidak menembus ke dalam badan, dan tidak menjangkiti sel-sel hati yang pernah sihat. Jika diagnosis ditentukan, ia dikehendaki segera menjadi akaun dispensari dan mengikuti semua cadangan pakar.

Pengarang penerbitan:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Pendidikan: Universiti Perubatan Negeri Rostov (Universiti Perubatan Negeri Rostov), Jabatan Gastroenterologi dan Endoskopi.
Ahli gastroenterologi
Doktor Sains Perubatan

Kaedah ELISA untuk mengesan hepatitis

Perubatan moden dikenali kerana banyak penyakit hati. HCV (virus hepatitis C) adalah antara yang paling biasa dan berbahaya kerana jangkitan ini sering berkembang secara asymptomatically dan membawa kepada komplikasi kritikal, walaupun kematian. Itulah sebabnya diagnosis penyakit yang tepat pada masanya, yang dijalankan menggunakan pelbagai kaedah, termasuk ujian imunosorben berkaitan enzim (ELISA) untuk mengesan antibodi terhadap virus dalam darah, adalah sangat penting.

Penyataan jangkitan HCV untuk diagnosis hepatitis

Di dalam diagnostik makmal untuk mengesan hepatitis C (jangkitan HCV), dua jenis kaedah digunakan:

Serologi, berdasarkan pengesanan antibodi kepada virus hepatitis C (anti-HCV), juga dikenali sebagai ELISA (enzim yang berkaitan dengan imunosorbent assay). Ia bertujuan untuk mengesan anti-HCV (penanda IgM dan IgG) yang digunakan untuk pemeriksaan dan untuk mendiagnosis hepatitis C. Kedua-dua penanda ini boleh dikesan dalam darah (plasma) dalam kombinasi yang berbeza, yang memerlukan penafsiran klinikal yang betul. Untuk mengesahkan kehadiran anti-HCV, ujian RIBA (rekombinan imunoblot) dilakukan.
Biologi molekul, yang bertujuan untuk mengesan virus RNA. Ujian RNA HCV ditetapkan untuk kategori pesakit berikut:
- dengan anti-HCV yang dikenalpasti;
- tanpa mengesan anti-HCV, tetapi dengan data epidemiologi dan klinikal yang ditubuhkan yang memerlukan pengecualian bentuk akut HCV.

RNA virus boleh dikesan dalam darah seawal 14 hari selepas jangkitan, iaitu sebelum penampilan anti-HCV yang berlaku dalam tempoh 2-3 bulan pertama.

Untuk pengesahan akhir diagnosis (terutama apabila hanya satu daripada dua penanda jangkitan HCV yang dikesan), pakar menyarankan bahawa, selepas masa tertentu, ujian berulang terhadap anti-HCV dan RNA HCV perlu dijalankan.

Pengesanan hepatitis oleh ELISA

Untuk pelaksanaan diagnosis awal hepatitis virus, terutamanya tanpa gejala, bentuk anikterik, dalam serum, kehadiran protein virus (antigen) atau antibodi kepada mereka (yang dihasilkan oleh sistem imun apabila virus masuk ke dalam badan) melalui ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim (ELISA) yang dikesan. Ini adalah kaedah universal diagnosis imunologi, intinya terletak pada kajian interaksi "antigen-antibodi". Ia digunakan secara meluas di banyak negara di dunia.

Penentuan hepatitis oleh ELISA membolehkan bukan sahaja menubuhkan diagnosis yang tepat, tetapi juga untuk menilai jenis penyakit, serta memilih rawatan yang cekap dan berkesan menggunakan ubat-ubatan tradisional (interferon, ribavirin), dadah tindakan langsung (Sofosbuvir, Daclatasvir) dan generik pengeluaran India dan Cina.

Bila mungkin, diagnosis hepatitis virus oleh ELISA ditambah oleh PCR (tindak balas rantai polimerase), yang membolehkan untuk menentukan kehadiran virus hepatitis dalam RNA.

Betapa tepatnya kaedah enzim immunoassay

Menurut anggaran pakar, ketepatan kaedah ELISA adalah 95%, iaitu 95 dari 100 pesakit menggunakan immunoassay enzim, kehadiran dan jumlah antibodi HCV - IgM dan IgG dapat dikesan dalam darah. Jika hasilnya positif, adalah mungkin untuk mendiagnosis hubungan HCV dengan badan (bukan virus itu sendiri, iaitu kehadiran antibodi dalam darah itu, yang mungkin disebabkan oleh penyakit yang sudah dipindahkan).

Walau bagaimanapun, walaupun kepekaan yang tinggi terhadap enzim imunosorben yang berkaitan dengan enzim (ELISA), dalam 40% pesakit yang mempunyai kesan positif, virus itu tidak dapat dikesan, menunjukkan hasil yang meragukan atau palsu.

Untuk mengesahkan ketepatan keputusan ELISA, kaedah RIBA (recombinant immunoblotting) digunakan untuk mengkaji dengan lebih tepat pengesanan antibodi kepada HCV.

Ujian teras Anti NCV

Kajian berkesan untuk menentukan kehadiran antibodi kepada virus hepatitis termasuk teras anti-HCV, yang digunakan sebagai ujian pengesahan apabila keputusan "tidak menentu" diperolehi.

Jika teras anti-HCV dikesan dalam serum pada pencairan 1: 1000, hasil positif mungkin didiagnosis, iaitu, penyakit itu hadir.

Jika sampel pada pengenceran 1: 1000 adalah negatif, pada pengenceran 1: 200 adalah positif, penyelidikan diperlukan untuk kehadiran RNA virus. Dalam kes ini, kemungkinan besar, tidak ada jangkitan HCV.

Adalah penting untuk memahami bahawa, dalam bentuk kronik HCV, antibodi sentiasa dikesan, dan semasa penghapusan (penyingkiran dari sel-sel badan) virus, mereka berterusan selama 4-8 tahun atau lebih. Oleh itu, kehadiran anti-HCV tidak selalu menunjukkan jangkitan badan dan tidak membenarkan membuat kesimpulan yang objektif mengenai aktiviti proses. Untuk mendapatkan data yang tepat mengenai beban virus, tahap kerosakan hati, tempoh jangkitan dan perbezaan antara bentuk akut dan kronik penyakit, disyorkan untuk menggunakan definisi spektrum antibodi kepada HCV yang berbeza peptida. Ia juga penting untuk melihat dinamik kuantitatif dan kualitatif mereka.

Analisis ELISA - dari pemeriksaan untuk HbsAg kepada diagnostik kompleks

Dengan pengenalan teknologi moden dalam bidang perubatan, kemungkinan kaedah diagnostik imunokimia, yang dapat dengan cepat dan tepat mengenali penyakit ini, apabila kaedah lain tidak berkuasa, semakin berkembang. Memahami bahawa virus hepatitis B mampu berada di dalam badan dalam kepekatan yang sangat rendah, di mana ia tidak dapat dikesan walaupun dengan cara yang boleh dipercayai seperti PCR, menjadikannya perlu untuk melihat wajah baru mengenai masalah mendiagnosis penyakit ini dan untuk menghargai kemungkinan immunoassay.

Dalam bahan ini kita akan menganalisis secara terperinci semua yang berkaitan dengan jenis penyelidikan makmal ini. Anda akan belajar apa yang immunoassay enzim dan bagaimana ia dilakukan, apa antigen Australia dan bagaimana ia ditentukan, apa yang tidak dapat difahami oleh singkatan Hbs ag, Hbcor, dengan makna dan peranan mereka dalam mentafsirkan analisis, dan juga mendapatkan banyak maklumat berguna dan menarik.

Kandungan artikel:

Maklumat am mengenai ELISA

ELISA (disingkat ELISA) adalah kaedah diagnostik makmal yang dapat mengesan antigen dan antibodi dari pelbagai jenis jangkitan, termasuk hepatitis B. Pengetahuan semasa sifat-sifat virus dan ciri-ciri tindak balas imun tubuh, bukan hanya mengesan jangkitan, tetapi juga mengenal pasti peringkat, keberkesanan vaksinasi dan menilai keberkesanan rawatan.

Intipati enzim immunoassay

ELISA didasarkan pada reaksi antigen-antibodi, atau sebaliknya sifatnya.

Sebagai tindak balas terhadap pencerobohan bahan asing (antigen), yang khususnya adalah protein virus, tubuh menghasilkan protein pelindung - antibodi. Antibodi memasuki reaksi yang kompleks dengan antigen, menyekat aktivitinya.

Kami akan membincangkan lebih lanjut mengenai antigen dan antibodi di bawah, tetapi sekarang kita akan perhatikan bahawa bagi setiap antigen ada individu yang tegas, atau sebagai doktor mengatakan, antibodi homologus. Oleh itu, jika kita ingin mengesan antigen tertentu dalam darah, kita akan menggunakan tablet diagnostik dengan antibodi untuknya. Jika ada antigen dalam darah, ia akan bertindak balas dengan antibodi, yang dapat dikesan dalam pelbagai cara. Dan sebaliknya. Sekiranya kita ingin mencari sebarang antibodi, maka kita memerlukan tablet dengan antigen yang sesuai.

Selalunya, nilai diagnostik beruang hanya antibodi yang mana anda boleh mendiagnosis hampir apa-apa jangkitan. Walau bagaimanapun, keunikan virus hepatitis B adalah peranan utama dalam diagnosis yang dimainkan oleh salah satu antigen - antigen Australia.

Bagaimanakah IFA

Pertimbangkan prosedur ELISA yang biasa untuk contoh khusus apabila anda ingin mengenal pasti antibodi terhadap patogen.

Untuk diagnostik, tablet dengan 96 telaga digunakan, yang sebelum ini tepu dengan antigen yang sepadan. Selanjutnya, prosedurnya adalah seperti berikut:

serum digunakan untuk semua sel;

antibodi homologus bertindak balas dengan antigen dan dilampirkan pada plat;

membasuh tablet, membuang antibodi tidak terikat;

maka label enzimatik diperkenalkan ke dalam sel - bahan yang bertindak balas dengan antibodi dan menyebabkan pewarnaan kandungan sel.

Ini adalah prosedur piawai ELISA dengan pewarnaan, yang digunakan, contohnya, dalam jalur ujian immunochromatographic.

ELISA tidak terhad kepada penentuan kualitatif antibodi atau antigen patogen. Semakin banyak antibodi terkandung dalam sel-sel tablet, semakin kuat larutan berwarna. Membandingkan ketumpatan optiknya dengan kawalan, peralatan moden dapat mengira kepekatan antibodi per unit secara tepat dengan tepat. Oleh itu, ELISA kuantitatif dijalankan, ukuran pengukuran yang paling kerap ialah unit ketumpatan optik (EOP).

Analisis immunochemiluminescent

Hari ini terdapat beberapa dozen jenis ELISA, masing-masing mempunyai skop pilihan. Yang paling popular dalam diagnosis hepatitis B ialah analisis immunochemiluminescent.

Label enzimatik untuk analisis ini bukan kromatin, seperti dalam piawai ELISA, tetapi bahan khas - fosfor yang menyebabkan kompleksnya bercahaya dalam cahaya ultraviolet.

Dengan bantuan alat khas - luminometer, anda boleh menentukan tahap pelepasan dengan tepat dan, sebagai akibatnya, kepekatan bahan yang dikehendaki.

Menggunakan kaedah ELISA menentukan hampir semua antigen sedia ada virus hepatitis B dan antibodi kepada mereka.

Antigen virus Hepatitis B: Hbs, Hbe dan Hbc

Antigen istilah (antigen) berasal dari dua perkataan Inggeris: antibodi - antibodi dan penjana - pengeluar. Oleh itu, di bawah antigen memahami apa-apa bahan yang menyebabkan pembentukan antibodi dalam badan itu. Antigen yang paling biasa adalah sebatian protein.

Hari ini, tiga antigen virus hepatitis B dikenali: hbsag, hbc dan hbe.

Antigen Australia

Protein yang merupakan sebahagian daripada cacing luar hepatitis B patogen telah dikesan jauh sebelum penemuan virus itu sendiri. Antigen ini mendapat namanya kerana ia mula-mula dikenal pasti dari penduduk asli Australia. Walau bagaimanapun, pada mulanya, protein tidak dianggap sebagai antigen, tetapi unsur darah yang sama sekali normal di kalangan penduduk pribumi, dan kesedaran tentang hubungannya dengan penyakit hati datang sedikit kemudian.

Pemeliharaan jangka panjang antigen dalam darah dan ketiadaan antibodi menunjukkan kemungkinan pembentukan hepatitis B kronik HBeAg positif

Hari ini dalam kesusasteraan profesional nama "antigen Australia" tidak dapat dijumpai dan digantikan oleh singkatan antarabangsa - HbsAg (antigen permukaan hepatitis b - antigen permukaan hepatitis B). Di samping itu, anda boleh mencari singkatan hbs antigen atau hanya hbs. Mana-mana singkatan ini boleh diterima dan boleh ditambah dengan merakam HBV atau HBV - virus hepatitis B (virus hepatitis b).

Antigen permukaan virus hepatitis B mempunyai satu ciri yang luar biasa yang menjadikannya penanda diagnostik yang sangat diperlukan - kepekatannya dalam darah dapat mencapai tahap yang sangat tinggi, sehingga setengah miligram per mililiter darah. Ini kerana hanya sebahagian kecil daripada HBsAg baru, yang terbentuk semasa pembiakan virus hepatitis B, membina membran zarah-zarah virus baru, dan selebihnya - bebas mengedarkan darah. Akibatnya, bilangan zarah hbs dalam darah boleh melebihi jumlah berair beratus ribu kali.

Ciri ini menjadikan antigen Australia penanda utama dalam diagnosis penyaringan hepatitis B, yang dijumpai dalam darah seawal 4-6 minggu selepas jangkitan. Sebagai bentuk antibodi, antigen permukaan secara beransur-ansur digantikan oleh mereka. Jika selepas 6 bulan HBsAg berterusan, maka ini menunjukkan peralihan jangkitan kepada bentuk kronik.

Baru-baru ini, apabila menjadi mungkin untuk menentukan kepekatan hbs hbv, peranannya dalam diagnosis semakin meningkat, kerana bergantung pada tahap antigen dapat membedakan hepatitis B kronik (HBV) dari keadaan pembawa yang sihat, serta memantau keberkesanan rawatan.

Antigen teras

Di inti virus - nucleocapsid - adalah protein yang mengawal penghasilan semula virus HBcoreAg dan HBeAg.

HBcoreAg, yang juga boleh dipanggil HBCore-antigen, hbc atau antigen teras, hanya boleh didapati di tisu hati, secara langsung di dalam nuclei hepatosit. Antigen ini tidak dikesan dalam darah dan tidak mempunyai nilai diagnostik.

Struktur virus hepatitis

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - sebaliknya, memainkan peranan penting dalam diagnosis. HBeAg dan HBcoreAg adalah saudara terdekat. Mereka mempunyai persamaan hebat struktur dan berbeza terutamanya dalam kedudukan ruang molekul. Tidak seperti HBcore, HBe bukan sebahagian daripada dinding nukleokapsid, dan beredar secara bebas dalam darah.

Peranan HBe dalam proses menular tidak cukup jelas, bagaimanapun, keunikan tingkah laku dan hubungan mereka dengan proses berjangkit telah pun dipelajari dengan cukup. HBeAg menunjukkan pembiakan virus aktif dan membolehkan anda untuk menentukan fasa CHB - HBeAg positif atau HBeAg negatif.

HBe boleh dikesan dalam darah yang sudah dalam tempoh inkubasi virus hepatitis B akut (HBV), sementara kepekatan tinggi HBeAg selama 3 minggu kemungkinan besar menunjukkan ancaman proses kronik. Kepekatan HBe secara langsung berkaitan dengan kandungan partikel Dane (yang dikenali sebagai zarah virus hepatitis B) - semakin tinggi jumlah HBe, semakin tinggi kepekatan DNA HBV dalam darah.

HBeAg adalah penanda utama penyakit menular. Darah pesakit HBeAg positif lebih menular daripada HBeAg-negatif. Contohnya, pada wanita mengandung positif untuk HBe dan Hbs, kebarangkalian pemindahan jangkitan kepada kanak-kanak mencapai 50%, manakala kebarangkalian kejadian seperti ini dalam HBe negatif, tetapi Hbs ibu positif adalah 10-30%.

Hbe menentukan perjalanan hepatitis kronik. HBeAg-positif hepatitis B kronik mempunyai prognosis yang jauh lebih buruk dari segi perkembangan sirosis.

Itu mungkin semua yang anda perlu tahu mengenai antigen HBV, dan kami teruskan ke kumpulan kedua penanda hepatitis B - antibodi.

Apakah kesan EIA positif atau negatif untuk hepatitis C bermakna?

Untuk tepat menentukan jenis hepatitis selepas diagnosis awal, untuk meramalkan perjalanan penyakit, untuk menubuhkan tahap perkembangannya, menggunakan pelbagai kajian serologi. Data yang paling tepat diperolehi selepas immunoassay enzim. Menggunakan ELISA hepatitis C, didiagnosis dalam 95% kes. Ia adalah analisis ini yang memungkinkan untuk mengesan antibodi Hepatitis C antivirus (HCV antivirus) dan menilai bukan sahaja tahap proses patologi, tetapi juga tahap keberkesanan terapi antivirus yang ditetapkan oleh doktor yang menghadiri dan dijalankan di bawah kawalannya.

Apabila penyelidikan diperlukan dan ciri-cirinya

Hepatitis C adalah jenis penyakit yang paling berbahaya, kerana ia mempunyai tempoh laten (laten) yang panjang dan akibat berbahaya. Untuk mengelakkan penampilan dan perkembangan diagnosis yang betul dan tepat pada masanya, salah satu kaedah yang paling bermaklumat yang dikenali sebagai immunoassay.

Adalah mungkin untuk mengesahkan kehadiran jangkitan HCV dalam darah pesakit dengan bantuan penanda serologi, dan analisis yang berdasarkan kompleks peptida virus struktur dan bukan struktur membolehkan mendapatkan data yang paling lengkap dan boleh dipercayai mengenai kewujudan antibodi. Pada orang yang sihat, antibodi kepada virus hepatitis C dalam darah pesakit tidak hadir, dan pengesanan mereka menunjukkan kehadiran patogen dan perkembangan proses patologi.

Dalam kajian ini, para pakar mengenal pasti jumlah antibodi kelas IgM dan IgG yang berkaitan secara langsung dengan struktur dan struktur protein HCV. Menjalankan kajian ini membolehkan kita mengenal pasti pesakit yang dijangkiti virus hepatitis C pada tahap awal penyakit. Kehadiran jumlah antibodi dalam darah pesakit menunjukkan permulaan penyakit atau jangkitan sebelumnya.

Permulaan penyakit ini ditunjukkan oleh kehadiran antibodi kelas IgM, dan jenis hepatitis C boleh diadili oleh antibodi kelas IgG yang dikesan. Mereka menjadi pengesahan penyembuhan (tahap terakhir penyakit). Untuk tempoh ini, pemulihan anatomi dan fungsi organ-organ yang terkena adalah ciri-ciri.

ELISA (ELISA) yang tepat pada masanya membolehkan anda mengenal pasti proses patologi pada peringkat awal pembangunan, mendiagnosis penyakit dengan ketepatan yang tinggi dan meningkatkan peluang pemulihan segera. Ujian ELISA memungkinkan untuk menentukan bukan sahaja kehadiran virus, tetapi juga jumlah antibodi antivirus spesifik.

Wanita dalam keadaan mengandung semasa mendaftar di klinik antenatal.
Pesakit yang mempunyai gejala hepatitis akut atau kronik.
Pakar perubatan yang sentiasa bersentuhan dengan bahan biologi.
Pesakit dengan diagnosis AIDS.
Pakar kecanduan dadah.
Pesakit dengan alkohol dan mereka yang menjalani gaya hidup yang asos.

Rujuk kepada ujian ELISA (enzyme immunoassay) dan menerima pegawai penguatkuasa undang-undang atau pekerja perkhidmatan awam. Keperluan untuk ELISA berlaku jika anda mengesyaki pelanggaran kefungsian hati atau ketika menerima data yang dipertanyakan pada keadaan organ setelah ultrasound. Doktor boleh memberi rujukan kepada pesakit untuk ujian darah ELISA jika yang terakhir adalah menjalani campur tangan pembedahan yang kompleks. Jika seorang wanita (terutamanya berusia lebih dari 30 tahun) merancang kehamilan, dan nilai bilirubin atau transferase (ALT, AST) yang tinggi dijumpai dalam ujian darah.

Anti-virus antibodi IgG spesifik telah dikesan selama beberapa tahun. Kepekatan mereka secara beransur-ansur berkurangan, yang mengesahkan dinamik positif. Bagi hepatitis C kronik, dalam kes ini, bilangan jumlah antibodi anti-HCV tidak berubah. Diagnosis tepat adalah berdasarkan menentukan tahap antibodi IgM.

Kursus hepatitis C bergantung kepada genotip virus yang menyebabkan perkembangan penyakit ini. 11 jenis perubatan moden diketahui. Dalam keadaan yang paling sukar, jangkitan dengan beberapa genotip virus adalah mungkin, dan salah satu daripada mereka sentiasa berubah menjadi dominan. Hanya diagnosis yang tepat akan membantu memilih ubat yang paling berkesan untuk terapi berkesan, memilih dos mereka dan menetapkan tempoh intervensi terapeutik.

Penilaian hasil penyelidikan

Untuk membuat diagnosis hepatitis C yang disyaki dan mendapatkan maklumat petunjuk tentang kuantiti dan kualiti patogen, enzim imunosorbent berkaitan enzim (ELISA) dilakukan, di mana pakar menerima pengesahan kehadiran virus di dalam badan dan boleh menilai aktivitinya.

Dengan kajian ini, kita boleh membuat kesimpulan mengenai:

viral load;
risiko membangunkan proses kronik;
aktiviti pembiakan (replikasi) molekul RNA HCV;
tempoh proses patologi;
tahap kerosakan hati.

Tahap risiko penyakit yang menjadi kronik juga dinilai. Dikenal dengan menggunakan antibodi antivirus ELISA HCV menunjukkan replikasi virus. Hasil akhir memerlukan pengesahan dengan penyelidikan yang lebih tepat.

Penilaian kualitatif hasil immunoassay enzim dinyatakan sebagai hasil positif atau negatif. ELISA membolehkan untuk mengesan hepatitis C pada peringkat awal perkembangan penyakit ini, dan juga dalam perjalanan penyakit dalam bentuk anikterik.

Analisis mempunyai kelebihan tertentu, termasuk:

Ketepatan penunjuk kualitatif dan kuantitatif.
Masa pengajian minimum.
Ujian berperingkat.

Enzim immunoassay adalah salah satu daripada kaji selidik yang dibezakan dengan ketepatan yang tinggi, tetapi walaupun semua kelebihannya, dalam beberapa keadaan ia tidak memungkinkan untuk mengenal pasti patogen yang ada di dalam tubuh manusia.

Untuk penyelidikan, pembantu makmal mengambil darah vena pesakit dan meletakkannya di dalam bekas khas. Selepas masa tertentu, antigen (mikroorganisma asing) dilekatkan ke dinding kapal. Pakar memasukkan imunoglobulin (antibodi) ke dalam kapal dan mencari tindak balas imun.

Hasil yang diperoleh dibandingkan dengan data jadual yang disusun khas. Hasilnya dinilai sebagai:

Positif, menunjukkan kehadiran bentuk akut penyakit ini, jika kehadiran antibodi kelas IgA, IgG, IgM ditentukan semasa ujian darah.

Negatif - ketiga-tiga jenis antibodi tidak dikesan, tidak hadir.

Positif palsu - Keputusan ELISA positif, tetapi tidak disahkan selepas PCR (reaksi rantai polimerase).

Ragu-ragu - penanda dalam darah tidak dikesan dengan kehadiran hepatitis C. Ini mungkin dilakukan dengan diagnosis terlalu awal. Analisis berulang selepas 2-3 minggu diperlukan. Untuk diagnosis yang tepat, buat analisis PCR.

Hasil analisa negatif palsu adalah mungkin pada pesakit yang mengambil ubat-ubatan yang mempunyai kesan perencatan pada sistem pertahanan tubuh.

Kedua-dua hasil negatif negatif palsu dan palsu adalah mungkin untuk beberapa sebab. Pertama sekali, ia adalah viral load yang paling rendah pada peringkat awal perkembangan penyakit. Sama pentingnya adalah keadaan sistem imun pesakit dan ciri-ciri individu tubuhnya. Hasil kajiannya memberi kesan yang sangat besar terhadap pemberian ubat dari kalangan imunosupresan.

Tidak mustahil untuk benar-benar yakin dengan ketepatan hasil immunoassay, jika pesakit adalah wanita dalam keadaan kehamilan. Keputusan palsu adalah mungkin dalam kes di mana analisis dilakukan untuk pesakit yang mengidap penyakit autoimun, penyakit onkologi dengan tumor jinak.

Penyelidikan tambahan dijalankan jika pesakit baru-baru ini mengalami penyakit berjangkit serius, dia telah didiagnosis dengan gangguan metabolik atau kerosakan sistem endokrin. Sekiranya komposisi darah tinggi heparin atau penurunan kadar unsur-unsur surih yang ketara.

Ketepatan analisis dapat ditingkatkan dengan memerhatikan aturan yang ada untuk mempersiapkan penyerahannya:

Darah disumbangkan hanya pada perut kosong. Hidangan terakhir dibenarkan sekurang-kurangnya 8-10 jam sebelum bahan dikumpulkan.
Pada waktu petang, sebelum analisis, ia dikehendaki menolak makan lemak, goreng, pedas, produk dan hidangan salai.
Tidak boleh bercakap mengenai minum alkohol.
Lebih baik berhenti merokok sehari sebelum derma darah.

Ujian imunosorben enzim yang berkaitan dengan enzim boleh dilakukan hanya untuk pesakit-pesakit yang tidak mengalami penyakit katarak, radang atau berjangkit, dan tidak mengadu tentang pendedahan.

Pelanggaran terhadap peraturan dan keperluan yang disenaraikan menyebabkan fakta bahawa hasil analisa dinilai sebagai positif palsu. Keadaan ini berkembang dalam 15-20% kes. Walau bagaimanapun, untuk keyakinan lengkap, doktor merujuk pesakit untuk pemeriksaan tambahan, di mana mereka perlu menderma darah untuk PCR.

Tindak balas rantai polimerase

Diagnosis tidak mungkin hanya berdasarkan hasil analisis ELISA. Kehadiran antibodi bukan bukti kehadiran virus patogen dalam tubuh pada masa kajian. Ujian yang salah boleh menimbulkan kerosakan saraf atau lebih banyak reaksi akut pesakit. Diagnosis berdasarkan keputusan ELISA tidak tepat. Penyelidikan tambahan diperlukan, keputusannya akan menghasilkan keputusan akhir doktor.

Adalah penting untuk diingat bahawa hasil ujian palsu palsu mungkin berlaku pada orang yang sedang menderita penyakit berjangkit lain, tetapi sistem imun mereka tidak bertindak balas dengan betul terhadap penembusan patogen atau virus ke dalam tubuh.

Diagnosa hepatitis C membolehkan beberapa ujian makmal, tempat khusus di antaranya adalah asid imunosorben yang berkaitan enzim (ELISA). Penilaian kualitatif indikator ditakrifkan sebagai hasil positif atau negatif. Ketiadaan virus hepatitis B dalam darah pesakit adalah norma, tetapi dalam beberapa kes, selepas kajian, para pakar menyatakan bahawa kepekatan yang tidak penting dari beberapa serpihan RNA (asid ribonukleat) telah dijumpai dalam bahan biologi. Kenal pasti mereka menggunakan PCR (reaksi rantaian polimerase).

Ujian darah ini memungkinkan untuk mengenal pasti agen penyebab hepatitis C pada peringkat awal perkembangan penyakit dan membuat diagnosis dengan ketepatan yang tinggi. Kajian ini berdasarkan fakta bahawa virus mempunyai molekul DNA (hepatitis B) atau RNA (hepatitis C) dalam struktur mereka.

Semasa analisis PCR menggunakan rawatan khas sampel darah pesakit:

meningkatkan kepekatan molekul asid nukleik;
menentukan jenis mereka;
menubuhkan jenis patogen.

Jika terdapat sejumlah kecil serpihan RNA patogen dalam darah manusia, semuanya akan dikesan oleh PCR. Ini memungkinkan untuk membuat diagnosis yang tepat. Perbezaan utama analisis ini dari semua kaedah penyelidikan lain adalah diagnosis tepat 100%.

Analisis ini dijalankan dalam kajian darah wanita hamil yang digunakan untuk klinik antenatal untuk pendaftaran, dengan disyaki hepatitis C dengan tempoh laten (laten) yang panjang, dengan kesukaran untuk membuat diagnosis yang tepat menggunakan ELISA. PCR adalah perlu dalam kes-kes di mana hasil yang diragui diperolehi selepas immunoassay enzim.

Virus Hepatitis C dalam keadaan ini adalah di dalam tubuh pesakit, tetapi belum menimbulkan perkembangan pesat penyakit ini. Ini adalah penyakit laten penyakit ini. Analisis dilakukan agak cepat, kerana tidak perlu mengembangkan patogen menggunakan medium nutrien untuk mendapatkan hasilnya. Perbezaan utama antara PCR dan imunosorbent assay enzyme-linked (ELISA) adalah bahawa dalam kajian ini tidak ada apa-apa hasil positif palsu atau diragui.