Analisis kualitatif untuk hepatitis C

8 Mac, 2017, 12:29 Artikel ahli: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10,547

Analisis kualitatif tindak balas rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam badan. Dalam keadaan makmal, struktur RNA diselidiki, yang akan merangkumi virus. Dalam kes pengesanan virus C, perlu menjalani rawatan, kerana keadaan hati yang terabaikan akan menyebabkan akibat yang teruk. PCR berkualiti tinggi dilakukan selepas pemulihan untuk mengesahkan ketiadaan antibodi. Dilantik dan untuk pemeriksaan rutin. Dengan kepekatan rendah agen penyebab dalam darah, PCR (kualitatif) tidak dapat mengesan apa-apa, kerana sistem diagnostik mempunyai ambang kepekaan sendiri. Dalam kes peringkat awal penyakit atau bentuk ringan, PCR dilakukan oleh ultradiagnostics pada peralatan ultra-sensitif.

Apakah virus RNA?

Istilah RNA virus hepatitis C (atau RNA virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C mengikat ke sel tubuh yang sihat dengan menembusi ke dalam. Lama kelamaan, tersebar di seluruh badan, hanya perlu masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen itu menembusi hati, bersatu dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hepatik (hepatosit) berfungsi di bawah pengaruhnya, menjalani perubahan, dan dari ini mereka mati. Semakin lama virus C berada di hati, semakin banyak jumlah sel mati. Lama kelamaan, penyakit berbahaya berkembang, membawa kepada kemerosotan ganas dan kematian.

Jangkitan hati dengan jenis virus ini mungkin tidak nyata secara luaran. Selama bertahun-tahun atau beberapa dekad, orang yang dijangkiti terasa sihat, dan hanya pemeriksaan rawak yang paling sering mendedahkan patologi. Apabila menderma darah untuk hepatitis, sebahagian daripada rantaian RNA (ribonucleic acid), yang merupakan sebahagian daripada gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil ujian makmal tidak boleh digunakan untuk perawatan diri, karena ini hanya penunjuk. Gambaran yang tepat dan diagnosis lanjut adalah lebih baik ditentukan oleh doktor.

Apabila selesai: petunjuk untuk penyelidikan

Dalam pengesahan HCV, analisis PCR dilakukan (tindak balas rantai polimerase). Kajian PCR membantu mencari agen penyebab dalam struktur RNA dan menetapkan terapi yang berkesan. Dilantik dalam kes berikut:

  • pengesanan tanda-tanda keradangan hati;
  • kajian skrining untuk pencegahan;
  • pemeriksaan orang yang dihubungi;
  • diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
  • menentukan tahap aktiviti pembiakan virus dalam bentuk kronik;
  • sirosis hati;
  • untuk menentukan keberkesanan rawatan yang ditetapkan.
Penyelidikan PCR menetapkan doktor untuk menentukan keberkesanan rawatan rawatan hepatitis.

Terdapat analisis kualitatif serta analisis kuantitatif PCR. PCR kuantitatif menunjukkan peratusan RNA dengan pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan kehadiran atau ketiadaan virus. Penunjuk positif kualiti (kehadiran Hepatitis C RNA) juga memerlukan penyelidikan kuantitatif. Tahap penumpuan yang tinggi dari agen penyebab hepatitis C dikaitkan dengan risiko penularannya, iaitu, jangkitan orang lain. Nombor yang rendah lebih baik dirawat. Jumlah virus RNA dalam darah tidak berkaitan dengan intensiti penyakit ini. Analisis PCR juga dilakukan dalam kes terapi interferon untuk menetapkan tempoh dan kerumitan kursus rawatan.

Ciri-ciri analisis PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif ditugaskan dengan penunjuk tindak balas rantai polimerase bagi semua pesakit yang mempunyai antibodi untuk hepatitis C dalam darah mereka. Mereka yang telah sakit dan didapatkan mesti mengambil ujian semula. Adalah disyorkan untuk mengambil analisis untuk hepatitis B, maka, jika kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, tindak balas kualitatif yang dianalisis harus dilakukan bersamaan dengan ujian darah yang lain. Analisis akan menunjukkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil ujian, hanya ujian positif untuk hepatitis C akan kelihatan atau negatif, iaitu kehadiran atau ketiadaan virus. Jika output "dikesan", maka virus itu dan terus aktif. Penetapan "tidak dikesan" menunjukkan ketiadaan virus atau jumlahnya yang kecil. Dengan penunjuk ini, perlu diingat bahawa sensitiviti analisis sistem diagnostik adalah berbeza dan bahawa hepatitis C RNA masih boleh di dalam darah, tetapi tidak ditunjukkan dalam analisis.

Kaedah PCR yang sangat sensitif mendedahkan ultra hepatitis C walaupun dalam jumlah yang sedikit. Kajian hibridensi fluoresen digunakan, yang banyak kali lebih tinggi daripada sistem PCR standard. Kaedah ini digunakan dalam beberapa kes:

  • disyaki bentuk tersembunyi hepatitis C;
  • Diagnostik PCR tidak mengesahkan patogen, tetapi terdapat antibodi;
  • dalam kes pemulihan;
  • untuk mengesan jangkitan awal.
Kembali ke jadual kandungan

Analisis penyahkodan

Penyahkodan PCR HCV mempengaruhi keputusan muktamad ketika membuat diagnosis, khususnya dengan metode ultrametod. Kelemahan utama kajian ini adalah mematuhi syarat steril untuk sampel dan bahan. Penyimpangan sedikit kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitis yang tidak tepat, merumitkan diagnosis dan rawatan berikutnya. Analisis PCR untuk menentukan RNA hepatitis tidak senantiasa menunjukkan gambar penyakit, kadang kala ketidakakurasian dibenarkan, dan di kedua-dua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disyorkan untuk menggunakan peperiksaan yang komprehensif.

Norma petunjuk

Ketiadaan antibodi JgM kepada hepatitis C virus dalam keputusan kajian dianggap sebagai norma dalam analisis reaksi rantai polimerase. Pada masa yang sama, penemuan analisis serologi menunjukkan kehadiran antibodi terhadap virus C dan ini juga berada dalam jarak normal. Takrif kualitatif tidak menunjukkan keamatan penyakit, ia hanya mendedahkan agen penyebab hepatitis C dalam RNA. Analisis ini diulangi selepas rawatan untuk mengesahkan pemulihan sebenar.

Penyimpangan

Jika antibodi JgM kepada RNA HCV hadir, ini menunjukkan jangkitan yang membina. Penyakit ini pada masa yang sama meneruskan akut atau kronik, diwujudkan dalam pelbagai peringkat. Jika penurunan jumlah antibodi direkodkan, analisis akan menunjukkan bahawa hasil rawatan dicapai semasa pemulihan. Terdapat kes-kes penemuan positif palsu dalam diagnosis. Mereka ditemui pada wanita semasa kehamilan dan pada orang dengan penyakit berjangkit lain.

Analisis PCR untuk Hepatitis C

Hepatitis C beralih dari akut kepada kronik dalam 80% kes. Replikasi virus patogen dalam sel hati berfungsi membawa kepada disfungsi organ. Ini disebabkan oleh hakikat bahawa tisu parenchymal digantikan dengan penyambung. Akibatnya, sejarah pesakit ditambah dengan pendarahan di saluran gastrointestinal, mabuk badan, masalah dengan pembekuan darah. Oleh itu, perubahan patologi yang terdahulu terdiagnosis, semakin besar peluang pesakit untuk pulih. Analisis PCR untuk hepatitis C dianggap kaedah penyelidikan yang paling tepat.

Kaedah diagnostik ini dibenarkan dijalankan beberapa hari selepas jangkitan. Tindak balas rantai polimer dapat menentukan genotip dan konsentrasi virus dalam darah. Untuk melakukan analisis, pesakit diambil bahan biologi di mana agen penyebab RNA boleh hadir.

PCR untuk hepatitis C dijalankan dalam tiga peringkat:

  • Analisis kualitatif - menggunakannya untuk menentukan bahan genetik patogen.
  • Penyelidikan kuantitatif - dengan itu mendedahkan viral load.
  • Genotyping - pada peringkat ini, doktor akan mengenali jenis penyakit.

Teknik ini dibangunkan kira-kira 30 tahun yang lalu. Ia digunakan untuk mendiagnosis banyak penyakit berjangkit. PCR membolehkan anda mengesan bahan genetik unik. Untuk melakukan ini, gunakan primer. Jadi dipanggil helai pendek RNA, yang dilampirkan pada permulaan gen.

Akibatnya, bilangan serpihan virus patogen didarabkan. Setiap fasa memerlukan rejim suhu khas dan tempoh masa tertentu. Molekul DNA terbentuk dalam masa 3 minit. Amplifikasi termasuk kira-kira 30 kitaran. PCR dilakukan di makmal melalui peralatan khas.

Petunjuk untuk pelantikan

Penyerahan analisis PCR mungkin disebabkan oleh gejala klinikal hepatitis C. Prosedur ini ditunjukkan untuk orang yang:

  • menghubungi orang yang dijangkiti;
  • menderita penyakit hati akut dan kronik;
  • dirawat untuk perubahan patologi dalam tisu parenkim;
  • berisiko;
  • adalah penderma darah dan komponennya.

PCR dijalankan bukan sahaja dengan hepatitis C. Analisis ini digunakan dalam bidang perubatan, biologi, forensik. Penentuan petunjuk khusus - tahap yang diperlukan untuk pemilihan skim ubat.

Faedah analisis

Dalam skema pemeriksaan diagnostik termasuk analisis immunofluorescence dan PCR. Menggunakan yang pertama, anda boleh menentukan kepekatan immunoglobulin. Bahan-bahan ini dihasilkan oleh mekanisme perlindungan selepas kemasukan virus patogen ke dalam tubuh. Berbeza dengan PCR, ELISA tidak berkesan semasa tempoh inkubasi. Dengan bantuan tindak balas rantai polimerase, hepatitis C boleh dikesan dalam 7 hari pertama selepas jangkitan.

Kajian klinikal ini mempunyai ciri-ciri berikut:

  • Kebarangkalian minimum hasil palsu.
  • Kecekapan tinggi.
  • Spesifikasi.
  • Kepekaan.
  • Ketepatan.
  • Automasi proses.
  • Keselamatan
  • Kadar mendapatkan indikator.

Satu-satunya kelemahan PCR adalah kerumitan teknikalnya. Hal ini disebabkan oleh fakta bahawa doktor perlu memilih komposisi nukleotida yang tepat, yang berfungsi sebagai sintesis DNA. Disebabkan peningkatan kepekaan kaedah, adalah mungkin untuk mendapatkan hasil palsu-palsu atau palsu-negatif.

Untuk mencapai ketepatan petunjuk penting, bahan biologi dibersihkan secara menyeluruh daripada ubat-ubatan dan sebatian protein. Untuk mengesahkan keputusan, perbandingan sampel yang diuji sebelum ini diperlukan. Faktor-faktor yang menimbulkan kesilapan termasuk:

Pelanggaran analisis teknik pensampelan

  • Pelanggaran teknik analisis.
  • Perubahan dalam urutan serpihan RNA.
  • Kebetulan nukleotida disintesis dan gen virus patogenik.

Kebarangkalian mendapatkan hasil palsu dalam hepatitis C hadir kerana tidak dapat menentukan dasar genetik penyakit. Diagnostik PCR boleh mengenal pasti patogen secara langsung. Menggunakan penguatan DNA, patogen dikesan dalam makanan, air dan tanah.

Batasan kaedah ini tidak mengurangkan keberkesanan dan popularitinya. Penyelidikan klinikal dijalankan secara berkala. Oleh itu, doktor boleh menilai keberkesanan langkah-langkah rawatan yang diambil. Keperluan untuk ini adalah kerana virus hepatitis C dapat bermutasi. Ketiadaan kesan positif bermakna penyesuaian virus kepada ubat-ubatan yang digunakan.

Penyediaan untuk penghantaran

Untuk melakukan tindak balas rantai polimer dalam pesakit yang menderita hepatitis C, darah vena diambil. Biasanya dua bahagian bahan biologi diperlukan untuk belajar. Melalui satu, PCR dilakukan secara langsung, dan yang lain dihantar untuk immunoassay.

Darah untuk analisis PCR diambil dari urat

Penyediaan adalah penting. Pesakit menderma darah untuk PCR pada waktu pagi dengan perut kosong. Beberapa hari sebelum prosedur itu perlu meninggalkan makanan, alkohol, nikotin dan dadah yang berbahaya. Pesakit harus mengelakkan hubungan seks, tekanan fizikal dan emosi yang berlebihan. Kolam renang dan pusat gim dilarang. Ia perlu untuk menyediakan dalam apa jua keadaan.

Terdapat petunjuk khusus mengenai ubat-ubatan perubatan. Ini terpakai untuk antibiotik dan antidepresan. Wanita yang telah menstruasi harus melambatkan ujian untuk hepatitis C. Colposcopy juga merupakan sebab untuk menolak prosedur.

Peraturan yang disenaraikan agak mudah. Terima kasih kepada mereka, anda boleh mencapai kebolehpercayaan maksimum kaedah diagnostik ini. Menyahsulit keputusan mesti pakar. Secara bebas menafsirkan mereka dalam pesakit tidak mungkin berjaya.

Proses analisis

Diagnostik PCR adalah seperti berikut:

Darah diletakkan dalam termostat.

  • Pertama, ambil bahan biologi. Darah diletakkan dalam alat yang disterilkan. Jumlah yang diperlukan tidak melebihi 1-1.5 ml. Pastikan darah dan komponennya tidak melebihi 24 jam. Suhu penyimpanan tidak boleh melebihi 4 darjah Celsius.
  • Selepas memulakan kajian klinikal. Darah yang disediakan diletakkan dalam termostat bersama dengan campuran amplifikasi. Biasanya tidak memerlukan lebih daripada 25 ml komposisi khas. Pengukuhan dijalankan secara automatik selama beberapa jam.
  • Secara selari, buat ujian kawalan. Untuk melakukan ini, gunakan bahan biologi yang diambil dari orang yang sihat. Ini akan membantu mengelakkan hasil palsu.
  • Pengekodan dan pendaftaran penunjuk. Bahan genetik dikesan menggunakan etida bromida. Oleh kerana kesan spesifik, serpihan DNA diserlahkan. Kewujudan (ketiadaan) virus ini didedahkan dengan memberi tumpuan kepada jadual-jadual ini.

Keputusan penyahkodan

Hanya pakar penyakit berjangkit dan pakar hepatologi boleh menentukan nilai penunjuk ini. Analisis PCR diberikan kompleks diagnostik bersama dengan ujian darah biokimia, ultrasound, ELISA dan biopsi. Diagnosis dibuat berdasarkan semua keputusan. Prosedur untuk menyahkodkan ujian bergantung pada peringkat pemeriksaan diagnostik.

Pada tahap pertama PCR, hasil ujian yang positif adalah pengesanan fragmen DNA virus patogenik. Apabila melakukan analisis kuantitatif menentukan tahap beban virus. Ia boleh rendah (kurang daripada 8 * 10 ^ 5 IU / ml), sederhana (dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml), tinggi (lebih daripada 2.4 * 10 ^ 7 IU / ml). Ketiadaan antibodi spesifik dan zarah RNA virus dianggap sebagai norma (hasil negatif). Di peringkat genotip, jangkitan dengan jangkitan ditunjukkan oleh RNA genotip tertentu.

Setelah menerima keputusan positif, pesakit ditetapkan rejimen terapeutik yang berkesan. Pada masa yang sama, maklumat mengenai kehadiran virus dalam darah, tahap aktiviti dan genotip mesti diambil kira. Harga prosedur bergantung pada kaedah ujian, jenis bahan biologi. Kos untuk mengambil darah atau cecair lain boleh ditambah kepada jumlah kos. Yang terakhir ini adalah kerana hakikat bahawa patogen sering dijumpai dalam air kencing, najis dan air mani.

PCR kuantitatif untuk hepatitis C

Virus hepatitis C dapat melipatgandakan sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Oleh kerana pelbagai mutasi, pertahanan imun badan semakin lemah, genotip dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan jenis yang tepat dan tepat pada masanya, keberkesanan terapi antiviral bergantung. Bahaya jangkitan adalah bahawa penyakit ini adalah asimtomatik. Hanya 15 peratus daripada 100 boleh mengalami loya dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Pengesanan virus Hepatitis C

Kadar standard hepatitis C dalam saiz 40 hingga 60 nm, dengan kebanyakan lipid, kerosakan hati yang disebabkan oleh penyakit akut atau kronik penyakit ini. Hepatitis C, iaitu, RNA virus keluarga Togaviridae, sangat tahan, disebarkan melalui pemindahan darah atau penggunaan barang tidak steril, bekalan kebersihan yang tidak betul, dan lain-lain. Analisis kuantitatif membolehkan anda memeriksa darah dan mengenal pasti struktur genetik virus yang dijangkiti.

Untuk hepatitis C dan genotipnya ditentukan, menjalankan analisis kuantitatif. Bergantung kepada penganalisis yang boleh menentukan tiga tahap kejadian virus RNA.

Subtipe boleh menghasilkan pelbagai modifikasi, jadi kekhususan dan kepekaan penganalisis mesti seratus peratus. Di samping mengesan penyakit itu dalam pesakit, perlu menentukan tahap keterukannya. Sesetengah makmal tidak mempunyai semua data mengenai penyahkodan virus RNA, terdapat kemungkinan tindak balas positif palsu.

Penyelidikan mengenai hepatitis C akan lebih tepat apabila mengkaji petunjuk ini:

ALAT, Asat; Perisai alkali; LDH.

Menarik perhatian kepada hasil penunjuk ini dan keadaan umum badan, hasilnya dipaparkan menunjukkan tahap jangkitan, bentuk, dan jumlah sel-sel hepatitis C dalam darah. Ini menyumbang kepada proses penyembuhan dan keberkesanan terapi antiviral.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Reaksi rantai multi-dimensi (PCR) memberi idea tentang bilangan zarah DNA dalam analisis pesakit yang diambil, dengan tepat mengenal pasti agen berjangkit.

Agen penyebab penyakit berjangkit boleh berlaku. Jangkitan hati, seperti hepatitis C, boleh dirawat pada masa kita apabila ia dikesan pada masa yang tepat. Jika virus disyaki, analisis PCR dilakukan.

Memandangkan sekian lama gejala virus dapat bertopeng, seseorang mungkin tidak merasakan permulaan penyakit ini. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh dalam 60-70% kes, hepatitis C dikesan, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis ini dijalankan dalam tempoh tertentu untuk menentukan peringkat penyakit dan menetapkan rawatan yang sesuai. Untuk melakukan tanpa itu, tanpa memohon semua prosedur ini, adalah mungkin, diberi vaksin terhadap hepatitis.

Analisis itu, termasuk diagnostik PCR, memberikan gambaran tentang penyakit ini, bagaimana virus itu aktif pada tempoh pembangunan yang berlainan.

Pertama, terdapat analisis kualitatif yang hanya mengesahkan hipotesis mengenai jangkitan, dan kemudian kuantitatif, menentukan beban pada hati. Pilihan yang ideal akan menjadi hasil negatif untuk hepatitis C dalam bahan genetik pesakit.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Terdapat analisis kualitatif dan kuantitatif. Intipati pertama ialah ia menentukan kehadiran jangkitan dalam darah. Dan ini bermakna virus menjangkiti sel-sel hati yang sihat. Apabila antibodi kepada hepatitis C ditemui dalam pesakit, ujian kualitatif dilakukan dengan segera. Kadar yang harus diberikan adalah "tidak dikesan dalam darah". Apabila menentukan kepekatan virus, ada keperluan untuk mengetahui kepekaan sistem diagnostik, kerana orang yang menjalani terapi antiviral boleh melakukan analisis. Tahap kepekaan penganalisis tidak boleh kurang daripada 50 IU / ml.

Apabila virus dikesan, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, beban virus, yang menentukan kepekatan virus dalam darah dan keparahan penyakit.

RNA virus, yang dalam jumlah tertentu darah, ditakrifkan sebagai norma pada kadar 1 ml setiap 1 sentimeter padu. Selepas mengukur beban virus, adalah mungkin untuk menilai tahap jangkitan persekitaran yang masih tidak dijangkiti. Sebaik sahaja kepekatan hepatitis C meningkat dalam darah, perlu untuk mengasingkan diri dari alam sekitar.

Adalah penting pada peringkat awal untuk mengesan tahap konsentrasi hepatitis, untuk menentukan kadar pemulihan. Sekiranya kadar hepatitis C melebihi melebihi 800 ribu IU / ml, ia dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan sehingga satu juta kritikal. Jika jarak kuantitatif kurang daripada 400 ribu IU / ml, dianggap jangkitan orang-orang di sekitar akan berkurangan. Angka ini menjelaskan bahawa hepatitis C hadir dalam tubuh dalam dos yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif zarah RNA virus, jadi ia dilantik semula beberapa kali untuk ketepatan diagnosis.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pesakit adalah mengenal pasti tahap jangkitan kepada orang lain.

Ujian hepatitis C

membolehkan anda menilai keberkesanan terapi antiviral, tahap infeksi dan jumlah tisu yang dijangkiti.

Adalah penting untuk mencegah perkembangan penyakit itu, mengambil langkah pencegahan tepat pada masanya, menetapkan rawatan yang betul berdasarkan diagnostik PCR. Jika menurut keputusan, paras viral load kurang daripada 400 ribu IU / ml, maka kepekatannya mungkin sedikit, yang menunjukkan pemulihan penuh mungkin. Norma untuk mendapatkan hasil positif ialah ketiadaan jangkitan.

Keputusan analisis PCR:

Jawapan positif bermakna jangkitan dalam bahan biologi. Analisis ini dapat menentukan bilangan sel yang dijangkiti. Jawapan negatif menunjukkan ketiadaan jangkitan, yang dicari dengan teliti di dalam badan.

Kaedah penentuan kuantitatif hepatitis C adalah tepat dan bermaklumat, yang dilakukan pada peralatan yang mempunyai kepekaan tinggi. Memutuskan hasil analisis membolehkan anda mengetahui sama ada jangkitan dan kekhususannya, untuk melihat bilangan terkecil sel yang terinfeksi pada penganalisis yang sangat sensitif.

Keputusan palsu atau bertentangan jarang diberikan oleh analisis, lebih kerap ini berlaku dalam kajian immunoassay.

Hepatitis C adalah salah satu yang paling berbahaya dan sukar untuk mendiagnosis penyakit virus. Untuk menentukan penyakit ini, kaedah PCR hepatitis C digunakan. Ini adalah teknik berteknologi tinggi baru yang membolehkan anda menyiasat bahan genetik untuk kewujudan kehidupan di zarah-zarah terkecil (molekul) dan kuantiti terkecil. Virus hepatitis sangat berterusan, ia boleh hidup di alam sekitar untuk jangka masa yang panjang dan mantap di dalam tubuh manusia.

Apakah PCR?

Hari ini terdapat sejumlah besar pelbagai penyakit. Dan bukannya kaedah yang lebih kecil untuk penentuan mereka. Oleh kerana agen-agen jangkitan telah belajar mengambil akar dalam alam sekitar dan berkembang dengan mudah, teknologi terkini digunakan untuk mendiagnosis mereka. Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah kaedah yang lebih cepat dan lebih tepat yang bertujuan untuk mencari agen penyebab penyakit dengan meningkatkan jumlah DNA virus hepatitis dalam sampel. Tentang dia sering menulis: mencari jarum dalam jerami, dan kemudian membina jarum jarum.

Jenis kaedah PCR

Ujian kualitatif akan membantu menentukan kehadiran virus hepatitis C di dalam badan.

Alokasikan analisis kualitatif dan kuantitatif terhadap hepatitis. Untuk menentukan sama ada virus itu ada di dalam badan, dan mereka yang telah menemui antibodi untuk hepatitis C, menjalankan ujian yang berkualiti tinggi. Analisis pengekodan memberikan hasil: "positif"; "Negatif." Makna negatif bermaksud: sama ada seseorang itu sihat atau tidak ada ejen yang cukup dalam darah dan mereka tidak dapat dijumpai. Oleh itu, patut dilakukan pemeriksaan semula selepas beberapa waktu.

Hasil positif menunjukkan adanya jangkitan. Ini hampir selalu nilai sebenar. Keputusan yang salah biasanya bergantung pada faktor manusia (penyimpanan tidak wajar atau ketidakpatuhan terhadap peraturan prosedur). Apabila kadarnya adalah, hasilnya adalah negatif. Sebelum ujian tidak ada peraturan khusus, hanya ambil darah dari urat.

Jika ditemui, lakukan analisis kuantitatif (viral load) - ia memberikan nilai berangka: berapa banyak RNA virus hepatitis pada masa ini dalam jumlah yang ditetapkan bahan dalam kajian. Dengan perkembangan jangkitan aktif, ia boleh dikesan pada 1-2 minggu pada orang yang dijangkiti. Darah juga biasanya diperiksa kerana agen beredar secara bebas di dalamnya.

Ciri-ciri analisis PCR kuantitatif

PCR kuantitatif akan membantu anda memilih rawatan yang paling berkesan untuk hepatitis C.

Perbezaan analisis kuantitatif adalah bahawa tidak semuanya berlalu. Kualitatif - menentukan kehadiran, dan kuantitatif - membantu dengan pengesahan kesimpulan "virus hepatitis", prognosis perjalanan penyakit dan menentukan perjalanan rawatan. Seberapa berkesan terapinya adalah dengan bilangan RNA sebelum dan semasa rawatan. Juga dengan bantuannya menentukan pelantikan dos ubat.

Sebagai peraturan, ia dihasilkan sebelum permulaan rawatan. Petunjuk utama boleh:

penentuan viral load dan kawalan terapi antiviral, PCR berkualiti tinggi yang menemui antibodi hepatitis C, mencari hepatitis C akut dan kronik, kewujudan hepatitis bercampur, ketika merencanakan rawatan, jika kajian kualitatif masih menemukan kehadiran penyakit itu setelah minggu ke-12 terapi.

Lihat juga, apa viral load dalam hepatitis: terapi rendah dilaksanakan dengan jayanya; meningkat - rawatan tidak berkesan dan perlu diubah.

Apakah yang dilakukan pada pelbagai peringkat penyakit ini?

Analisis ini akan membantu memantau keputusan terapi di semua peringkat rawatan.

Pada fasa-fasa yang berlainan penyakit ini, satu kajian dilakukan untuk mengkaji semula manfaat rawatan dan perancangan tempohnya. Dengan tindak balas yang baik terhadap terapi, ia dipendekkan. Jika tidak, dengan penarikan balik virus secara perlahan, rawatan itu berpanjangan. PCR untuk hepatitis melakukan terapi 1.4, 12, 24 minggu. Apabila penunjuk tidak jatuh selepas 12 minggu, mereka menyimpulkan bahawa terapi tidak sesuai untuk organisma ini. Analisis ini digunakan untuk menentukan sejauh mana jangkitannya dan sejauh mana ia mungkin untuk menghantarnya. Sebagai contoh, semasa hamil terdapat risiko untuk menjangkiti bayi. Selepas terapi, kenali risiko pengulangan penyakit ini.

Decryption

Selepas kajian ini, analisis dapat menguraikan tidak dalam angka, tetapi dengan kata-kata: "di bawah julat ukur" dan "tidak dikesan." PCR kuantitatif lebih peka terhadap kualitatif. Kesimpulan "tidak dapat dikesan" boleh mengatakan bahawa jangkitan tidak dijumpai. "Di bawah julat ukuran" - ujian itu tidak menemui virus, tetapi ia adalah dalam nilai yang kecil. Dalam keadaan ini, lakukan kajian kedua.

Beban virus adalah penentuan jumlah RNA berjangkit dalam jumlah darah yang ditetapkan (1 ml = 1 meter padu secara kuantitatif). Dirumuskan dalam pengukuran antarabangsa IU / ml. Makmal berasingan menyatakan salinan / ml. Sistem ujian yang berbeza dapat menguraikan terjemahan komponen menjadi nilai-nilai antarabangsa dengan cara mereka sendiri. Jadual 1. Menguraikan analisis kuantitatif RNA virus

Diagnosis hepatitis termasuk pelbagai ujian untuk menentukan kehadiran virus dalam darah. Satu cara untuk mengesan penyakit adalah kaedah penyelidikan seperti PCR untuk hepatitis C. Apakah itu, mengapa analisis PCR untuk hepatitis sama pentingnya dilakukan dan didekodkan?

Apa itu

Reaksi rantai polimerase, atau PCR, digunakan untuk mendiagnosis ulser gastrik, kolitis, enteritis. Tetapi kelebihan utamanya ialah ia membantu mengesan dalam badan kedua-dua virus hepatitis C dan antibodi kepadanya, yang mempunyai keupayaan untuk tidak menyebabkan reaksi sistem imun kerana kemampuan mereka untuk bermutasi.

Kajian dan intipatinya terletak pada penciptaan keadaan-keadaan tertentu di mana tindak balas rantai Hepatitis RNA berlaku. Jika, jika dibandingkan dengan urutan nukleotida virus hepatitis C, kebetulan dijumpai, ini menunjukkan bahawa ada zarah virus dalam darah, dan proses pemisahan berlaku di hati. Jika jumlah virus berada di bawah tahap tertentu, diagnosis negatif dibuat, dan jika lebih tinggi, yang positif.

Terdapat dua jenis ujian darah menggunakan kaedah PCR untuk hepatitis: analisis kuantitatif dan analisis kualitatif.

PCR kuantitatif, seperti yang dinyatakan di atas, menentukan kepekatan RNA virus hepatitis. Di samping itu, beliau dapat memberi maklumat tentang intensiti yang patologi berkembang, dan keberkesanan rawatan yang ditetapkan. Analisis kuantitatif hepatitis C sangat penting kerana ia memperbaiki rintangan terhadap tindakan ubat antivirus dan membolehkan anda menyesuaikan terapi.

Selepas pesakit menjalani rawatan, PCR membantu menentukan urutan pelantikan selanjutnya. Dalam beberapa kes, keperluan untuk tinjauan tambahan. Sebagai contoh, jika tahap ALP meningkat (tetapi tidak lebih daripada 2 kali dalam tempoh enam bulan), dan transkrip analisis menunjukkan beban virus di atas 105 IU / ml, pesakit ditetapkan sebagai biopsi. Jika analisis kuantitatif PCR mendedahkan keradangan yang teruk dan fibrosis, pesakit dirawat sebagai rawatan dengan ubat-ubatan antiviral.

Dalam keadaan di mana sejumlah besar zarah virus digabungkan dengan ALT yang tinggi, pesakit harus segera dirawat tanpa langkah diagnostik tambahan.

Ambil ujian ini dan ketahui jika anda mempunyai masalah hati.

Hanya pakar yang berkelayakan dan berpengalaman yang dapat menguraikan secara kualitatif dalam analisis kuantitatif darah untuk hepatitis, dan teknologi moden membantu melakukan ini dengan kepekatan rendah virus dalam darah.

Analisis kualitatif PCR bertujuan untuk menentukan dan mengesahkan kehadiran sebenar virus dalam tubuh. Ia dilakukan apabila antibodi untuk hepatitis dikesan dalam darah. Ia adalah analisis kualitatif mengenai hepatitis yang menjamin ketepatan hasilnya sebanyak 100% dan membolehkan anda membuat diagnosis pada peringkat awal penyakit, yang memungkinkan untuk memulakan perjuangan terhadap hepatitis yang sudah ada pada minggu pertama selepas jangkitan dan meningkatkan kemungkinan pemulihan lengkap (dalam kes penyakit jenis B).

Faedah PCR

Dalam kajian oleh PCR dan menguraikan ujian darah untuk hepatitis, anda juga boleh menentukan genotip patogen tersebut. Secara keseluruhan, terdapat 6 genotip virus dan sebilangan besar subtipe, bagaimanapun, di rantau kita, 1, 2 dan 3 genotip telah menjadi biasa.

Kelebihan lain dari diagnosis jenis ini adalah:

  • ketepatan tinggi penunjuk yang diperoleh dan kemungkinan kebarangkalian yang rendah di dalamnya;
  • tahap kepekaan yang tinggi terhadap zarah virus dalam darah;
  • kemungkinan mengenal pasti beberapa patogen sekaligus;
  • diagnosis mikroorganisma patogen intraselular dengan variasi antigenik tinggi;
  • bekerja dengan analisis penyahkodean untuk hepatitis membolehkan anda mengesan jangkitan semasa tersembunyi.

Siapa yang dilantik?

Kategori orang berikut harus lulus analisis PCR untuk hepatitis:

  • wanita hamil;
  • kakitangan penjagaan kesihatan;
  • penderma darah dan organ yang berpotensi;
  • mereka yang mempunyai ciri-ciri tanda penyakit;
  • Individu yang dijangkiti HIV;
  • penagih;
  • pekerja seks rambang.

Bagaimanakah analisa dijalankan dan adakah perlu untuk mempersiapkannya

Sampel darah untuk PCR dilakukan dari urat. Sebagai peraturan, ini berlaku pada waktu pagi sebelum orang itu dimakan, kerana selepas makan, sekurang-kurangnya 8 jam harus lulus. Dalam kes-kes yang teruk, darah boleh diambil untuk pemeriksaan pada waktu siang atau pada waktu petang, tetapi jurang masa antara analisis dan pengambilan makanan harus sekurang-kurangnya 5 jam.

Faktor manusia secara kuantitatif boleh menjejaskan keputusan: ketepatan mereka dalam beberapa kes berkurangan dari 100% hingga 95%, oleh itu, perlu untuk menyediakan derma darah terlebih dahulu. Kualiti biomaterial untuk analisis akan sesuai apabila pesakit mengikuti peraturan berikut:

  • sebelum menderma darah, anda hanya boleh minum air bersih;
  • dua hari sebelum kajian, adalah perlu untuk meninggalkan pengambilan makanan goreng dan lemak, serta minuman beralkohol;
  • satu hari sebelum lawatan ke makmal harus berhenti mengambil ubat. Jika ini tidak mungkin, adalah penting untuk memberitahu juruteknik makmal dan doktor yang hadir;
  • hari sebelum anda perlu mengelakkan situasi tekanan dan usaha fizikal;
  • ultrasound, pemeriksaan sinar-X dan ujian instrumental tidak boleh dilakukan sejurus sebelum derma darah;
  • selama sejam sebelum analisis, anda mesti menahan diri dari merokok;
  • 20 minit sebelum menderma darah, anda perlu terganggu, tenang dan bernafas.

Sekiranya seorang kanak-kanak berusia di bawah 5 tahun lulus kajian, ibu bapa mesti memastikan bahawa dia minum air rebus setiap 10 minit selama setengah jam sebelum mengambil biomaterial.

Dekripsi data yang diterima

Pengekodan analisis boleh diwakili oleh kata-kata (dalam hal kajian kualitatif), contohnya, "tidak dapat dikesan" atau "di bawah jangkauan perubahan" Dalam kes pertama, ini menunjukkan bahawa jangkitan tidak dikesan. Pada yang kedua - bahawa virus hadir, tetapi dalam kuantiti yang kecil. Keadaan ini memerlukan penyelidikan semula.

Beban virus ditentukan oleh jumlah RNA berjangkit dan dirujuk sebagai IU / ml atau salinan / ml.

Penunjuk normal (norma) analisis kuantitatif untuk hepatitis C adalah julat dari 1.8x102 hingga 2.4x107 IU / ml.

Kepekatan virus dalam darah boleh:

  • rendah: dari 600 IU / ml hingga 3x10 4 / ml;
  • sederhana: dari 3x10 4 IU / ml hingga 8x10 5 IU / ml;
  • tinggi: lebih daripada 8x10 5 IU / ml.

Analisis kuantitatif dan kualitatif PCR untuk hepatitis membolehkan untuk menentukan kehadiran virus dalam badan dan tahap kepekatannya. Reaksi rantai multi-dimensi mampu mendiagnosis penyakit ini pada peringkat awal, tetapi untuk ini, pesakit secepat mungkin beralih kepada institusi perubatan untuk mendapatkan bantuan dan tegas mengikuti saran-saran dari doktor yang hadir.

Virus hepatitis C dapat melipatgandakan sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Oleh kerana pelbagai mutasi, pertahanan imun badan semakin lemah, genotip dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan jenis yang tepat dan tepat pada masanya, keberkesanan terapi antiviral bergantung. Bahaya jangkitan adalah bahawa penyakit ini adalah asimtomatik. Hanya 15 peratus daripada 100 boleh mengalami loya dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Pengesanan virus Hepatitis C

Kadar standard hepatitis C dalam saiz 40 hingga 60 nm, dengan kebanyakan lipid, kerosakan hati yang disebabkan oleh penyakit akut atau kronik penyakit ini. Hepatitis C, iaitu, RNA virus keluarga Togaviridae, sangat tahan, disebarkan melalui pemindahan darah atau penggunaan barang tidak steril, bekalan kebersihan yang tidak betul, dan lain-lain. Analisis kuantitatif membolehkan anda memeriksa darah dan mengenal pasti struktur genetik virus yang dijangkiti.

Untuk hepatitis C dan genotipnya ditentukan, menjalankan analisis kuantitatif. Bergantung kepada penganalisis yang boleh menentukan tiga tahap kejadian virus RNA.

Subtipe boleh menghasilkan pelbagai modifikasi, jadi kekhususan dan kepekaan penganalisis mesti seratus peratus. Di samping mengesan penyakit itu dalam pesakit, perlu menentukan tahap keterukannya. Sesetengah makmal tidak mempunyai semua data mengenai penyahkodan virus RNA, terdapat kemungkinan tindak balas positif palsu.

Penyelidikan mengenai hepatitis C akan lebih tepat apabila mengkaji petunjuk ini:

Menarik perhatian kepada hasil penunjuk ini dan keadaan umum badan, hasilnya dipaparkan menunjukkan tahap jangkitan, bentuk, dan jumlah sel-sel hepatitis C dalam darah. Ini menyumbang kepada proses penyembuhan dan keberkesanan terapi antiviral.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Reaksi rantai multi-dimensi (PCR) memberi idea tentang bilangan zarah DNA dalam analisis pesakit yang diambil, dengan tepat mengenal pasti agen berjangkit.

Agen penyebab penyakit berjangkit boleh berlaku. Jangkitan hati, seperti hepatitis C, boleh dirawat pada masa kita apabila ia dikesan pada masa yang tepat. Jika virus disyaki, analisis PCR dilakukan.

Memandangkan sekian lama gejala virus dapat bertopeng, seseorang mungkin tidak merasakan permulaan penyakit ini. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh dalam 60-70% kes, hepatitis C dikesan, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis ini dijalankan dalam tempoh tertentu untuk menentukan peringkat penyakit dan menetapkan rawatan yang sesuai. Untuk melakukan tanpa itu, tanpa memohon semua prosedur ini, adalah mungkin, diberi vaksin terhadap hepatitis.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Terdapat analisis kualitatif dan kuantitatif. Intipati pertama ialah ia menentukan kehadiran jangkitan dalam darah. Dan ini bermakna virus menjangkiti sel-sel hati yang sihat. Apabila antibodi kepada hepatitis C ditemui dalam pesakit, ujian kualitatif dilakukan dengan segera. Kadar yang harus diberikan adalah "tidak dikesan dalam darah". Apabila menentukan kepekatan virus, ada keperluan untuk mengetahui kepekaan sistem diagnostik, kerana orang yang menjalani terapi antiviral boleh melakukan analisis. Tahap kepekaan penganalisis tidak boleh kurang daripada 50 IU / ml.

Apabila virus dikesan, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, beban virus, yang menentukan kepekatan virus dalam darah dan keparahan penyakit.

RNA virus, yang dalam jumlah tertentu darah, ditakrifkan sebagai norma pada kadar 1 ml setiap 1 sentimeter padu. Selepas mengukur beban virus, adalah mungkin untuk menilai tahap jangkitan persekitaran yang masih tidak dijangkiti. Sebaik sahaja kepekatan hepatitis C meningkat dalam darah, perlu untuk mengasingkan diri dari alam sekitar.

Adalah penting pada peringkat awal untuk mengesan tahap konsentrasi hepatitis, untuk menentukan kadar pemulihan. Sekiranya kadar hepatitis C melebihi melebihi 800 ribu IU / ml, ia dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan sehingga satu juta kritikal. Jika jarak kuantitatif kurang daripada 400 ribu IU / ml, dianggap jangkitan orang-orang di sekitar akan berkurangan. Angka ini menjelaskan bahawa hepatitis C hadir dalam tubuh dalam dos yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif zarah RNA virus, jadi ia dilantik semula beberapa kali untuk ketepatan diagnosis.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pesakit adalah mengenal pasti tahap jangkitan kepada orang lain.

Keputusan analisis PCR:

  1. Jawapan positif bermakna jangkitan dalam bahan biologi. Analisis ini dapat menentukan bilangan sel yang dijangkiti.
  2. Jawapan negatif menunjukkan ketiadaan jangkitan, yang dicari dengan teliti di dalam badan.

Kaedah penentuan kuantitatif hepatitis C adalah tepat dan bermaklumat, yang dilakukan pada peralatan yang mempunyai kepekaan tinggi. Memutuskan hasil analisis membolehkan anda mengetahui sama ada jangkitan dan kekhususannya, untuk melihat bilangan terkecil sel yang terinfeksi pada penganalisis yang sangat sensitif.

Keputusan palsu atau bertentangan jarang diberikan oleh analisis, lebih kerap ini berlaku dalam kajian immunoassay.

Virus Hepatitis C adalah virus yang mengandungi molekul RNA. Dia mampu mengelakkan tindak balas imun tubuh kerana kemampuannya bermutasi tinggi. Terdapat enam genotip utama virus dan banyak subtipe. Di rantau kita, genotip 1, 2 dan 3 kebanyakannya diedarkan.

Dalam 75-80%, penyakit menjadi kronik, yang menyebabkan fibrosis hati, suatu keadaan di mana tisu hati digantikan oleh tisu penghubung. Fibrosis, seterusnya, membawa kepada kanser atau sirosis. Cara utama penyebaran penyakit adalah melalui darah. Jika seseorang mempunyai petunjuk untuk ujian untuk hepatitis C, dia akan diberi dua ujian asas. Antibodi kepada virus ditentukan, dan jika tidak ada, ia percaya bahawa dia tidak mempunyai hepatitis. Jika kehadiran antibodi kepada virus hepatitis dikesan dalam darah, analisis PCR dilakukan.

RNA oleh kaedah ini ditentukan dalam darah dalam tempoh 10-12 hari selepas jangkitan dan menunjukkan bahawa virus itu secara aktif mereplikasi dalam badan. Dalam tempoh ini, adalah mustahil untuk mengesan virus dengan cara yang lain, kerana ia masih tidak menghasilkan antibodi tertentu dan kerosakan hati tidak dapat dilihat dengan ujian biokimia dan biopsi.

Pelbagai kajian PCR

Analisis reaksi rantai polimerase mempunyai kelebihan tertentu:

  1. Dalam kajian ini, virus itu sendiri ditentukan, dan bukan produk metaboliknya. Dalam kes ini, adalah mungkin untuk menentukan jenis patogen.
  2. Teknik ini mempunyai kekhususan yang tinggi kerana fakta bahawa hanya seksyen DNA tertentu yang sedang dikaji, kebarangkalian keputusan yang salah akan berkurangan.
  3. Ia mempunyai sensitiviti yang sangat tinggi, bahkan ditentukan jumlah minimum virus dalam darah.

Terdapat dua kaedah utama untuk menguji darah untuk hepatitis C menggunakan PCR: analisis kualitatif dan kuantitatif PCR. Kaedah kualitatif digunakan untuk menentukan sama ada virus hadir. Sesiapa yang mempunyai antibodi untuk hepatitis telah dikesan dalam darah, analisis seperti itu dijalankan. Hasilnya hanya boleh terdiri dari dua jenis: "dikesan" dan "tidak dikesan", nilai terakhir dianggap sebagai norma.

Hasil ujian yang positif bermaksud bahawa serpihan RNA virus dijumpai dalam sampel, yang, pada gilirannya, menunjukkan bahawa orang itu dijangkiti hepatitis. Dalam kes keputusan negatif, dua pilihan adalah mungkin: tiada jangkitan atau kepekatannya begitu rendah sehingga tidak dapat dikesan oleh teknik ini.

Kaedah kuantitatif berbeza daripada bahan penyelidikan, dalam tugas dan petunjuknya. Tidak semua pesakit dengan hepatitis menjalani analisis sedemikian. Dia, seperti yang lain, mempunyai matlamat tertentu. Penentuan beban virus atau analisis kuantitatif PCR untuk RNA virus digunakan:

  • untuk penentuan RNA virus dalam darah dan diagnosis "hepatitis virus";
  • untuk meramalkan kronik hepatitis dan perjalanan penyakit;
  • untuk memantau rawatan antiviral dan memutuskan sambungan, pengurangan atau perubahan dalam taktik rawatan.

Kajian ini dilakukan dengan adanya tanda-tanda seperti berikut:

  • Hepatitis C dikesan oleh kajian kualitatif dan antibodi dikesan dalam darah;
  • dengan hepatitis bercampur;
  • jika terapi antiviral dirancang;
  • semasa dan selepas rawatan untuk hepatitis C;
  • dengan kehadiran hepatitis C. kronik dan akut

Ujian ini dijalankan untuk menganggarkan bilangan unit virus dalam jumlah darah contoh 1 cm³ atau 1 ml. Keputusan diberikan dalam nombor. Petunjuk yang digunakan: IU / ml, yang bermaksud unit antarabangsa setiap mililiter dan salinan per ml, bilangan salinan RNA dalam 1 ml sampel. Semakin tinggi penunjuk kuantitatif analisis, semakin besar kemungkinan penyebaran virus itu ke orang lain.

R-DNA adalah kaedah DNA bercabang. Kaedah yang lebih mudah dan murah. Digunakan untuk lebih banyak sampel, mempunyai kepekaan yang rendah, dari 500 IU / ml. Dengan kepekaan sedemikian, ada peluang untuk tidak mengenal pasti virus itu, walaupun ia ada dalam darah.

TMA adalah kaedah penguatan transkripsi. Teknik ini mengesan asid nukleik dalam darah. Ia mempunyai kos rendah dan kepekaan yang tinggi, dari 5-10 IU / ml. Teknik yang agak baru yang membolehkan anda mempercepat dan mengurangkan kos proses ujian.

Hasil analisis kuantitatif definisi virus RNA, yang disampaikan oleh makmal, ditafsirkan sebagai berikut:

Mengendalikan analisis PCR untuk hepatitis C dan penyahkodan keputusan

Analisis PCR Hepatitis C adalah kajian yang tujuan utamanya adalah mengenal pasti bahan genetik agen penyebab. Analisis mendedahkan agen penyebab penyakit ini dengan menggunakan tindak balas rantai polimerase. Diagnosis ini mempunyai ketepatan yang tinggi, kekhususan untuk mengesan ketiadaan atau kehadiran jangkitan virus.

Intipati diagnosis

Untuk menjalankan analisis PCR untuk menentukan virus hepatitis C dari pesakit, darah vena diambil, yang berpotensi mengandungi HCV RNA (asid ribonukleat) virus yang dikehendaki.

Ujian PCR untuk Hepatitis C membayangkan prosedur untuk menambah zarah darah pesakit:

  • primer (kawasan sintetik pendek sintetik gen yang diperlukan);
  • enzim khas (polimerase RNA).

Selepas pensampelan, bahan biologi dihantar untuk penyelidikan ke makmal. Satu bahagian darah diperlukan untuk analisis PCR langsung, yang kedua dihantar untuk ujian oleh ELISA. Enzim mampu dalam masa yang singkat untuk meningkatkan jumlah bahan genetik virus patogen tersebut. Dalam alat khas, beberapa kitaran haba dan proses penyejukan dijalankan. Pada peringkat akhir, bahan yang diperolehi dibandingkan dengan gen virus dan kesimpulan dibuat tentang kehadiran atau ketiadaan patologi dalam tubuh pesakit.

Intipati dan menjalankan analisis PCR di makmal. Dilakonkan oleh SiberianMedicalLaboratory.

Jenis penyelidikan

Terdapat 3 jenis diagnostik, yang memungkinkan untuk menentukan kehadiran virus hepatitis C dalam tubuh manusia:

  • genotyping;
  • kualiti;
  • kuantitatif.

Kaedah kualitatif

Diagnosis hepatitis C dengan kaedah kualitatif boleh digunakan untuk pesakit di mana antibodi terhadap virus dikesan dalam ujian darah. Dalam kes kehadiran fasa akut RNA HCV, langkah diagnostik sedemikian boleh menentukan kehadiran penyakit itu dalam masa 1-2 minggu selepas jangkitan. Dalam tempoh ini, antibodi untuk hepatitis C mungkin belum dikembangkan.

Kaedah kuantitatif

Kaedah diagnostik kuantitatif digunakan untuk menentukan kepekatan virus dalam sampel darah. Ujian sedemikian untuk viremia (tahap kepekatan) menjadikannya mungkin untuk menentukan bilangan unit RNA virus secara tepat. Hasil akhir dinyatakan dalam jumlah yang sama. Jika kita bercakap mengenai analisis kuantitatif, maka penunjuk diukur dalam 1 ml (1 cub. Cm).

Parameter beban virus bermaksud tahap penyakit menular, iaitu, ia mencerminkan tahap "penularan" pesakit. Dalam praktiknya, ini bermakna bahawa semakin tinggi kepekatan virus dalam darah, semakin besar peluang untuk pesakit menginfeksi orang lain dengan hepatitis C. Kaedah penyelidikan kuantitatif juga membolehkan anda untuk membuktikan kualiti dan keberkesanan rawatan.

Genotyping

Genotyping mendedahkan mutasi agen penyebab penyakit ini. Sebelum menetapkan pelan rawatan, genotip virus ditentukan: kualiti dan tempoh terapi bergantung kepadanya. Sebagai contoh, dalam rawatan jenis penyakit I, kecekapan adalah 60%, dalam kes II, III-jenis - kira-kira 80%.

Manfaat Analisis PCR Hepatitis

Antara kelebihan utama prosedur ialah:

  1. Kemungkinan diagnosis awal. Analisis PCR dapat mengesan kehadiran virus pada peringkat awal jangkitan.
  2. Hasil ralat rendah. Sumber biologi yang dikaji membolehkan anda mendiagnosis seksyen bahan genetik yang merupakan ciri hanya satu jenis jangkitan virus. Keadaan ini membolehkan untuk mengelakkan keputusan diagnostik palsu.
  3. Tahap kepekaan tinggi. Analisis PCR dapat mengesan RNA virus dalam kuantiti yang kecil, yang juga memungkinkan untuk menjejaki jangkitan laten pada waktunya.

Petunjuk untuk

Ujian untuk PCR untuk hepatitis C adalah perlu, jika ada:

  • mempunyai hubungan dengan orang yang sakit, yang boleh menyebabkan jangkitan;
  • gejala sirosis hati (pembesaran limpa, perubahan tidak normal dalam saiz hati, pengesanan plexus vena pada abdomen di bawah kulit);
  • keputusan positif ELISA;
  • peningkatan aktiviti AST dan ALT (ditunjukkan dalam analisis biokimia darah);
  • keperluan untuk mengawal kelakuan terapi antiviral;
  • peringkat awal rawatan untuk keperluan untuk menubuhkan viral load;
  • menjalankan peringkat akhir terapi untuk mengecualikan kemungkinan pengulangan;
  • pesakit mempunyai hepatitis B untuk menolak pembangunan kerosakan hati yang bercampur.

Bagaimana untuk menyediakan derma darah untuk penyelidikan PCR

Persediaan untuk analisis PCR merangkumi cadangan berikut:

  • darah diambil pada waktu pagi;
  • analisis dilakukan pada perut kosong, jadi disarankan untuk berehat antara pengambilan makanan terakhir 8-10 jam;
  • beberapa hari sebelum diagnosis harus dikecualikan makanan berlemak, pedas dan goreng, minuman beralkohol dan merokok;
  • satu hari sebelum analisis seseorang harus menahan diri daripada melakukan senaman berat, tidak termasuk kelas di gym atau kolam renang.

Hasil analisis: norma dan penyimpangan

Analisis itu sendiri bukanlah jangka panjang, dan ahli hepatologi pakar yang berkelayakan atau pakar penyakit berjangkit menyuraikan keputusan PCR untuk hepatitis C. Berdasarkan keputusan analisis, pesakit didiagnosis.

Untuk menguraikan hasil kaji selidik dengan betul, mereka mengambil kira penunjuk:

  • analisis biokimia darah;
  • data ultrasound;
  • hasil biopsi.

Tafsiran analisis kuantitatif

Apabila memperoleh keputusan analisis kuantitatif PCR, petunjuk berikut akan diambil kira:

Kos pengujian darah dan PCR untuk hepatitis C

Hepatitis C adalah patologi radang di mana sel-sel hati terjejas. Penyakit ini berkembang akibat penembusan virus hepatitis C (HVC) ke dalam tubuh manusia.

Bentuk penyakit ini boleh menjadi akut atau kronik.

Selalunya, gejala-gejala patologi akut pada kebanyakan pesakit tidak hadir, kadang-kadang penyakit ini disertai oleh sensasi yang menyakitkan di perut, penurunan prestasi, keletihan yang meningkat, kehilangan selera makan, warna gelap urin, perubahan warna kotoran, kesedihan kulit dan membran mukus, sakit sendi. Gejala seperti biasanya berlaku 6-8 minggu selepas jangkitan, tetapi mungkin muncul selepas enam bulan.

Dengan perkembangan fenomena tersebut, adalah perlu untuk menghubungi institusi perubatan dan menjalani pemeriksaan komprehensif terhadap keseluruhan organisma. Sebagai sebahagian daripada peperiksaan perubatan, ujian darah untuk hepatitis C dilakukan.

Hari ini, dengan bantuan teknik diagnostik moden, patologi ini dapat dikenalpasti pada peringkat awal perkembangan, yang dengan ketara meningkatkan peluang penyembuhan penyakit yang lengkap.

Kumpulan berikut ini dikehendaki menguji hepatitis C:

  • wanita dalam tempoh membawa kanak-kanak;
  • orang yang mempunyai tanda-tanda hepatitis;
  • kakitangan perubatan;
  • penderma organ dan penderma yang berpotensi;
  • penagih dadah, orang yang dijangkiti HIV, kehidupan intim yang rancak.

Senarai kajian yang diperlukan

Apakah ujian yang perlu saya ambil untuk hepatitis C? Untuk mendiagnosis penyakit dengan tepat, mengenal pasti punca-punca dan menentukan keadaan parenchyma hati, kajian-kajian berikut diperlukan:

  • ujian air kencing umum dan darah;
  • analisis biokimia darah;
  • Analisis PCR;
  • ujian darah untuk pengesanan antibodi kepada HVC;
  • ujian darah untuk antibodi yang ada ke sel hati sendiri;
  • biopsi hati.

Memecahkan ujian darah untuk hepatitis C dilakukan oleh pakar. Pertimbangkan setiap kaedah penyelidikan dengan lebih terperinci, dan kami akan fahami analisa hepatitis C yang paling tepat.

Analisis am

Apabila melakukan pengiraan darah lengkap untuk hepatitis C, anda boleh menilai keadaan pesakit. Perubahan dalam parameter darah tidak dianggap sebagai simptom spesifik hepatitis, bagaimanapun, dengan penyakit ini, terdapat gangguan seperti:

  • kepekatan hemoglobin, platelet dan leukosit berkurangan;
  • meningkatkan kandungan limfosit;
  • pembekuan darah dilanggar;
  • kadar pemendapan erythrocyte (ESR) meningkat.

Analisis umum air kencing memungkinkan untuk mengesan dalam komposisi urobelin - pigmen hempedu yang berlaku di dalam air kencing akibat daripada gangguan fungsi hati.

Analisis biokimia

Analisis biokimia darah dalam hepatitis C memungkinkan untuk mengenal pasti gangguan seperti:

  • tahap enzim hati yang meningkat (alanine transaminase - ALT dan aspartate aminotransferase - AST), yang memasuki darah apabila hepatosit rosak. Dalam keadaan normal, penunjuk ini untuk lelaki tidak boleh melebihi 37 IU / l, untuk wanita - tidak lebih tinggi daripada 31 IU / l. Peningkatan kepekatan ALT dan AST dalam hepatitis C tanpa gejala sering merupakan satu-satunya gejala penyakit ini. Di samping itu, glutamil transpeptidase alkali fosfatase meningkat (biasanya tidak melebihi 150 IU / l).
  • Kandungan bilirubin (kedua umum dan langsung) dalam darah melebihi. Sekiranya pigmen kuning dalam serum melebihi 27-34 μmol / l, penyakit kuning berlaku (sehingga 80 μmol / l dalam bentuk ringan, 86-169 μmol / l dalam keadaan yang agak teruk, di atas 170 μmol / l dalam bentuk yang teruk).
  • Tahap albumin diturunkan, kepekatan gamma globulin, sebaliknya, meningkat. Gamma globulins terdiri daripada imunoglobulin - antibodi yang melindungi tubuh daripada bahan penyebab penyakit.
  • peningkatan kepekatan trigliserida dalam darah.

Ujian PCR

Menggunakan teknik PCR, ada kemungkinan untuk mendiagnosis agen penyebab penyakit ini. Melakukan analisis ini memungkinkan untuk mengesan virus dalam darah, walaupun jumlahnya adalah minima. Analisis PCR untuk hepatitis C memungkinkan untuk menentukan jangkitan sedia ada dalam darah yang sudah selepas 5 hari dari saat jangkitan, iaitu sebelum lama muncul antibodi.

Sekiranya hasil ujian darah untuk hepatitis C oleh PCR adalah positif, ini menunjukkan adanya jangkitan aktif dalam tubuh. Dengan menggunakan kaedah ini, anda boleh menjalankan kajian kualitatif dan kuantitatif RNA HVC.

Semasa analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C, adalah mungkin untuk mengesan virus yang sedia ada di dalam tubuh manusia.

Prosedur diagnostik ini dilakukan jika anti-HVC dikesan dalam darah.

Memecahkan analisis untuk hepatitis C mengandungi maklumat bahawa jangkitan telah dikesan atau tidak dikesan di dalam badan. Biasanya, tiada bahan patologi yang terdapat di dalam darah.

Sekiranya ujian hepatitis C itu positif, itu bermakna patogen terus membahagikan dan menjangkiti sel-sel hati.

Keputusan analisis ini mungkin tidak boleh dipercayai, adalah mungkin dalam kes berikut:

  • bahan biologi tercemar yang digunakan;
  • di hadapan heparin dalam darah;
  • dengan kehadiran bahan kimia atau protein (perencat) dalam biomaterial yang dikaji, yang mempengaruhi unsur-unsur PCR.

Analisis kuantitatif hepatitis C memberikan maklumat mengenai jumlah virus yang terkandung di dalam darah, iaitu, menentukan viral load. Oleh konsep ini bermakna jumlah RNA HVC hadir dalam darah (contohnya, dalam 1 ml). Dalam tafsiran analisis kuantitatif hepatitis C, nilai ini dinyatakan dalam kesamaan digital, diukur dalam IU / ml.

Darah untuk PCR untuk hepatitis C diambil sebelum langkah terapeutik. Selepas analisis dilakukan pada 1, 4, 12 dan 24 minggu. Kajian pada minggu 12 adalah menunjukkan dan sedang dijalankan untuk menilai keberkesanan prosedur terapeutik.

Jika ujian untuk hepatitis C semasa kehamilan adalah positif dan nilai-nilai beban virus melebihi, risiko penghantaran patogen dari ibu yang sakit kepada kanak-kanak itu meningkat beberapa kali. Selain itu, dengan beban virus yang tinggi, pelaksanaan langkah-langkah terapeutik adalah sukar.

Menurut transkrip ujian untuk hepatitis C, jika nilai viral load melebihi 800,000 IU / ml, maka itu tinggi. Sekiranya angka di bawah 400,000 IU / ml, paras viral load dianggap rendah.

Analisis hepatitis C oleh PCR dianggap paling tepat dan mempunyai beberapa kelebihan terhadap pilihan penyelidikan lain, iaitu:

  • diagnosis langsung dari agen penyebab penyakit ini. Apabila melakukan kajian tradisional ditentukan oleh kehadiran penanda protein yang merupakan produk sisa patogen. Ini hanya menunjukkan bahawa jangkitan ada di dalam darah. Apabila ujian untuk hepatitis C oleh PCR, adalah mungkin untuk menentukan jenis patogen patologi berbahaya.
  • kekhususan teknik. Semasa prosedur ini, rantau DNA unik ditentukan dalam biomaterial yang sesuai dengan hanya satu jenis patogen. Ini mengurangkan kemungkinan hasil palsu.
  • kepekaan yang tinggi. Apabila melakukan analisis PCR, anda dapat mengesan jumlah minimum virus. Ini penting jika bahan-bahan patogen yang kondusif dikenal pasti yang menimbulkan ancaman hanya jika tahap mereka meningkat.
  • Apabila menggunakan teknik ini dalam satu sampel biomaterial, beberapa patogen boleh dikesan sekaligus.
  • boleh mengesan jangkitan tersembunyi. Di samping itu, analisis ini membolehkan anda untuk mendiagnosis mikroorganisma patogen yang hidup di dalam sel dan mempunyai variasi antigen yang tinggi.

Sekiranya keputusan ujian positif, maka jejak virus dijumpai dalam biomaterial, maka rangkaian itu mempunyai jangkitan di dalam badan.

Analisis PCR negatif untuk hepatitis C bermakna tiada jejak jangkitan dalam biomaterial.

Kajian imunologi

Kaedah ini membolehkan anda mengenal pasti antibodi untuk semua jenis virus hepatitis, serta antibodi ke sel hati badan anda sendiri, rupa yang menyumbang kepada pembangunan hepatitis autoimun.

Hasil yang diperolehi semasa kajian ini adalah berkaitan selama 3 bulan, maka anda perlu menderma darah untuk hepatitis C.

Ia juga mungkin untuk melakukan kajian ekspres menggunakan jalur ujian khas. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan antibodi kepada virus C dalam komposisi darah dan air liur. Prosedur ini boleh dijalankan secara bebas, di rumah.

Biopsi hati

Untuk melakukan analisis ini, satu unsur parenkim hati diambil dan pemeriksaan histologi biomaterial yang diperoleh dilakukan. Ini membolehkan anda menilai keadaan badan: untuk mengenal pasti keradangan, rahim nekrotik, peringkat fibrosis dan sebagainya.

Hari ini, ujian yang menggantikan analisis histologi parenchyma hepatik digunakan.

Untuk menilai tahap kerosakan hati dan intensiti proses keradangan, biomarker darah vena tertentu digunakan. Menggunakan Fibrotest, anda boleh menganggarkan tahap pertumbuhan tisu berserabut.

Apabila melakukan Actitest, anda boleh mendapatkan maklumat mengenai intensiti proses patologi dalam parenchyma hati. Menggunakan Steatototesta boleh mendiagnosis tisu lemak hati dan menilai tahap proses ini. Fibromax terdiri daripada semua ujian di atas dan mungkin termasuk beberapa kajian lain.

Persediaan untuk kajian ini

Ujian apa yang diambil untuk hepatitis C dan bagaimana kita mengetahui jenis atau jenis penyelidikan ini. Sama pentingnya untuk mengetahui bagaimana untuk menyediakan analisis.

Untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai, adalah disyorkan untuk mematuhi keperluan berikut:

  • Ujian hepatitis C mesti diambil pada waktu pagi, dengan perut kosong. Makanan masa lalu harus dimakan sekurang-kurangnya 8 jam sebelum kajian.
  • Bahan biomas boleh dikumpulkan pada waktu siang atau petang. Dalam kes ini, adalah penting bahawa sekurang-kurangnya 5-6 jam lulus antara makanan terakhir dan analisis.
  • sebelum menderma darah untuk hepatitis C, teh, kopi, jus atau minuman lain harus dibuang, hanya air yang dibenarkan.
  • 48 jam sebelum kajian, adalah perlu untuk mengecualikan penggunaan lemak, makanan goreng dan minuman yang mengandungi alkohol.
  • sekurang-kurangnya sejam sebelum analisis, anda mesti menahan diri dari merokok.
  • analisis tidak boleh dilakukan dengan segera selepas ultrasound, instrumen, pemeriksaan sinar-X, sesi urut atau fisioterapi.
  • satu hari sebelum pelaksanaan kajian itu, ia dikehendaki mengecualikan penggunaan dadah dan aktiviti fizikal yang intensif. Tekanan emosi juga kontraindikasi.
  • Adalah disyorkan untuk menghabiskan masa 15 minit sebelum melakukan kajian dalam keadaan tenang.

Menjalankan prosedur pengumpulan darah

Di mana untuk mendapatkan ujian untuk hepatitis C? Bahan biologi diambil untuk penyiasatan lanjut di makmal institusi perubatan atau di rumah pesakit.

Darah dari urat diambil seperti berikut:

  • menggunakan tourniquet khas yang dibalut di lengan bawah pesakit, aliran darah vena dihentikan. Terima kasih kepada manipulasi seperti itu, urat darah akan diisi dengan darah dan akan lebih kelihatan, yang akan memudahkan proses memasukkan jarum.
  • kawasan kulit di mana jarum akan dimasukkan dengan berhati-hati dengan alkohol atau alkohol yang mengandungi cecair.
  • Jarum perlahan dimasukkan ke dalam urat, maka tiub ujian dilampirkan padanya, yang direka khusus untuk mengumpul darah.
  • Sejurus selepas jarum dimasukkan ke dalam vena, abah-abah memerah dikeluarkan dari lengan pesakit.
  • selepas jumlah darah yang diperlukan untuk analisis dikumpulkan, jarum dikeluarkan dengan perlahan daripada vena.
  • Pad kapas kapas atau kain kasa steril yang dibasahkan dengan alkohol mestilah digunakan di tapak suntikan.
  • untuk mencegah terjadinya hematoma, tampon perlu ditekan dengan beberapa usaha menentang kawasan memasukkan jarum, bengkokkan lengan pada sendi siku dan tahan di kedudukan ini selama beberapa minit. Tindakan sedemikian juga membantu menghentikan darah lebih cepat.

Dengan syarat bahawa teknik pentadbiran dalaman adalah baik, prosedur ini benar-benar selamat dan tidak menyebabkan sensasi yang menyakitkan.

Dalam kes yang jarang berlaku, selepas pengumpulan darah, urat mungkin membengkak. Fenomena ini dipanggil "phlebitis." Memampatkan (tidak panas) akan membantu menyelesaikan masalah, ia perlu digunakan untuk membengkak kawasan kulit beberapa kali sehari.

Masalah tertentu juga mungkin berlaku jika terdapat gangguan pendarahan. Mengambil aspirin, warfarin dan penipisan darah lain boleh menyebabkan pendarahan. Itulah sebabnya sebelum melakukan analisis itu diperlukan untuk menolak mengambil ubat. Jika rawatan tidak dapat dibatalkan, anda harus memaklumkan kepada pakar.

Tarikh dan harga

Berapa banyak yang diuji untuk hepatitis C? Hasil tes darah untuk hepatitis dapat siap dalam beberapa jam, dan dalam beberapa hari (biasanya tidak lebih dari 8 hari). Tempoh penyediaan keputusan bergantung kepada jenis virus dan kaedah analisis yang dipilih. Lebih cepat adalah kajian yang dijalankan oleh kaedah PCR. Keputusan dalam kes ini akan siap dalam beberapa jam saja.

Berapakah kos ujian hepatitis C? Bergantung pada klinik dan kerumitan kajian, harga prosedur boleh berubah dari 400 hingga 11,000 rubel.

Anda perlu sedar bahawa ia mungkin mengambil masa beberapa minggu untuk membentuk jumlah antibodi yang mencukupi untuk HVC. Oleh itu, pada peringkat awal dalam perkembangan patologi, hasil kajian boleh menjadi negatif palsu.

Di samping itu, mendapatkan data yang tidak boleh dipercayai adalah mungkin dengan analisis kualiti yang kurang baik dan pelanggaran syarat-syarat pengangkutan biomaterial yang diperolehi (sampel mesti dihantar ke makmal maksimum 2 jam selepas sampel darah).

Sekiranya hasil kajian adalah positif, anda perlu segera menghubungi doktor penyakit berjangkit. Pakar akan menjalankan pemeriksaan tambahan dan menetapkan rawatan yang sesuai.