Analisis kualitatif untuk hepatitis C

8 Mac, 2017, 12:29 Artikel ahli: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10,547

Analisis kualitatif tindak balas rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam badan. Dalam keadaan makmal, struktur RNA diselidiki, yang akan merangkumi virus. Dalam kes pengesanan virus C, perlu menjalani rawatan, kerana keadaan hati yang terabaikan akan menyebabkan akibat yang teruk. PCR berkualiti tinggi dilakukan selepas pemulihan untuk mengesahkan ketiadaan antibodi. Dilantik dan untuk pemeriksaan rutin. Dengan kepekatan rendah agen penyebab dalam darah, PCR (kualitatif) tidak dapat mengesan apa-apa, kerana sistem diagnostik mempunyai ambang kepekaan sendiri. Dalam kes peringkat awal penyakit atau bentuk ringan, PCR dilakukan oleh ultradiagnostics pada peralatan ultra-sensitif.

Apakah virus RNA?

Istilah RNA virus hepatitis C (atau RNA virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C mengikat ke sel tubuh yang sihat dengan menembusi ke dalam. Lama kelamaan, tersebar di seluruh badan, hanya perlu masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen itu menembusi hati, bersatu dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hepatik (hepatosit) berfungsi di bawah pengaruhnya, menjalani perubahan, dan dari ini mereka mati. Semakin lama virus C berada di hati, semakin banyak jumlah sel mati. Lama kelamaan, penyakit berbahaya berkembang, membawa kepada kemerosotan ganas dan kematian.

Jangkitan hati dengan jenis virus ini mungkin tidak nyata secara luaran. Selama bertahun-tahun atau beberapa dekad, orang yang dijangkiti terasa sihat, dan hanya pemeriksaan rawak yang paling sering mendedahkan patologi. Apabila menderma darah untuk hepatitis, sebahagian daripada rantaian RNA (ribonucleic acid), yang merupakan sebahagian daripada gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil ujian makmal tidak boleh digunakan untuk perawatan diri, karena ini hanya penunjuk. Gambaran yang tepat dan diagnosis lanjut adalah lebih baik ditentukan oleh doktor.

Apabila selesai: petunjuk untuk penyelidikan

Dalam pengesahan HCV, analisis PCR dilakukan (tindak balas rantai polimerase). Kajian PCR membantu mencari agen penyebab dalam struktur RNA dan menetapkan terapi yang berkesan. Dilantik dalam kes berikut:

• pengesanan tanda-tanda keradangan hati;
• kajian skrining untuk pencegahan;
• pemeriksaan orang yang dihubungi;
• diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
• menentukan tahap aktiviti pembiakan virus dalam bentuk kronik;
• sirosis hati;
• untuk menentukan keberkesanan rawatan yang ditetapkan.

Penyelidikan PCR menetapkan doktor untuk menentukan keberkesanan rawatan rawatan hepatitis.

Terdapat analisis kualitatif serta analisis kuantitatif PCR. PCR kuantitatif menunjukkan peratusan RNA dengan pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan kehadiran atau ketiadaan virus. Penunjuk positif kualiti (kehadiran Hepatitis C RNA) juga memerlukan penyelidikan kuantitatif. Tahap penumpuan yang tinggi dari agen penyebab hepatitis C dikaitkan dengan risiko penularannya, iaitu, jangkitan orang lain. Nombor yang rendah lebih baik dirawat. Jumlah virus RNA dalam darah tidak berkaitan dengan intensiti penyakit ini. Analisis PCR juga dilakukan dalam kes terapi interferon untuk menetapkan tempoh dan kerumitan kursus rawatan.

Ciri-ciri analisis PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif ditugaskan dengan penunjuk tindak balas rantai polimerase bagi semua pesakit yang mempunyai antibodi untuk hepatitis C dalam darah mereka. Mereka yang telah sakit dan didapatkan mesti mengambil ujian semula. Adalah disyorkan untuk mengambil analisis untuk hepatitis B, maka, jika kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, tindak balas kualitatif yang dianalisis harus dilakukan bersamaan dengan ujian darah yang lain. Analisis akan menunjukkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil ujian, hanya ujian positif untuk hepatitis C akan kelihatan atau negatif, iaitu kehadiran atau ketiadaan virus. Jika output "dikesan", maka virus itu dan terus aktif. Penetapan "tidak dikesan" menunjukkan ketiadaan virus atau jumlahnya yang kecil. Dengan penunjuk ini, perlu diingat bahawa sensitiviti analisis sistem diagnostik adalah berbeza dan bahawa hepatitis C RNA masih boleh di dalam darah, tetapi tidak ditunjukkan dalam analisis.

Kaedah PCR yang sangat sensitif mendedahkan ultra hepatitis C walaupun dalam jumlah yang sedikit. Kajian hibridensi fluoresen digunakan, yang banyak kali lebih tinggi daripada sistem PCR standard. Kaedah ini digunakan dalam beberapa kes:

• disyaki bentuk tersembunyi hepatitis C;
• Diagnostik PCR tidak mengesahkan patogen, tetapi terdapat antibodi;
• dalam kes pemulihan;
• untuk mengesan jangkitan awal.

Kembali ke jadual kandungan

Analisis penyahkodan

Penyahkodan PCR HCV mempengaruhi keputusan muktamad ketika membuat diagnosis, khususnya dengan metode ultrametod. Kelemahan utama kajian ini adalah mematuhi syarat steril untuk sampel dan bahan. Penyimpangan sedikit kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitis yang tidak tepat, merumitkan diagnosis dan rawatan berikutnya. Analisis PCR untuk menentukan RNA hepatitis tidak senantiasa menunjukkan gambar penyakit, kadang kala ketidakakurasian dibenarkan, dan di kedua-dua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disyorkan untuk menggunakan peperiksaan yang komprehensif.

Norma petunjuk

Ketiadaan antibodi JgM kepada hepatitis C virus dalam keputusan kajian dianggap sebagai norma dalam analisis reaksi rantai polimerase. Pada masa yang sama, penemuan analisis serologi menunjukkan kehadiran antibodi terhadap virus C dan ini juga berada dalam jarak normal. Takrif kualitatif tidak menunjukkan keamatan penyakit, ia hanya mendedahkan agen penyebab hepatitis C dalam RNA. Analisis ini diulangi selepas rawatan untuk mengesahkan pemulihan sebenar.

Penyimpangan

Jika antibodi JgM kepada RNA HCV hadir, ini menunjukkan jangkitan yang membina. Penyakit ini pada masa yang sama meneruskan akut atau kronik, diwujudkan dalam pelbagai peringkat. Jika penurunan jumlah antibodi direkodkan, analisis akan menunjukkan bahawa hasil rawatan dicapai semasa pemulihan. Terdapat kes-kes penemuan positif palsu dalam diagnosis. Mereka ditemui pada wanita semasa kehamilan dan pada orang dengan penyakit berjangkit lain.

Diagnostik PCR untuk hepatitis C

Hepatitis C adalah keradangan sel-sel hati yang berlaku akibat jangkitan dengan virus HCV (hepatitis C) melalui kontak dengan darah orang yang dijangkiti. Kod genetik flavivirus HCV dibawa oleh molekul RNA (ribonuclenic acid) yang terkandung dalam struktur virus. Fenomena yang mengancam nyawa ini dibezakan dengan kerahsiaan pada peringkat awal patologi. Selang masa antara jangkitan dan permulaan simptom (tindak balas sistem imun) boleh dari satu bulan hingga enam bulan. Sebagai peraturan, penyakit itu mengambil bentuk kronik dan sukar untuk menyembuhkan.

Perubatan moden membolehkan anda mendiagnosis patologi dengan kerosakan hati yang kecil. Kaedah diagnostik yang paling biasa dan berkesan termasuk analisis PCR. Pertimbangkan dalam artikel ini apa yang ada dan apa jenisnya.

Apakah kajiannya?

Analisis PCR untuk hepatitis C adalah pemeriksaan makmal yang mengesan flavirus, bahan genetik ribonuclelenic acid (RNA). Ia menentukan bilangan molekul RNA dalam darah, kualiti bahan biologi, jenis genetik flavirus HCV.

Kaedah PCR untuk hepatitis C memungkinkan untuk mengesan jumlah minimum flavirus sebelum pembentukan antibodi, sebagai peraturan, tidak lama selepas jangkitan.

Kajian ini sering disebut sebagai analisis RNA, kerana ia mengesan zarah-zarah asid ribonukleat yang mempunyai ukuran 30-60 nm yang terkandung dalam flavavirus.

Kajian ini dijalankan seperti berikut: pada perut kosong, pesakit memberikan darah dari vena, yang kemudiannya diuji dengan pelbagai kaedah:

• PCR Masa Nyata dilakukan secara automatik tertutup dan mempunyai had yang lebih rendah untuk mengesan virus RNA, sama dengan 15 IU / ml;
• COBAS AMPLICOR dengan kepekaan 50-100 IU / ml.

Semakin tinggi kepekaan teknik diagnostik, semakin besar peluang untuk mencari kandungan virus paling rendah dalam bahan biologi yang sedang disiasat.

Apakah jenis analisis yang digunakan

Analisis yang telah berjaya digunakan selama beberapa dekad dipanggil hepatitis PCR, dan ia dapat dikesan dengan mudah dan cepat. Dalam bidang perubatan, terdapat dua kaedah reaksi, yang secara asasnya berbeza antara satu sama lain:

• kaedah kualitatif mendedahkan kehadiran dalam bahan biologi sumber genetik virus tertentu;
• analisis kuantitatif mengukur bilangan perkara genetik, yang membolehkan menentukan tahap patologi atau menilai keberkesanan kursus terapeutik;
• genotyping menentukan jenis virus yang terdapat di dalam badan.

Secara umum, ujian darah membantu mengenal pasti sifat viremia dan jenis genetik patogen. Sebagai peraturan, penyelidikan dijalankan 1 kali bergantung pada tahap kepekaan sistem diagnostik. Sekiranya perlu, ujian semula dilakukan menggunakan reagen ultrasensitif.

PCR berkualiti tinggi

Apakah RNA PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C? Inti dari tindak balas terletak pada kehadiran urutan hepatitis RNA, dan reaksi hanya mungkin di hadapan protein virus etimologi serupa dalam ELISA. Dalam proses perbandingan, beban dan kemungkinan kerosakan pada kawasan hati dikesan.

Ciri tersendiri kaedah ini adalah keupayaan untuk mengesan walaupun kehadiran gen berasingan.

Harus diingat bahawa setelah menerima keputusan ujian PCR dan ELISA, pesakit memerlukan rawatan yang sesuai, tanpa mengira hasil imunoassay terakhir. Positif menunjukkan jangkitan, dan negatif PCR menunjukkan bilangan zarah virus yang berkurangan berbanding tahap kepekaan.

Terdapat beberapa syarat yang mempengaruhi pengeluaran PCR negatif dan ELISA:

• kekurangan syarat pengumpulan bahan yang sesuai;
• analisis yang dihasilkan mengandungi pencemaran;
• dalam kes suntikan awal heparin kepada pesakit.

Pesakit tidak perlu mengikuti peraturan tertentu untuk sampel darah untuk analisis PCR, dalam hal ini kualitas analisis ini bergantung pada profesional medis yang melakukan prosedur. Keupayaan untuk menubuhkan kehadiran penyakit (terutama dalam bentuk akut) muncul dalam masa beberapa minggu selepas jangkitan.

Analisis kuantitatif

Ujian kuantitatif adalah disyorkan untuk mengesan beban virus sebaik sebelum pembentukan terapi selanjutnya dan tindak balas badan. Proses pensampelan darah dilakukan dengan cara yang sama dengan PCR dan ELISA yang berkualiti tinggi, satu-satunya keadaan adalah ketiadaan kemungkinan merokok pesakit sebelum prosedur.

Berkenaan dengan ciri-ciri yang diperolehi daripada kajian data, peningkatan beban dicirikan oleh petunjuk dari 800000 IU / ml, rendah - 400000 IU / ml. Kehadiran virus dalam tubuh pesakit ditunjukkan oleh PCR untuk hepatitis bukan ujian kualitatif negatif.

Penyelidikan semacam ini memungkinkan untuk menentukan betapa berbahayanya pesakit kepada orang di sekelilingnya. Sebagai contoh, mengenal pasti tahap yang tinggi menunjukkan peningkatan jangkitan pesakit. Di samping itu, hasil analisa membantu merumuskan rawatan yang paling berkesan dan menentukan berapa banyak terapi yang sedia ada dianggap berkesan.

Sambutan negatif cepat ujian menunjukkan kejayaan teknik yang dipilih, dan lambat menunjukkan keperluan untuk penyesuaian dan penggunaan pelbagai rawatan.

Proses mengambil prosedur analisis bergantung pada hari tertentu dari penyakit ini. Penentuan pertama dilakukan pada hari pertama selepas pesakit dimasukkan ke hospital, maka prosedur itu diulangi pada 4, 12 dan 24 minggu setelah mengambil ubat.

Oleh itu, analisis kuantitatif menunjukkan rawatan yang paling berkesan, tempoh terapi yang tersedia dan bahaya pesakit yang berkaitan dengan orang lain.

Genotyping

Dalam kajian analisis bahan, adalah penting untuk menentukan ketepatan genotip virus yang berlaku. Pada masa ini, terdapat 11 jenis virus hepatitis C, yang pada gilirannya termasuk subspesies tertentu.

Semua spesies ini bertindak balas berbeza dengan rawatan yang berbeza, dengan jenis individu benar-benar tahan terhadap banyak ubat.

Genotip ini memungkinkan untuk menentukan dan menunjukkan keadaan hati. Ia bukan perkara biasa untuk keputusan "tidak ditaip" dalam hasilnya, yang bermaksud bahawa virus dalam darah pesakit tidak dikesan oleh sistem ujian ini. Ini boleh dikesan jika genotip tertentu tidak sepadan dengan zon ini. Dalam situasi sedemikian, analisis diambil berulang-ulang, dan sistem yang lebih sensitif digunakan untuk mengkaji bahan tersebut.

Kaedah Ultra Sensitif

Kaedah ultrasensitif diperlukan dalam kes-kes tertentu apabila diagnosis hepatitis tidak dapat dilakukan oleh kaedah lain, pada saat yang sama, bila lulus analisis ditentukan oleh dokter yang hadir:

• jika anda mengesyaki kehadiran virus hepatitis C pada pesakit dengan pelbagai penyakit tersembunyi;
• kehadiran antibodi terhadap virus hepatitis C, tidak disahkan oleh diagnostik PCR;
• untuk menentukan kualiti keberkesanan kaedah rawatan yang dipilih, dan mengesahkan penghapusan penyakit.

Kepekaan kaedah ini jauh lebih tinggi daripada yang biasa digunakan, bagaimanapun, kaedah ini tidak mengecualikan hasil palsu, baik positif dan negatif. Dalam keadaan sedemikian, penting untuk mengawal kualiti prosedur dan kemungkinan pencemaran bahan itu sendiri.

Penjelasan analisis PCR

Penyahkodan analisis dilakukan berdasarkan bahan yang dibentangkan, sementara hasil penelitian laboratorium termasuk data tertentu yang dijelaskan di atas.

Transkrip boleh termasuk tindak balas rantai polimer PCR positif dan ELISA negatif dalam ujian, yang bermaksud bahawa pesakit tidak mempunyai tanda-tanda hepatitis C dalam darah, tetapi pada masa lalu ia telah memindahkan bentuk penyakit akut. Sebagai peraturan, apabila mendiagnosis, pakar menggunakan penunjuk ujian PCR.

Merumuskan semua perkara di atas, dapat disimpulkan bahawa semasa analisis adalah penting untuk mematuhi semua peraturan dan saranan supaya hasil yang diperoleh adalah setepat mungkin, dan berdasarkan data yang diperoleh adalah mungkin untuk menentukan keberkesanan terapi yang digunakan dan kesempatan selanjutnya pemulihan penuh.

Mengendalikan analisis PCR untuk hepatitis C dan penyahkodan keputusan

Analisis PCR Hepatitis C adalah kajian yang tujuan utamanya adalah mengenal pasti bahan genetik agen penyebab. Analisis mendedahkan agen penyebab penyakit ini dengan menggunakan tindak balas rantai polimerase. Diagnosis ini mempunyai ketepatan yang tinggi, kekhususan untuk mengesan ketiadaan atau kehadiran jangkitan virus.

Intipati diagnosis

Untuk menjalankan analisis PCR untuk menentukan virus hepatitis C dari pesakit, darah vena diambil, yang berpotensi mengandungi HCV RNA (asid ribonukleat) virus yang dikehendaki.

Ujian PCR untuk Hepatitis C membayangkan prosedur untuk menambah zarah darah pesakit:

• primer (kawasan sintetik pendek sintetik gen yang diperlukan);
• enzim khas (polimerase RNA).

Selepas pensampelan, bahan biologi dihantar untuk penyelidikan ke makmal. Satu bahagian darah diperlukan untuk analisis PCR langsung, yang kedua dihantar untuk ujian oleh ELISA. Enzim mampu dalam masa yang singkat untuk meningkatkan jumlah bahan genetik virus patogen tersebut. Dalam alat khas, beberapa kitaran haba dan proses penyejukan dijalankan. Pada peringkat akhir, bahan yang diperolehi dibandingkan dengan gen virus dan kesimpulan dibuat tentang kehadiran atau ketiadaan patologi dalam tubuh pesakit.

Intipati dan menjalankan analisis PCR di makmal. Dilakonkan oleh SiberianMedicalLaboratory.

Jenis penyelidikan

Terdapat 3 jenis diagnostik, yang memungkinkan untuk menentukan kehadiran virus hepatitis C dalam tubuh manusia:

• genotyping;
• kualiti;
• kuantitatif.

Kaedah kualitatif

Diagnosis hepatitis C dengan kaedah kualitatif boleh digunakan untuk pesakit di mana antibodi terhadap virus dikesan dalam ujian darah. Dalam kes kehadiran fasa akut RNA HCV, langkah diagnostik sedemikian boleh menentukan kehadiran penyakit itu dalam masa 1-2 minggu selepas jangkitan. Dalam tempoh ini, antibodi untuk hepatitis C mungkin belum dikembangkan.

Kaedah kuantitatif

Kaedah diagnostik kuantitatif digunakan untuk menentukan kepekatan virus dalam sampel darah. Ujian sedemikian untuk viremia (tahap kepekatan) menjadikannya mungkin untuk menentukan bilangan unit RNA virus secara tepat. Hasil akhir dinyatakan dalam jumlah yang sama. Jika kita bercakap mengenai analisis kuantitatif, maka penunjuk diukur dalam 1 ml (1 cub. Cm).

Parameter beban virus bermaksud tahap penyakit menular, iaitu, ia mencerminkan tahap "penularan" pesakit. Dalam praktiknya, ini bermakna bahawa semakin tinggi kepekatan virus dalam darah, semakin besar peluang untuk pesakit menginfeksi orang lain dengan hepatitis C. Kaedah penyelidikan kuantitatif juga membolehkan anda untuk membuktikan kualiti dan keberkesanan rawatan.

Genotyping

Genotyping mendedahkan mutasi agen penyebab penyakit ini. Sebelum menetapkan pelan rawatan, genotip virus ditentukan: kualiti dan tempoh terapi bergantung kepadanya. Sebagai contoh, dalam rawatan jenis penyakit I, kecekapan adalah 60%, dalam kes II, III-jenis - kira-kira 80%.

Manfaat Analisis PCR Hepatitis

Antara kelebihan utama prosedur ialah:

1. Kemungkinan diagnosis awal. Analisis PCR dapat mengesan kehadiran virus pada peringkat awal jangkitan.
2. Hasil ralat rendah. Sumber biologi yang dikaji membolehkan anda mendiagnosis seksyen bahan genetik yang merupakan ciri hanya satu jenis jangkitan virus. Keadaan ini membolehkan untuk mengelakkan keputusan diagnostik palsu.
3. Tahap kepekaan tinggi. Analisis PCR dapat mengesan RNA virus dalam kuantiti yang kecil, yang juga memungkinkan untuk menjejaki jangkitan laten pada waktunya.

Petunjuk untuk

Ujian untuk PCR untuk hepatitis C adalah perlu, jika ada:

• mempunyai hubungan dengan orang yang sakit, yang boleh menyebabkan jangkitan;
• gejala sirosis hati (pembesaran limpa, perubahan tidak normal dalam saiz hati, pengesanan plexus vena pada abdomen di bawah kulit);
• keputusan positif ELISA;
• peningkatan aktiviti AST dan ALT (ditunjukkan dalam analisis biokimia darah);
• keperluan untuk mengawal kelakuan terapi antiviral;
• peringkat awal rawatan untuk keperluan untuk menubuhkan viral load;
• menjalankan peringkat akhir terapi untuk mengecualikan kemungkinan pengulangan;
• pesakit mempunyai hepatitis B untuk menolak pembangunan kerosakan hati yang bercampur.

Bagaimana untuk menyediakan derma darah untuk penyelidikan PCR

Persediaan untuk analisis PCR merangkumi cadangan berikut:

• darah diambil pada waktu pagi;
• analisis dilakukan pada perut kosong, jadi disarankan untuk berehat antara pengambilan makanan terakhir 8-10 jam;
• beberapa hari sebelum diagnosis harus dikecualikan makanan berlemak, pedas dan goreng, minuman beralkohol dan merokok;
• satu hari sebelum analisis seseorang harus menahan diri daripada melakukan senaman berat, tidak termasuk kelas di gym atau kolam renang.

Hasil analisis: norma dan penyimpangan

Analisis itu sendiri bukanlah jangka panjang, dan ahli hepatologi pakar yang berkelayakan atau pakar penyakit berjangkit menyuraikan keputusan PCR untuk hepatitis C. Berdasarkan keputusan analisis, pesakit didiagnosis.

Untuk menguraikan hasil kaji selidik dengan betul, mereka mengambil kira penunjuk:

• analisis biokimia darah;
• data ultrasound;
• hasil biopsi.

Tafsiran analisis kuantitatif

Apabila memperoleh keputusan analisis kuantitatif PCR, petunjuk berikut akan diambil kira:

Diagnosis dengan PCR untuk Hepatitis C

Tidak semua orang tahu mengapa mereka menggunakan kaedah diagnostik PCR untuk hepatitis C. Salah satu kumpulan penyakit yang paling biasa adalah penyakit berjangkit saluran gastrousus. Perut (ulser), usus (kolitis, enteritis) dan hati (hepatitis) yang paling kerap terkena.

Di antara semua organ yang disenaraikan di atas, beban terbesar dikenakan pada hati. Di dalam badan, peranan hati sangat penting:

1. Hampir semua tindak balas metabolik berlaku di hati (ini adalah di mana semua jenis komponen penting terbentuk yang membolehkan tubuh berfungsi sepenuhnya).
2. Hati adalah organ detoksifikasi utama. Dengan pertolongannya (khususnya, melalui hempedu), banyak substrat dikeluarkan yang boleh menyebabkan mabuk dan membawa kepada akibat yang serius.

Malangnya, ramai yang tidak memantau kesihatan mereka, oleh itu hati mula menderita. Hepatitis pelbagai etiologi (virus, toksik) biasanya berkembang.

Definisi hepatitis

Hepatitis virus menduduki tempat yang penting di kalangan penyakit hati. Keparahan perjalanan penyakit ini, kerumitan rawatan meletakkannya di tempat pertama di kalangan patologi sifat lain organ ini.

Semua hepatitis dibahagikan kepada akut dan kronik. Hepatitis A dan B dikelaskan sebagai akut. Antara hepatitis C kronik datang dahulu.

Penyakit ini disebabkan oleh virus hepatitis C. Satu ciri ciri adalah bahawa penyakit ini boleh bertahan lama tanpa sebarang manifestasi klinikal.

Ia disebarkan terutamanya melalui darah. Dengan aliran darah, virus memasuki hati, di mana ia mula melipatgandakan sel-selnya. Akibat akumulasi virion, kemusnahan hepatocyte yang dijangkiti berlaku. Sebagai tindak balas kepada ini, antibodi mula dihasilkan, yang mula menyerang sisa-sisa hepatosit. Oleh kerana itu, kolam terhadap sel hati dikembangkan dari masa ke masa, yang memperburuk perjalanan penyakit.

Disebabkan fakta bahawa penyakit ini adalah gejala asimtomatik atau asimtomatik ringan, dan tanda-tanda klinikal hanya muncul apabila sel-selnya terjejas dengan ketara, penyakit ini memerlukan penciptaan kaedah diagnostik untuk mengesan kehadirannya dan mengambil langkah yang sesuai.

Diagnosis hepatitis C: analisis kualitatif dan kuantitatif

Pada masa ini, untuk diagnosis hepatitis C, kaedah seperti biopsi hati dan immunogram digunakan.

Mereka membenarkan anda untuk menentukan secara langsung kehadiran hepatosit yang dijangkiti (spesimen biopsi hati) atau antibodi tertentu terhadap sel-sel yang terjejas (immunogram). Walau bagaimanapun, terdapat satu kaedah yang membolehkan anda dengan pasti menentukan kehadiran virus itu sendiri. Ini adalah tindak balas rantai PCR - polimerase.

Intipati kaedah ini terletak pada hakikat bahawa dalam keadaan tertentu, pengeluaran rantai RNA berlaku. Ini disebabkan oleh fakta bahawa terdapat serpihan zarah virus dalam darah atau biopsi yang dipersoalkan. Apabila menyambungkannya dengan beberapa molekul dalam medium, sintesis rantai yang melengkapi RNA virus berlaku. Dalam analisis seterusnya dan perbandingannya dengan urutan nukleotida virus hepatitis C yang diketahui, adalah mungkin untuk menentukan sama ada virus itu terdapat di dalam badan dan sama ada kerosakan hati hadir.

PCR dilakukan selepas pengesanan antibodi spesifik terhadap virus hepatitis dalam darah. Selepas ujian dijalankan keputusan - RNA "dikesan" atau "tidak dikesan". Kadang-kadang dia mungkin mengatakan "bahan tidak cukup" - dalam kes ini, ujian semula untuk hepatitis C adalah perlu.

Sekiranya bilangan zarah virus adalah kurang daripada jumlah minimum yang diperlukan, maka kita boleh mengatakan bahawa tidak ada hepatitis, dan jumlah bahan genetik yang minima boleh "keliru" kerana meniru bahan genetik atau beberapa urutan nukleotida yang dapat bertepatan dengan virus.

1. Dengan PCR, hasil negatif dapat dilihat apabila terdapat zarah virus dalam darah, tetapi mereka sangat kecil (jangkitan berlaku baru-baru ini atau analisis didahului oleh terapi antivirus jangka panjang dan intensif) yang sistem ujian tidak dapat menentukan kepekatan mereka secara normal. RNA - "tidak dapat dikesan."
2. Sekiranya PCR mempunyai hasil yang positif, maka terdapat begitu banyak zarah virus dalam darah yang jumlahnya melebihi ambang sensitiviti sistem ujian. Dalam kes ini, terdapat risiko yang tinggi untuk membangunkan proses menular (atau sudah ada di peringkat yang agak maju). Biasanya jumlah virus yang tinggi sudah menjadi petunjuk untuk rawatan dan pemindahan hati seterusnya.

Kadang-kadang ujian boleh menjadi negatif palsu atau palsu.

Hasil PCR negatif palsu dari hepatitis diperhatikan dalam kes apabila beberapa komponen hadir dalam medium reaksi yang menghalang pembentukan salinan zarah virus. Oleh kerana itu, tidak mungkin untuk mendapatkan gambar sebenar keadaan darah, yang menyumbang kepada laluan virus dan perkembangan penyakit. Kehadiran heparin dalam darah juga boleh mempengaruhi tindak balas (dengan mengurangkan kelikatan relatif darah). Tafsiran yang salah dalam analisis mungkin berlaku walaupun keadaan pengangkutan dan penyimpanan bahan yang diselidiki tidak dipenuhi.

Hasil positif yang salah, apabila hepatitis C didiagnosis, PCR paling kerap berlaku apabila tiub atau persekitaran kerja tercemar. Di samping itu, keputusan positif dapat dilihat dengan kehadiran virus hepatitis kumpulan lain (akibat tindak balas silang).

Analisis kualitatif PCR untuk pengesanan hepatitis C

Kehadiran dalam darah sejumlah besar cryoglobulins juga secara langsung memberi kesan kepada pengaliran PCR. Oleh kerana itu, penting untuk menentukan kepekatan mereka dalam darah sebelum menguji hepatitis C untuk mengesan penyimpangan hasil terlebih dahulu dan mencegahnya.

Selepas ujian ini, akan menjadi jelas sama ada terdapat zarah virus dalam darah. Apabila menentukan mereka, adalah disyorkan untuk segera memulakan terapi antiviral untuk memperlahankan proses perkembangan. Tidak seperti hepatitis B, tiada ubat lengkap untuk hepatitis C; penyakit ini hanya akan masuk ke peringkat laten dan mula perlahan. Kerosakan hati tidak dapat dielakkan. Pada tahap terakhir proses, apabila hati tidak lagi dapat menangani fungsinya, ia mungkin memerlukan transplantasi.

Rawatan ini dijalankan terutamanya dengan dua ubat - interferon dan ribavirin.

Membuktikan keberkesanannya dalam memperlambat proses kekalahan hepatosit. Di sepanjang jalan, terapi infusi semestinya ditetapkan untuk memudahkan kerja hati.

Semua pesakit yang telah melihat peningkatan dalam jumlah zarah virus dalam darah semestinya didaftarkan dengan pakar hepatologi. Beberapa kali setahun, mereka disyorkan menjalani peperiksaan pencegahan untuk menentukan perkembangan proses dan pengesanan indikasi yang tepat pada masanya untuk transplantasi. Di samping itu, ia mungkin menggunakan hepatoprotectors, walaupun pendapat doktor berbeza sedikit. Ada yang percaya bahawa ubat-ubatan ini membolehkan anda untuk menggantung proses dan melindungi hepatosit yang tidak terjejas; yang lain yakin bahawa tidak masuk akal untuk mengambilnya, dan terapi antiviral intensif perlu dijalankan.

Oleh itu, hepatitis C tergolong dalam kategori penyakit, pengenalpastian yang menunjukkan beberapa masalah. Meningkatkan kaedah diagnostik, serta peperiksaan pencegahan yang tepat pada masanya akan mengurangkan kejadian penyakit ini. Juga penting ialah pencegahan penyakit ini. Seseorang harus berhati-hati mengelak daripada bersentuhan dengan darah, enggan mengambil ubat, hanya penyakit ini akan dibasmi. Perkara utama dalam pencegahan dan rawatan ialah sikap sedar pesakit terhadap kesihatan mereka.

Kajian PCR mengenai hepatitis C: jenis, tanda, transkrip

Hepatitis C virus adalah penyakit serius yang berlaku dengan kerosakan hati. Dalam lapan puluh peratus pesakit, ia menjadi kronik. Virus ini mengalar di sel hati - hepatosit - dan menyebabkan kematian mereka. Tisu yang mati digantikan oleh tiub tisu penghubung, fibrosis berkembang.

Apabila fibrosis berkembang, hati tidak dapat melaksanakan fungsinya, sirosis hati bermula, yang berbahaya kerana komplikasinya: peningkatan tekanan dalam sistem vena portal, pendarahan gastrousus, pembekuan darah terjejas, perubahan mental akibat kerosakan pada inti otak oleh produk-produk toksik.

Penyebab penyakit itu adalah jangkitan oleh virus dari keluarga Flaviviridae, yang tergolong dalam jenis virus RNA. Ini bermakna bahawa bahan genetik yang mana protein patogen disintesis dikodkan dalam molekul asid ribonucleik. Jangkitan berlaku melalui darah, secara seksual, dan dari wanita hamil kepada janin. Malangnya, jumlah masa yang mencukupi dapat berlalu antara jangkitan dan permulaan pengeluaran antibodi - dari dua minggu hingga enam bulan. Ini tidak membenarkan untuk menentukan jangkitan oleh ELISA dan memulakan rawatan pada peringkat awal.

Apakah analisis PCR?

PCR adalah kaedah analisis molekul, yang membolehkan untuk mengesan bahan genetik pathogen yang sudah ada pada minggu pertama selepas jangkitan dengan bantuan tindak balas rantai polimerase. Kajian ini mempunyai kekhususan yang tinggi, ketepatan, dan membolehkan bukan sahaja untuk menentukan kehadiran atau ketiadaan virus, tetapi juga kepekatan dan genotipnya.

Untuk kajian ini, darah pesakit diambil di mana RNA virus berpotensi terletak. Primer ditambahkan ke darah - sintesis sintetik dari gen yang dikehendaki panjang kecil, dan polimerase RNA adalah enzim khas yang berulang kali meningkatkan jumlah bahan genetik patogen. Menggunakan alat khas, beberapa pemanasan dan kitaran penyejuk dijalankan. Kemudian bahan dianalisis dan dibandingkan dengan gen yang diketahui virus, berdasarkan kesimpulan yang dibuat mengenai kehadiran atau ketiadaan jangkitan.

Jenis analisis PCR untuk hepatitis C

Terdapat tiga jenis analisis PCR:

Analisis kualitatif PCR. Peringkat pertama kajian ini. Ia membolehkan anda mengenal pasti bahan genetik virus dalam darah.

Analisis kuantitatif PCR. Membolehkan anda untuk menentukan beban virus - kepekatan bahan genetik patogen dalam satu mililiter darah. Kajian ini dijalankan sebelum permulaan terapi, dan kemudian pada pertama, keempat, kedua belas, dan (jika kursus itu panjang) minggu ke-24 rawatan untuk menilai keberkesanannya.

Genotyping Agen penyebab hepatitis C sering dan mutasi mutasi. Terdapat tujuh varian genotip virus yang terdapat di planet ini. Di Rusia, jenis pertama, kedua dan ketiga adalah perkara biasa. Setiap genotip mempunyai ketahanan yang berbeza terhadap terapi, contohnya, keberkesanan rawatan jenis pertama adalah enam puluh peratus, dan untuk kedua dan ketiga angka ini mencapai delapan puluh lima. Oleh itu, untuk memilih ubat-ubatan yang sesuai dan menetapkan kursus rawatan untuk tempoh yang mencukupi, adalah perlu untuk menentukan dengan tepat jenis virus pesakit yang dijangkiti.

Petunjuk untuk analisis PCR untuk hepatitis C

Kajian PCR ditetapkan dalam kes berikut:

• hubungan dengan orang sakit di mana jangkitan boleh berlaku;
• enzim positif immunoassay;
• tanda-tanda sirosis hati: perubahan saiz hati, limpa yang diperbesarkan, rupa pinggang vena plexus subkutan pada perut;
• penampilan gejala kerosakan hati: sakit di perut kanan, menguning kulit;
• peningkatan aktiviti ALT dan AST dalam analisis biokimia darah;
• sebelum memulakan rawatan untuk menentukan viral load;
• untuk memantau keberkesanan terapi antiviral;
• selepas rawatan untuk mengawal berulang;
• di hadapan didiagnosis hepatitis B, untuk mengecualikan kerosakan hati yang bercampur.

Penjelasan mengenai kajian PCR mengenai hepatitis C

Penyahkodan analisis PCR dan immunoassay enzim untuk hepatitis C perlu dilakukan oleh pakar hepatologi atau pakar penyakit berjangkit. Menganalisis hasil PCR diperlukan dalam kombinasi dengan data analisis biokimia darah, biopsi dan ultrasound. Hanya doktor yang berkelayakan sahaja yang dapat menganalisis hasil penyelidikan dan, berdasarkan kepada mereka, menetapkan rawatan yang betul.

Menyahkod analisis kualitatif.

Dalam bahan biologi yang dianalisis mendapati bahan genetik patogen. Jangkitan disahkan.

Jangkitan tidak ada, atau jumlah RNA patogen berada di bawah batas kepekaan.

Menyahkod analisis kuantitatif.

Kadar biasa untuk orang yang sihat. Ini bermakna bahawa bahan ujian tidak mengandungi RNA Hepatitis C, atau kepekatannya adalah di bawah ambang sensitiviti kajian.

Kepekatan RNA adalah di bawah julat kuantiti. Hasil ini ditafsirkan dengan sangat hati-hati, menghubungkannya dengan data dari kajian lain, sering kali dikaji semula.

Tahap viral load pada kepekatan tertentu dianggap rendah. Biasanya, penurunan jumlah virus bermakna terapi itu berjaya.

Lebih daripada 8 * 10 ^ 5 IU / ml

Tahap viral load pada kepekatan tertentu dianggap tinggi.

Lebih daripada 2.4 * 10 ^ 7 IU / ml

Jumlah RNA adalah di atas batas atas rentang kuantifikasi. Tidak mustahil untuk membuat kesimpulan tentang tahap beban virus dengan hasil ini. Biasanya dalam kes sedemikian, ujian diulang dengan pengenceran sampel darah.

Menyahkod genotip.

RNA genotip tertentu dikesan

Virus Hepatitis C genotip dan subjenis tertentu dikesan dalam biomaterial. Hasilnya dikodkan dalam angka Roman dan huruf Latin, contohnya - 1a, 2b. Secara keseluruhan terdapat tujuh genotip dan enam puluh tujuh subtipe, tetapi di Rusia terdapat hanya tiga jenis pertama.

RNA virus Hepatitis C dikesan

RNA ditemui dalam darah genotip langka untuk Rusia, yang tidak boleh dikaitkan dengan jenis pertama, kedua atau ketiga. Lebih banyak kajian diperlukan.

Keputusan ini menunjukkan bahawa pesakit sihat, atau jumlah RNA patogen terlalu kecil.

Ia adalah mungkin bahawa analisis PCR untuk hepatitis C adalah negatif, dan enzim yang dikaitkan dengan enzim imunosorben mengesan antibodi terhadap virus. Ini bermakna bahawa pesakit mempunyai hepatitis C akut dan pulih sendiri. Kira-kira dua puluh kes jangkitan mengakibatkan pemulihan spontan jika badan pesakit mempunyai daya tahan yang cukup terhadap jangkitan.

Walaupun PCR sangat tepat, hasilnya mungkin diputarbelitkan dalam situasi berikut:

• darah diangkut ke makmal dengan syarat yang tidak sesuai, suhu telah dilanggar;
• sampel biomaterial tercemar;
• terdapat kesan sisa heparin dan antikoagulan lain dalam darah;
• Penyiasat didapati sebagai inhibitor - bahan yang melambatkan atau menghentikan tindak balas rantai polimerase.

Kelebihan PCR berbanding kaedah lain

Diagnosis pada peringkat awal. PCR mengesan bahan genetik agen penyebabnya. Menggunakan analisis immunofluorescence, hanya imunoglobulin dapat dikenalpasti - bahan yang dihasilkan oleh tubuh dalam tindak balas terhadap jangkitan. Dalam kes jangkitan hepatitis C, jurang antara jangkitan dan permulaan tindak balas imun mungkin beberapa minggu dan bulan, pada masa ini ELISA akan tidak berkesan. PCR akan memberi jawapan pada minggu pertama selepas jangkitan.

Kebarangkalian kebarangkalian rendah. Dalam bahan di bawah kajian, menentukan kawasan bahan genetik, yang merupakan ciri hanya satu jenis patogen. Ini menghapuskan hasil palsu. Apabila ralat ELISA adalah mungkin, kerana jenis antibodi yang sama boleh dibebaskan daripada virus yang berlainan - antibodi tersebut dipanggil cross-antibodi.

Kepekaan yang tinggi. PCR memungkinkan untuk mengesan RNA agen penyebab walaupun dalam kuantiti minimum. Hal ini memungkinkan untuk mengenal pasti jangkitan tersembunyi.

Bagaimana untuk menyediakan derma darah untuk penyelidikan PCR

Untuk analisis PCR hepatitis C, darah vena dikumpulkan. Biasanya, dua bahagian darah diambil dari urat pesakit pada satu masa: pertama dihantar untuk PCR dan yang kedua oleh ELISA. Ini dilakukan agar lebih tepat menilai berapa pesakit dijangkiti virus, dan bagaimana imuniti melawannya.

Biasanya pesakit dikehendaki mematuhi peraturan berikut:

• ujian darah diambil pada waktu pagi;
• Jeda antara makanan terakhir dan derma darah hendaklah lapan hingga sepuluh jam;
• dua atau tiga hari sebelum analisis, adalah perlu untuk meninggalkan makanan goreng dan lemak, dan alkohol;
• selama dua puluh empat jam sebelum analisis, pesakit harus menghindari usaha fizikal: jangan membawa beban, jangan pergi ke gim atau kolam renang.

PCR kuantitatif untuk hepatitis C

Virus hepatitis C dapat melipatgandakan sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Oleh kerana pelbagai mutasi, pertahanan imun badan semakin lemah, genotip dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan jenis yang tepat dan tepat pada masanya, keberkesanan terapi antiviral bergantung. Bahaya jangkitan adalah bahawa penyakit ini adalah asimtomatik. Hanya 15 peratus daripada 100 boleh mengalami loya dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Pengesanan virus Hepatitis C

Kadar standard hepatitis C dalam saiz 40 hingga 60 nm, dengan kebanyakan lipid, kerosakan hati yang disebabkan oleh penyakit akut atau kronik penyakit ini. Hepatitis C, iaitu, RNA virus keluarga Togaviridae, sangat tahan, disebarkan melalui pemindahan darah atau penggunaan barang tidak steril, bekalan kebersihan yang tidak betul, dan lain-lain. Analisis kuantitatif membolehkan anda memeriksa darah dan mengenal pasti struktur genetik virus yang dijangkiti.

Untuk hepatitis C dan genotipnya ditentukan, menjalankan analisis kuantitatif. Bergantung kepada penganalisis yang boleh menentukan tiga tahap kejadian virus RNA.

Subtipe boleh menghasilkan pelbagai modifikasi, jadi kekhususan dan kepekaan penganalisis mesti seratus peratus. Di samping mengesan penyakit itu dalam pesakit, perlu menentukan tahap keterukannya. Sesetengah makmal tidak mempunyai semua data mengenai penyahkodan virus RNA, terdapat kemungkinan tindak balas positif palsu.

Penyelidikan mengenai hepatitis C akan lebih tepat apabila mengkaji petunjuk ini:

ALAT, Asat; Perisai alkali; LDH.

Menarik perhatian kepada hasil penunjuk ini dan keadaan umum badan, hasilnya dipaparkan menunjukkan tahap jangkitan, bentuk, dan jumlah sel-sel hepatitis C dalam darah. Ini menyumbang kepada proses penyembuhan dan keberkesanan terapi antiviral.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Reaksi rantai multi-dimensi (PCR) memberi idea tentang bilangan zarah DNA dalam analisis pesakit yang diambil, dengan tepat mengenal pasti agen berjangkit.

Agen penyebab penyakit berjangkit boleh berlaku. Jangkitan hati, seperti hepatitis C, boleh dirawat pada masa kita apabila ia dikesan pada masa yang tepat. Jika virus disyaki, analisis PCR dilakukan.

Memandangkan sekian lama gejala virus dapat bertopeng, seseorang mungkin tidak merasakan permulaan penyakit ini. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh dalam 60-70% kes, hepatitis C dikesan, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis ini dijalankan dalam tempoh tertentu untuk menentukan peringkat penyakit dan menetapkan rawatan yang sesuai. Untuk melakukan tanpa itu, tanpa memohon semua prosedur ini, adalah mungkin, diberi vaksin terhadap hepatitis.

Analisis itu, termasuk diagnostik PCR, memberikan gambaran tentang penyakit ini, bagaimana virus itu aktif pada tempoh pembangunan yang berlainan.

Pertama, terdapat analisis kualitatif yang hanya mengesahkan hipotesis mengenai jangkitan, dan kemudian kuantitatif, menentukan beban pada hati. Pilihan yang ideal akan menjadi hasil negatif untuk hepatitis C dalam bahan genetik pesakit.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Terdapat analisis kualitatif dan kuantitatif. Intipati pertama ialah ia menentukan kehadiran jangkitan dalam darah. Dan ini bermakna virus menjangkiti sel-sel hati yang sihat. Apabila antibodi kepada hepatitis C ditemui dalam pesakit, ujian kualitatif dilakukan dengan segera. Kadar yang harus diberikan adalah "tidak dikesan dalam darah". Apabila menentukan kepekatan virus, ada keperluan untuk mengetahui kepekaan sistem diagnostik, kerana orang yang menjalani terapi antiviral boleh melakukan analisis. Tahap kepekaan penganalisis tidak boleh kurang daripada 50 IU / ml.

Apabila virus dikesan, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, beban virus, yang menentukan kepekatan virus dalam darah dan keparahan penyakit.

RNA virus, yang dalam jumlah tertentu darah, ditakrifkan sebagai norma pada kadar 1 ml setiap 1 sentimeter padu. Selepas mengukur beban virus, adalah mungkin untuk menilai tahap jangkitan persekitaran yang masih tidak dijangkiti. Sebaik sahaja kepekatan hepatitis C meningkat dalam darah, perlu untuk mengasingkan diri dari alam sekitar.

Adalah penting pada peringkat awal untuk mengesan tahap konsentrasi hepatitis, untuk menentukan kadar pemulihan. Sekiranya kadar hepatitis C melebihi melebihi 800 ribu IU / ml, ia dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan sehingga satu juta kritikal. Jika jarak kuantitatif kurang daripada 400 ribu IU / ml, dianggap jangkitan orang-orang di sekitar akan berkurangan. Angka ini menjelaskan bahawa hepatitis C hadir dalam tubuh dalam dos yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif zarah RNA virus, jadi ia dilantik semula beberapa kali untuk ketepatan diagnosis.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pesakit adalah mengenal pasti tahap jangkitan kepada orang lain.

Ujian hepatitis C

membolehkan anda menilai keberkesanan terapi antiviral, tahap infeksi dan jumlah tisu yang dijangkiti.

Adalah penting untuk mencegah perkembangan penyakit itu, mengambil langkah pencegahan tepat pada masanya, menetapkan rawatan yang betul berdasarkan diagnostik PCR. Jika menurut keputusan, paras viral load kurang daripada 400 ribu IU / ml, maka kepekatannya mungkin sedikit, yang menunjukkan pemulihan penuh mungkin. Norma untuk mendapatkan hasil positif ialah ketiadaan jangkitan.

Keputusan analisis PCR:

Jawapan positif bermakna jangkitan dalam bahan biologi. Analisis ini dapat menentukan bilangan sel yang dijangkiti. Jawapan negatif menunjukkan ketiadaan jangkitan, yang dicari dengan teliti di dalam badan.

Kaedah penentuan kuantitatif hepatitis C adalah tepat dan bermaklumat, yang dilakukan pada peralatan yang mempunyai kepekaan tinggi. Memutuskan hasil analisis membolehkan anda mengetahui sama ada jangkitan dan kekhususannya, untuk melihat bilangan terkecil sel yang terinfeksi pada penganalisis yang sangat sensitif.

Keputusan palsu atau bertentangan jarang diberikan oleh analisis, lebih kerap ini berlaku dalam kajian immunoassay.

Hepatitis C adalah salah satu yang paling berbahaya dan sukar untuk mendiagnosis penyakit virus. Untuk menentukan penyakit ini, kaedah PCR hepatitis C digunakan. Ini adalah teknik berteknologi tinggi baru yang membolehkan anda menyiasat bahan genetik untuk kewujudan kehidupan di zarah-zarah terkecil (molekul) dan kuantiti terkecil. Virus hepatitis sangat berterusan, ia boleh hidup di alam sekitar untuk jangka masa yang panjang dan mantap di dalam tubuh manusia.

Apakah PCR?

Hari ini terdapat sejumlah besar pelbagai penyakit. Dan bukannya kaedah yang lebih kecil untuk penentuan mereka. Oleh kerana agen-agen jangkitan telah belajar mengambil akar dalam alam sekitar dan berkembang dengan mudah, teknologi terkini digunakan untuk mendiagnosis mereka. Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah kaedah yang lebih cepat dan lebih tepat yang bertujuan untuk mencari agen penyebab penyakit dengan meningkatkan jumlah DNA virus hepatitis dalam sampel. Tentang dia sering menulis: mencari jarum dalam jerami, dan kemudian membina jarum jarum.

Jenis kaedah PCR

Ujian kualitatif akan membantu menentukan kehadiran virus hepatitis C di dalam badan.

Alokasikan analisis kualitatif dan kuantitatif terhadap hepatitis. Untuk menentukan sama ada virus itu ada di dalam badan, dan mereka yang telah menemui antibodi untuk hepatitis C, menjalankan ujian yang berkualiti tinggi. Analisis pengekodan memberikan hasil: "positif"; "Negatif." Makna negatif bermaksud: sama ada seseorang itu sihat atau tidak ada ejen yang cukup dalam darah dan mereka tidak dapat dijumpai. Oleh itu, patut dilakukan pemeriksaan semula selepas beberapa waktu.

Hasil positif menunjukkan adanya jangkitan. Ini hampir selalu nilai sebenar. Keputusan yang salah biasanya bergantung pada faktor manusia (penyimpanan tidak wajar atau ketidakpatuhan terhadap peraturan prosedur). Apabila kadarnya adalah, hasilnya adalah negatif. Sebelum ujian tidak ada peraturan khusus, hanya ambil darah dari urat.

Jika ditemui, lakukan analisis kuantitatif (viral load) - ia memberikan nilai berangka: berapa banyak RNA virus hepatitis pada masa ini dalam jumlah yang ditetapkan bahan dalam kajian. Dengan perkembangan jangkitan aktif, ia boleh dikesan pada 1-2 minggu pada orang yang dijangkiti. Darah juga biasanya diperiksa kerana agen beredar secara bebas di dalamnya.

Ciri-ciri analisis PCR kuantitatif

PCR kuantitatif akan membantu anda memilih rawatan yang paling berkesan untuk hepatitis C.

Perbezaan analisis kuantitatif adalah bahawa tidak semuanya berlalu. Kualitatif - menentukan kehadiran, dan kuantitatif - membantu dengan pengesahan kesimpulan "virus hepatitis", prognosis perjalanan penyakit dan menentukan perjalanan rawatan. Seberapa berkesan terapinya adalah dengan bilangan RNA sebelum dan semasa rawatan. Juga dengan bantuannya menentukan pelantikan dos ubat.

Sebagai peraturan, ia dihasilkan sebelum permulaan rawatan. Petunjuk utama boleh:

penentuan viral load dan kawalan terapi antiviral, PCR berkualiti tinggi yang menemui antibodi hepatitis C, mencari hepatitis C akut dan kronik, kewujudan hepatitis bercampur, ketika merencanakan rawatan, jika kajian kualitatif masih menemukan kehadiran penyakit itu setelah minggu ke-12 terapi.

Lihat juga, apa viral load dalam hepatitis: terapi rendah dilaksanakan dengan jayanya; meningkat - rawatan tidak berkesan dan perlu diubah.

Apakah yang dilakukan pada pelbagai peringkat penyakit ini?

Analisis ini akan membantu memantau keputusan terapi di semua peringkat rawatan.

Pada fasa-fasa yang berlainan penyakit ini, satu kajian dilakukan untuk mengkaji semula manfaat rawatan dan perancangan tempohnya. Dengan tindak balas yang baik terhadap terapi, ia dipendekkan. Jika tidak, dengan penarikan balik virus secara perlahan, rawatan itu berpanjangan. PCR untuk hepatitis melakukan terapi 1.4, 12, 24 minggu. Apabila penunjuk tidak jatuh selepas 12 minggu, mereka menyimpulkan bahawa terapi tidak sesuai untuk organisma ini. Analisis ini digunakan untuk menentukan sejauh mana jangkitannya dan sejauh mana ia mungkin untuk menghantarnya. Sebagai contoh, semasa hamil terdapat risiko untuk menjangkiti bayi. Selepas terapi, kenali risiko pengulangan penyakit ini.

Decryption

Selepas kajian ini, analisis dapat menguraikan tidak dalam angka, tetapi dengan kata-kata: "di bawah julat ukur" dan "tidak dikesan." PCR kuantitatif lebih peka terhadap kualitatif. Kesimpulan "tidak dapat dikesan" boleh mengatakan bahawa jangkitan tidak dijumpai. "Di bawah julat ukuran" - ujian itu tidak menemui virus, tetapi ia adalah dalam nilai yang kecil. Dalam keadaan ini, lakukan kajian kedua.

Beban virus adalah penentuan jumlah RNA berjangkit dalam jumlah darah yang ditetapkan (1 ml = 1 meter padu secara kuantitatif). Dirumuskan dalam pengukuran antarabangsa IU / ml. Makmal berasingan menyatakan salinan / ml. Sistem ujian yang berbeza dapat menguraikan terjemahan komponen menjadi nilai-nilai antarabangsa dengan cara mereka sendiri. Jadual 1. Menguraikan analisis kuantitatif RNA virus

Diagnosis hepatitis termasuk pelbagai ujian untuk menentukan kehadiran virus dalam darah. Satu cara untuk mengesan penyakit adalah kaedah penyelidikan seperti PCR untuk hepatitis C. Apakah itu, mengapa analisis PCR untuk hepatitis sama pentingnya dilakukan dan didekodkan?

Apa itu

Reaksi rantai polimerase, atau PCR, digunakan untuk mendiagnosis ulser gastrik, kolitis, enteritis. Tetapi kelebihan utamanya ialah ia membantu mengesan dalam badan kedua-dua virus hepatitis C dan antibodi kepadanya, yang mempunyai keupayaan untuk tidak menyebabkan reaksi sistem imun kerana kemampuan mereka untuk bermutasi.

Kajian dan intipatinya terletak pada penciptaan keadaan-keadaan tertentu di mana tindak balas rantai Hepatitis RNA berlaku. Jika, jika dibandingkan dengan urutan nukleotida virus hepatitis C, kebetulan dijumpai, ini menunjukkan bahawa ada zarah virus dalam darah, dan proses pemisahan berlaku di hati. Jika jumlah virus berada di bawah tahap tertentu, diagnosis negatif dibuat, dan jika lebih tinggi, yang positif.

Terdapat dua jenis ujian darah menggunakan kaedah PCR untuk hepatitis: analisis kuantitatif dan analisis kualitatif.

PCR kuantitatif, seperti yang dinyatakan di atas, menentukan kepekatan RNA virus hepatitis. Di samping itu, beliau dapat memberi maklumat tentang intensiti yang patologi berkembang, dan keberkesanan rawatan yang ditetapkan. Analisis kuantitatif hepatitis C sangat penting kerana ia memperbaiki rintangan terhadap tindakan ubat antivirus dan membolehkan anda menyesuaikan terapi.

Selepas pesakit menjalani rawatan, PCR membantu menentukan urutan pelantikan selanjutnya. Dalam beberapa kes, keperluan untuk tinjauan tambahan. Sebagai contoh, jika tahap ALP meningkat (tetapi tidak lebih daripada 2 kali dalam tempoh enam bulan), dan transkrip analisis menunjukkan beban virus di atas 105 IU / ml, pesakit ditetapkan sebagai biopsi. Jika analisis kuantitatif PCR mendedahkan keradangan yang teruk dan fibrosis, pesakit dirawat sebagai rawatan dengan ubat-ubatan antiviral.

Dalam keadaan di mana sejumlah besar zarah virus digabungkan dengan ALT yang tinggi, pesakit harus segera dirawat tanpa langkah diagnostik tambahan.

Ambil ujian ini dan ketahui jika anda mempunyai masalah hati.

Hanya pakar yang berkelayakan dan berpengalaman yang dapat menguraikan secara kualitatif dalam analisis kuantitatif darah untuk hepatitis, dan teknologi moden membantu melakukan ini dengan kepekatan rendah virus dalam darah.

Analisis kualitatif PCR bertujuan untuk menentukan dan mengesahkan kehadiran sebenar virus dalam tubuh. Ia dilakukan apabila antibodi untuk hepatitis dikesan dalam darah. Ia adalah analisis kualitatif mengenai hepatitis yang menjamin ketepatan hasilnya sebanyak 100% dan membolehkan anda membuat diagnosis pada peringkat awal penyakit, yang memungkinkan untuk memulakan perjuangan terhadap hepatitis yang sudah ada pada minggu pertama selepas jangkitan dan meningkatkan kemungkinan pemulihan lengkap (dalam kes penyakit jenis B).

Faedah PCR

Dalam kajian oleh PCR dan menguraikan ujian darah untuk hepatitis, anda juga boleh menentukan genotip patogen tersebut. Secara keseluruhan, terdapat 6 genotip virus dan sebilangan besar subtipe, bagaimanapun, di rantau kita, 1, 2 dan 3 genotip telah menjadi biasa.

Kelebihan lain dari diagnosis jenis ini adalah:

• ketepatan tinggi penunjuk yang diperoleh dan kemungkinan kebarangkalian yang rendah di dalamnya;
• tahap kepekaan yang tinggi terhadap zarah virus dalam darah;
• kemungkinan mengenal pasti beberapa patogen sekaligus;
• diagnosis mikroorganisma patogen intraselular dengan variasi antigenik tinggi;
• bekerja dengan analisis penyahkodean untuk hepatitis membolehkan anda mengesan jangkitan semasa tersembunyi.

Siapa yang dilantik?

Kategori orang berikut harus lulus analisis PCR untuk hepatitis:

• wanita hamil;
• kakitangan penjagaan kesihatan;
• penderma darah dan organ yang berpotensi;
• mereka yang mempunyai ciri-ciri tanda penyakit;
• Individu yang dijangkiti HIV;
• penagih;
• pekerja seks rambang.

Bagaimanakah analisa dijalankan dan adakah perlu untuk mempersiapkannya

Sampel darah untuk PCR dilakukan dari urat. Sebagai peraturan, ini berlaku pada waktu pagi sebelum orang itu dimakan, kerana selepas makan, sekurang-kurangnya 8 jam harus lulus. Dalam kes-kes yang teruk, darah boleh diambil untuk pemeriksaan pada waktu siang atau pada waktu petang, tetapi jurang masa antara analisis dan pengambilan makanan harus sekurang-kurangnya 5 jam.

Faktor manusia secara kuantitatif boleh menjejaskan keputusan: ketepatan mereka dalam beberapa kes berkurangan dari 100% hingga 95%, oleh itu, perlu untuk menyediakan derma darah terlebih dahulu. Kualiti biomaterial untuk analisis akan sesuai apabila pesakit mengikuti peraturan berikut:

• sebelum menderma darah, anda hanya boleh minum air bersih;
• dua hari sebelum kajian, adalah perlu untuk meninggalkan pengambilan makanan goreng dan lemak, serta minuman beralkohol;
• satu hari sebelum lawatan ke makmal harus berhenti mengambil ubat. Jika ini tidak mungkin, adalah penting untuk memberitahu juruteknik makmal dan doktor yang hadir;
• hari sebelum anda perlu mengelakkan situasi tekanan dan usaha fizikal;
• ultrasound, pemeriksaan sinar-X dan ujian instrumental tidak boleh dilakukan sejurus sebelum derma darah;
• selama sejam sebelum analisis, anda mesti menahan diri dari merokok;
• 20 minit sebelum menderma darah, anda perlu terganggu, tenang dan bernafas.

Sekiranya seorang kanak-kanak berusia di bawah 5 tahun lulus kajian, ibu bapa mesti memastikan bahawa dia minum air rebus setiap 10 minit selama setengah jam sebelum mengambil biomaterial.

Dekripsi data yang diterima

Pengekodan analisis boleh diwakili oleh kata-kata (dalam hal kajian kualitatif), contohnya, "tidak dapat dikesan" atau "di bawah jangkauan perubahan" Dalam kes pertama, ini menunjukkan bahawa jangkitan tidak dikesan. Pada yang kedua - bahawa virus hadir, tetapi dalam kuantiti yang kecil. Keadaan ini memerlukan penyelidikan semula.

Beban virus ditentukan oleh jumlah RNA berjangkit dan dirujuk sebagai IU / ml atau salinan / ml.

Penunjuk normal (norma) analisis kuantitatif untuk hepatitis C adalah julat dari 1.8x102 hingga 2.4x107 IU / ml.

Kepekatan virus dalam darah boleh:

• rendah: dari 600 IU / ml hingga 3x10 4 / ml;
• sederhana: dari 3x10 4 IU / ml hingga 8x10 5 IU / ml;
• tinggi: lebih daripada 8x10 5 IU / ml.

Analisis kuantitatif dan kualitatif PCR untuk hepatitis membolehkan untuk menentukan kehadiran virus dalam badan dan tahap kepekatannya. Reaksi rantai multi-dimensi mampu mendiagnosis penyakit ini pada peringkat awal, tetapi untuk ini, pesakit secepat mungkin beralih kepada institusi perubatan untuk mendapatkan bantuan dan tegas mengikuti saran-saran dari doktor yang hadir.

Virus hepatitis C dapat melipatgandakan sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Oleh kerana pelbagai mutasi, pertahanan imun badan semakin lemah, genotip dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan jenis yang tepat dan tepat pada masanya, keberkesanan terapi antiviral bergantung. Bahaya jangkitan adalah bahawa penyakit ini adalah asimtomatik. Hanya 15 peratus daripada 100 boleh mengalami loya dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Pengesanan virus Hepatitis C

Kadar standard hepatitis C dalam saiz 40 hingga 60 nm, dengan kebanyakan lipid, kerosakan hati yang disebabkan oleh penyakit akut atau kronik penyakit ini. Hepatitis C, iaitu, RNA virus keluarga Togaviridae, sangat tahan, disebarkan melalui pemindahan darah atau penggunaan barang tidak steril, bekalan kebersihan yang tidak betul, dan lain-lain. Analisis kuantitatif membolehkan anda memeriksa darah dan mengenal pasti struktur genetik virus yang dijangkiti.

Untuk hepatitis C dan genotipnya ditentukan, menjalankan analisis kuantitatif. Bergantung kepada penganalisis yang boleh menentukan tiga tahap kejadian virus RNA.

Subtipe boleh menghasilkan pelbagai modifikasi, jadi kekhususan dan kepekaan penganalisis mesti seratus peratus. Di samping mengesan penyakit itu dalam pesakit, perlu menentukan tahap keterukannya. Sesetengah makmal tidak mempunyai semua data mengenai penyahkodan virus RNA, terdapat kemungkinan tindak balas positif palsu.

Penyelidikan mengenai hepatitis C akan lebih tepat apabila mengkaji petunjuk ini:

Menarik perhatian kepada hasil penunjuk ini dan keadaan umum badan, hasilnya dipaparkan menunjukkan tahap jangkitan, bentuk, dan jumlah sel-sel hepatitis C dalam darah. Ini menyumbang kepada proses penyembuhan dan keberkesanan terapi antiviral.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Reaksi rantai multi-dimensi (PCR) memberi idea tentang bilangan zarah DNA dalam analisis pesakit yang diambil, dengan tepat mengenal pasti agen berjangkit.

Agen penyebab penyakit berjangkit boleh berlaku. Jangkitan hati, seperti hepatitis C, boleh dirawat pada masa kita apabila ia dikesan pada masa yang tepat. Jika virus disyaki, analisis PCR dilakukan.

Memandangkan sekian lama gejala virus dapat bertopeng, seseorang mungkin tidak merasakan permulaan penyakit ini. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh dalam 60-70% kes, hepatitis C dikesan, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis ini dijalankan dalam tempoh tertentu untuk menentukan peringkat penyakit dan menetapkan rawatan yang sesuai. Untuk melakukan tanpa itu, tanpa memohon semua prosedur ini, adalah mungkin, diberi vaksin terhadap hepatitis.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Terdapat analisis kualitatif dan kuantitatif. Intipati pertama ialah ia menentukan kehadiran jangkitan dalam darah. Dan ini bermakna virus menjangkiti sel-sel hati yang sihat. Apabila antibodi kepada hepatitis C ditemui dalam pesakit, ujian kualitatif dilakukan dengan segera. Kadar yang harus diberikan adalah "tidak dikesan dalam darah". Apabila menentukan kepekatan virus, ada keperluan untuk mengetahui kepekaan sistem diagnostik, kerana orang yang menjalani terapi antiviral boleh melakukan analisis. Tahap kepekaan penganalisis tidak boleh kurang daripada 50 IU / ml.

Apabila virus dikesan, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, beban virus, yang menentukan kepekatan virus dalam darah dan keparahan penyakit.

RNA virus, yang dalam jumlah tertentu darah, ditakrifkan sebagai norma pada kadar 1 ml setiap 1 sentimeter padu. Selepas mengukur beban virus, adalah mungkin untuk menilai tahap jangkitan persekitaran yang masih tidak dijangkiti. Sebaik sahaja kepekatan hepatitis C meningkat dalam darah, perlu untuk mengasingkan diri dari alam sekitar.

Adalah penting pada peringkat awal untuk mengesan tahap konsentrasi hepatitis, untuk menentukan kadar pemulihan. Sekiranya kadar hepatitis C melebihi melebihi 800 ribu IU / ml, ia dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan sehingga satu juta kritikal. Jika jarak kuantitatif kurang daripada 400 ribu IU / ml, dianggap jangkitan orang-orang di sekitar akan berkurangan. Angka ini menjelaskan bahawa hepatitis C hadir dalam tubuh dalam dos yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif zarah RNA virus, jadi ia dilantik semula beberapa kali untuk ketepatan diagnosis.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pesakit adalah mengenal pasti tahap jangkitan kepada orang lain.

Keputusan analisis PCR:

1. Jawapan positif bermakna jangkitan dalam bahan biologi. Analisis ini dapat menentukan bilangan sel yang dijangkiti.
2. Jawapan negatif menunjukkan ketiadaan jangkitan, yang dicari dengan teliti di dalam badan.

Kaedah penentuan kuantitatif hepatitis C adalah tepat dan bermaklumat, yang dilakukan pada peralatan yang mempunyai kepekaan tinggi. Memutuskan hasil analisis membolehkan anda mengetahui sama ada jangkitan dan kekhususannya, untuk melihat bilangan terkecil sel yang terinfeksi pada penganalisis yang sangat sensitif.

Keputusan palsu atau bertentangan jarang diberikan oleh analisis, lebih kerap ini berlaku dalam kajian immunoassay.

Virus Hepatitis C adalah virus yang mengandungi molekul RNA. Dia mampu mengelakkan tindak balas imun tubuh kerana kemampuannya bermutasi tinggi. Terdapat enam genotip utama virus dan banyak subtipe. Di rantau kita, genotip 1, 2 dan 3 kebanyakannya diedarkan.

Dalam 75-80%, penyakit menjadi kronik, yang menyebabkan fibrosis hati, suatu keadaan di mana tisu hati digantikan oleh tisu penghubung. Fibrosis, seterusnya, membawa kepada kanser atau sirosis. Cara utama penyebaran penyakit adalah melalui darah. Jika seseorang mempunyai petunjuk untuk ujian untuk hepatitis C, dia akan diberi dua ujian asas. Antibodi kepada virus ditentukan, dan jika tidak ada, ia percaya bahawa dia tidak mempunyai hepatitis. Jika kehadiran antibodi kepada virus hepatitis dikesan dalam darah, analisis PCR dilakukan.

RNA oleh kaedah ini ditentukan dalam darah dalam tempoh 10-12 hari selepas jangkitan dan menunjukkan bahawa virus itu secara aktif mereplikasi dalam badan. Dalam tempoh ini, adalah mustahil untuk mengesan virus dengan cara yang lain, kerana ia masih tidak menghasilkan antibodi tertentu dan kerosakan hati tidak dapat dilihat dengan ujian biokimia dan biopsi.

Pelbagai kajian PCR

Analisis reaksi rantai polimerase mempunyai kelebihan tertentu:

1. Dalam kajian ini, virus itu sendiri ditentukan, dan bukan produk metaboliknya. Dalam kes ini, adalah mungkin untuk menentukan jenis patogen.
2. Teknik ini mempunyai kekhususan yang tinggi kerana fakta bahawa hanya seksyen DNA tertentu yang sedang dikaji, kebarangkalian keputusan yang salah akan berkurangan.
3. Ia mempunyai sensitiviti yang sangat tinggi, bahkan ditentukan jumlah minimum virus dalam darah.

Terdapat dua kaedah utama untuk menguji darah untuk hepatitis C menggunakan PCR: analisis kualitatif dan kuantitatif PCR. Kaedah kualitatif digunakan untuk menentukan sama ada virus hadir. Sesiapa yang mempunyai antibodi untuk hepatitis telah dikesan dalam darah, analisis seperti itu dijalankan. Hasilnya hanya boleh terdiri dari dua jenis: "dikesan" dan "tidak dikesan", nilai terakhir dianggap sebagai norma.

Hasil ujian yang positif bermaksud bahawa serpihan RNA virus dijumpai dalam sampel, yang, pada gilirannya, menunjukkan bahawa orang itu dijangkiti hepatitis. Dalam kes keputusan negatif, dua pilihan adalah mungkin: tiada jangkitan atau kepekatannya begitu rendah sehingga tidak dapat dikesan oleh teknik ini.

Kaedah kuantitatif berbeza daripada bahan penyelidikan, dalam tugas dan petunjuknya. Tidak semua pesakit dengan hepatitis menjalani analisis sedemikian. Dia, seperti yang lain, mempunyai matlamat tertentu. Penentuan beban virus atau analisis kuantitatif PCR untuk RNA virus digunakan:

• untuk penentuan RNA virus dalam darah dan diagnosis "hepatitis virus";
• untuk meramalkan kronik hepatitis dan perjalanan penyakit;
• untuk memantau rawatan antiviral dan memutuskan sambungan, pengurangan atau perubahan dalam taktik rawatan.

Kajian ini dilakukan dengan adanya tanda-tanda seperti berikut:

• Hepatitis C dikesan oleh kajian kualitatif dan antibodi dikesan dalam darah;
• dengan hepatitis bercampur;
• jika terapi antiviral dirancang;
• semasa dan selepas rawatan untuk hepatitis C;
• dengan kehadiran hepatitis C. kronik dan akut

Ujian ini dijalankan untuk menganggarkan bilangan unit virus dalam jumlah darah contoh 1 cm³ atau 1 ml. Keputusan diberikan dalam nombor. Petunjuk yang digunakan: IU / ml, yang bermaksud unit antarabangsa setiap mililiter dan salinan per ml, bilangan salinan RNA dalam 1 ml sampel. Semakin tinggi penunjuk kuantitatif analisis, semakin besar kemungkinan penyebaran virus itu ke orang lain.

R-DNA adalah kaedah DNA bercabang. Kaedah yang lebih mudah dan murah. Digunakan untuk lebih banyak sampel, mempunyai kepekaan yang rendah, dari 500 IU / ml. Dengan kepekaan sedemikian, ada peluang untuk tidak mengenal pasti virus itu, walaupun ia ada dalam darah.

TMA adalah kaedah penguatan transkripsi. Teknik ini mengesan asid nukleik dalam darah. Ia mempunyai kos rendah dan kepekaan yang tinggi, dari 5-10 IU / ml. Teknik yang agak baru yang membolehkan anda mempercepat dan mengurangkan kos proses ujian.

Hasil analisis kuantitatif definisi virus RNA, yang disampaikan oleh makmal, ditafsirkan sebagai berikut: