Penentuan gangguan metabolisme pigmen adalah kepentingan diagnostik dari dua sudut pandangan: penilaian keadaan fungsional sel-sel hepatic dan pembezaan pelbagai jenis penyakit kuning (hepatic, suprahepatic, dan subhepatic).
Kajian-kajian Talafant (1956) dan Schmidt (1956) dan kerja Billing, Lathe (1958) dan Bollman (1959), yang menggunakan kaedah kromatografi untuk mengkaji bilirubin, memungkinkan untuk mengetahui tahap individu metabolisme pigmen. Tiga bentuk bilirubin yang berbeza ditentukan oleh kromatografi kertas: bilirubin bebas (tidak berkaitan dengan asid glucuronic), bilirubin monoglucuronide dan bilirubindiglucuronide *. Bilirubin istilah "langsung" dan "tidak langsung" sepatutnya ditinggalkan seolah-olah mereka tidak menunjukkan intipati proses menukar bilirubin. Menurut konsep moden, bilirubin bebas, yang terbentuk dalam RES, dikaitkan dengan albumin dan beredar dalam bentuk kompleks albumin-bilirubin dalam darah dan memasuki hati. Di dalam sel Kupfer, kompleks yang rosak, bilirubin bebas yang tidak larut memasuki sel hati - hepatosit. Dalam hepatosit dengan penyertaan sistem transferase, bilirubin dihubungkan dengan asid glukuronik. Di- dan monoglucuronides yang larut dalam air dipindahkan dari sel-sel hati ke kapilari hempedu. Peningkatan bilirubinemia - jaundis - mungkin disebabkan oleh: 1) peningkatan dalam pembentukan bilirubin bebas dalam reticuloendothelium (hemolytic atau suprahepatic jaundice); 2) obturation saluran empedu (subhepatic, jaundice obstructive); 3) kerosakan pada sel hati dengan pembentukan bilirubinglucuronides yang merosakkan dan pembebasan mereka ke dalam lumen kapilari biliary (jaundice hepatic); 4) kekurangan kongenital sistem transferase sel hati dengan pembentukan bilirubing glukuronide terjejas (penyakit kongenital tanpa hemolitik).
Dalam individu yang sihat, hanya pecahan bilirubin percuma ditentukan dalam kromatogram. Dengan kekalahan parenchyma hati, bersama dengan peningkatan jumlah bilirubin percuma, terdapat pecahan glukuronida bilirubin. Ini menunjukkan kehadiran sintesis glukuronide dalam hati dan kemasukan semula zarah yang terhasil ke dalam aliran darah. Kajian 3. D. Schwartzman (1961) menunjukkan hubungan antara tahap luka parenchyma hati dan perubahan isi kandungan bilirubin pecahan dalam darah.
Penyakit kuning berlebihan dicirikan dengan peningkatan dalam jumlah bilirubin terutamanya disebabkan oleh kebebasan. Kadang-kadang dengan penyakit kuning hemolisis, sedikit bilirubin monoglucuronide muncul, yang menunjukkan pelanggaran fungsi sel hati. Terdapat perubahan yang sama dalam ketidak-hemolitik kongenital dan beberapa jenis penyakit kuning lain yang berkaitan dengan pembentukan glukuronida terjejas disebabkan kekurangan sistem pemindahan.
Dalam penyakit kuning mekanikal, kajian kromatografi mendedahkan peningkatan jumlah ketiga-tiga pecahan bilirubin, tetapi, berbeza dengan penyakit Botkin, tidak ada sifat kitaran ciri penyakit dalam penampilan dan kehilangan pecahan di-dan monoglucuronide. Penampilan pecahan ini dalam jaundis obstruktif disebabkan oleh pelanggaran aliran keluar hempedu dengan sintesis berterusan glukuronides.
Sebagai ujian untuk menilai fungsi hati dalam bidang metabolisme pigmen, bersama dengan penentuan darah bilirubin total dan pecahannya, bilirubin dalam empedu, urobilin dalam air kencing dan stercobilin dalam tinja ditentukan.
Di hempedu, bilirubin dijumpai dalam bentuk glukuronida. Kuantiti dalam kandungan duodenal bervariasi secara mendalam dalam bahagian individu hempedu, kepekatan berkurangan dengan peningkatan jumlah empedu. Nisbah jumlah mono- dan diglucuronid dalam empedu individu sihat adalah 1: 3. Kajian kromatografi kandungan duodenal pesakit dengan penyakit Botkin menunjukkan penurunan seragam dalam kedua-dua pecahan bilirubin sambil mengekalkan nisbah normal mereka; apabila pemulihan meningkat, pembebasan kedua-dua mono- dan diglucuronide meningkat (3. G. Bezkorovainaya, 1964).
Langkah seterusnya dalam pertukaran bilirubin adalah pembentukan badan urobilin, yang ditentukan dalam urin dalam bentuk I-urobilinogen (mezobilubinogen), D-urobilinogen dan L-urobilinogen (produk akhir perubahan bilirubin). Urobilinigen urin segar cepat mengoksida ke urobilin yang sepadan.
Mengenai persoalan tempat dan mekanisme pembentukan badan urobilin dari bilirubin, pada masa ini terdapat dua teori: usus klasik dan dualistik. Mengikut teori klasik, transformasi bilirubinglyukuronida dalam mezobilubrubinogen dan urobilinogen berlaku di kolon di bawah pengaruh bakteria. Sebilangan kecil ia diserap, melalui sistem vena portal memasuki hati dan dikeluarkan semula dalam hempedu, dan sebahagiannya dimusnahkan. Urobilinogen tidak diserap di bawah pengaruh mikroba mengalami perubahan selanjutnya dan menjadi stercobilinogen. Sebilangan kecil stercobilinogen diserap ke dalam kolon atas dan masuk melalui vena portal ke hati (dan dimusnahkan di sana), manakala dari kolon distal, stercobilinogen, diserap, memasuki urat hemoroid ke dalam peredaran dan diekskresikan dalam air kencing. Bahagian terbesar sterkobilinogen diekskresikan dalam tinja, bertukar menjadi sterkobilin.
Menurut teori dualisme Baumgartel, penukaran bilirubin ke urobilinogen berlaku di usus dan di saluran empedu: proses transformasi bermula pada bahagian bawah saluran empedu dan pundi hempedu di bawah pengaruh enzim sel. Oleh itu, kedua-dua bilirubin dan urobilinogen memasuki usus kecil, yang terakhir diserap, dan melalui sistem vena portal ia memasuki hati dan hancur di sana. Bilirubin di bawah pengaruh mikroflora kolon menjadi mezobilubirubin, dan kemudian menjadi stercobilinogen. Kebanyakan stercobilinogen diekskresikan di dalam tinja, sebahagian kecil diserap dan melalui vena hemoroid memasuki peredaran sistemik dan diekskresikan dalam air kencing.
Penentuan tubuh urobilin dan stercobiogenogen dalam air kencing dan tinja adalah nilai diagnostik yang hebat bukan sahaja untuk mengesan lesi parenkia hati, tetapi juga untuk menentukan jenis penyakit kuning.
Klinik ini sering menggunakan teknik yang menentukan jumlah stercobilin, stercobilinogen, semua bentuk urobilinogen dan urobilin. Istilah "urobilin" merujuk kepada bahan yang terkandung di dalam air kencing, istilah "stercobilin" - yang terdapat dalam tinja **.
Sekiranya parenchyma hati terjejas, salah satu daripada gejala awal penyakit ini adalah peningkatan jumlah urobilin dalam air kencing.
Dalam jaundis obstruktif, kehadiran urobilin tertentu dalam air kencing dalam hal penyumbatan lengkap saluran empedu biasa dijelaskan oleh pembentukannya di dalam pundi hempedu dan intrahepatic passages. Kemungkinan ini diiktiraf dalam keadaan ini oleh penyokong teori klasik, yang menjelaskan fakta ini dengan kemunculan mikroflora dalam saluran empedu semasa stasis hempedu. Dengan penyumbatan berterusan saluran empedu, urobilinuria mungkin meningkat disebabkan oleh kerosakan pada sel-sel hati.
Untuk diagnosis pembezaan jenis penyakit kuning, kaedah diagnostik yang boleh diakses dan berharga adalah untuk menentukan nisbah jumlah urobilin dalam air kencing dan stercobilin dalam tinja.
Dalam ekskresi harian normal stercobilin dengan feses berkisar antara 100-300 mg, melebihi jumlah urobilin dalam air kencing sebanyak 10-30 kali.
Apabila penyakit kuning akibat hepatik disebabkan oleh penurunan bilirubin dengan hempedu, jumlah stercobilin dalam najis berkurangan; pada masa yang sama, urobilinuria meningkat disebabkan oleh pelanggaran transformasi tubuh urobilin dan stercobilinogen dalam hepatosit. Nisbah urobilin / stercobilin, sama dengan norma 1: 10-1: 30, berubah menjadi 1: 5-1: 1; dalam lesi yang teruk pada hati, pekali urobilin diputarbelitkan, mencapai 3: 1, iaitu, uretin harian urin dalam air kencing melebihi jumlah stercobilin dalam tinja.
Dengan penyakit kuning hemolisis akibat hempedu pleochromia, jumlah stercobilin meningkat dalam beberapa kes kepada 10,000 mg. Nisbah jumlah urobilin untuk stercobilin dapat mencapai 1: 300-1: 1000.
Penentuan koefisien urobilin adalah kaedah yang berharga dalam diagnosis penyakit kuning hemolisis, tetapi perubahan karakteristik dalam pekali ditentukan hanya semasa permulaan krisis hemolitik.
Peranan hati dalam metabolisme pigmen
Pertimbangkan hanya pigmen hemochromogenic yang terbentuk di dalam tubuh semasa pecahan hemoglobin (sehingga tahap yang lebih rendah semasa pecahan myoglobin, cytochrome, dan lain-lain). Pemisahan hemoglobin berlaku di dalam sel-sel makrofag, khususnya di sel reticuloendothelial stellate, serta di histiocytes dari tisu penghubung organ apa pun.
Seperti yang telah disebutkan (lihat Bab 13), peringkat awal dalam pemisahan hemoglobin adalah pemecahan jambatan mete tunggal dengan pembentukan verdoglobin. Selanjutnya, atom besi dan protein globin dipisahkan dari molekul verdoglobin. Akibatnya, biliverdin dibentuk, yang merupakan rangkaian empat cincin pirol yang dihubungkan oleh jambatan metana. Kemudian biliverdin, pulih, berubah menjadi bilirubin - pigmen yang disembur dari hempedu dan oleh itu dipanggil pigmen empedu. Bilirubin yang dihasilkan dipanggil bilirubin secara tidak langsung (tidak bersambungan). Tidak larut dalam air, memberikan tindak balas tidak langsung dengan diazoreaktif, iaitu. reaksi berlaku hanya selepas prarawatan dengan alkohol.
Di dalam hati, bilirubin mengikat (konjugasi) dengan asid glucuronic. Reaksi ini dipangkin oleh enzim UDP-glucuronyltransferase, sementara asid glucuronic bereaksi dalam bentuk aktif, iaitu. dalam bentuk UDFGK. Bilirubin yang dihasilkan glukuronide dipanggil bilirubin langsung (konjugated bilirubin). Ia larut dalam air dan memberikan tindak balas langsung dengan diazoreaktif. Kebanyakan bilirubin mengikat kepada dua molekul asid glucuronik, membentuk bilirubin diglucuronide:
Rajah. 16.4. Pertukaran biasa badan urobilinogenik (skim).
Dibentuk di bilirubin langsung hati, bersama-sama dengan bahagian yang sangat kecil bilirubin tidak langsung dikeluarkan dalam hempedu ke dalam usus kecil. Di sini, asid glukuronik dibuang dari bilirubin langsung dan pemulihannya terjadi dengan pembentukan mezobilubin dan mezobilinogen (urobilinogen) berturut-turut. Adalah dipercayai bahawa sekitar 10% bilirubin dikurangkan menjadi mesobliogenogen dalam perjalanan ke usus kecil, iaitu dalam saluran empedu extrahepatic dan pundi hempedu. Dari usus kecil, sebahagian daripada mezobilinogen yang terbentuk (urobilinogen) diserap melalui dinding usus, memasuki vena portal dan dipindahkan oleh aliran darah ke hati, di mana ia berpecah sepenuhnya untuk di- dan tripyrroles. Oleh itu, mesosynogen tidak memasuki peredaran darah dan air kencing umum.
Jumlah utama mesobilinogen dari usus kecil memasuki kolon dan dipulihkan di sini untuk stercobilinogen dengan penyertaan mikroflora anaerob. Dibentuk stercobilinogen di bahagian bawah kolon (terutamanya di rektum) dioksidakan menjadi sterko-bilina dan diekskresikan dalam tinja. Hanya sebahagian kecil daripada stercobilinogen diserap ke dalam sistem vena cava inferior (ia mula memasuki vena hemoroid) dan kemudian diekskresikan dalam air kencing. Akibatnya, dalam urin manusia normal mengandungi kesan stercobilinogen (setiap hari ia dikumuhkan dalam air kencing hingga 4 mg). Malangnya, sehingga baru-baru ini dalam amalan klinikal, stercobilinogen, yang terkandung di dalam urin biasa, terus dipanggil urobilinogen. Dalam rajah. 16.4 secara skematik menunjukkan cara pembentukan badan urobilinogenik dalam tubuh manusia.
Istilah urinilin urin telah berakar dalam amalan klinikal. Istilah ini harus difahami sebagai derivatif bilirubin (biliru-binoid), yang terdapat di dalam air kencing. Reaksi yang positif terhadap urobilinogen mungkin disebabkan peningkatan kandungan ini atau bilirubinoid dalam air kencing dan, sebagai peraturan, pantulan patologi.
Penentuan klinikal bilirubin dalam darah (umum, tidak langsung dan langsung), serta urobilinogen urin, adalah penting dalam diagnosis pembezaan jaundis pelbagai etiologi (Rajah 16.5). Dalam penyakit kuning hemolisis ("suprahepatic"), disebabkan peningkatan hemolisis sel darah merah dan pemusnahan hemoglobin, pembentukan secara intensif bilirubin tidak langsung berlaku dalam sistem reticuloendothelial (lihat Rajah 16.5, b). Hati tidak dapat menggunakan begitu banyak bilirubin tidak langsung, yang membawa kepada pengumpulannya dalam darah dan tisu. Dalam kes ini, di hati, peningkatan jumlah bilirubin langsung disintesis, yang dengan empedu memasuki usus. Dalam usus kecil, mezobilinogen terbentuk dalam jumlah yang meningkat dan seterusnya stercobilinogen. Bahagian yang diserap dari mezobilinogen digunakan oleh hati, dan sterocobilinogen menyerap dalam usus besar diekskresikan dalam air kencing. Oleh itu, dalam kes-kes yang biasa, penyakit kuning hemolisis dicirikan oleh petunjuk klinikal dan makmal berikut: peningkatan kadar bilirubin total dan tidak langsung dalam darah, dalam air kencing - ketiadaan bilirubin (bilirubin secara tidak langsung tidak ditapis oleh buah pinggang) dan tindak balas positif urobilinogen air kencing stercobilinogen, dan dalam kes yang teruk - dan disebabkan oleh mezobilinogen, yang tidak digunakan oleh hati); nada kulit lemon-kuning (gabungan jaundis dan anemia); peningkatan dalam saiz limpa; najis berwarna terang.
Rajah. 16.5. Patogenesis bilirubinemia dalam pelbagai keadaan patologi (skim). a adalah norma; b - hemolisis; dalam - kesesakan dalam kapilari hempedu; d - merosakkan sel parenchymal hati; 1 - kapilari darah; 2 - sel hati; 3 - kapilari hempedu.
Apabila jaundis mekanikal (obstruktif, atau "subhepatic") (lihat Rajah 16.5, c) aliran keluar hempedu terganggu (penyumbatan saluran empedu yang biasa dengan batu, kanser kepala pankreas). Ini membawa kepada perubahan yang merosakkan hati dan kemasukan elemen hempedu (bilirubin, kolesterol, asid hempedu) ke dalam darah. Dengan halangan lengkap saluran empedu biasa, hempedu tidak masuk ke dalam usus, oleh sebab itu, pembentukan bilirubinoids dalam usus tidak terjadi, kotoran menjadi berubah warna dan reaksi urobilinogen urin negatif. Oleh itu, dengan penyakit kuning dalam obstruktif dalam darah, jumlah jumlah bilirubin meningkat (disebabkan langsung), kandungan kolesterol dan asid hempedu meningkat, dan dalam air kencing - paras bilirubin (langsung) yang tinggi. Ciri-ciri klinikal dari jaundis obstruktif adalah pewarnaan icterik yang terang pada kulit, najis berwarna, gatal-gatal pada kulit (kerengsaan endings saraf dengan asid hempedu yang disimpan di dalam kulit). Harus diingat bahawa dengan jaundis obstruktif jangka panjang dapat mengganggu hati, termasuk salah satu utama - detoksifikasi. Dalam kes ini, "kegagalan" sebahagian daripada bilirubin tidak langsung boleh berlaku, yang boleh mengakibatkan pengumpulannya dalam darah. Dalam erti kata lain, peningkatan dalam bilangan pecahan bilirubin tidak langsung dalam penyakit kuning obstruktif adalah tanda prognostik yang buruk.
Apabila penyakit parenkim ("hepatic") penyakit kuning (lihat Gambar 16.5, d), yang paling sering berlaku dalam lesi viral, membina proses keradangan dan merosakkan di dalam hati, yang mengakibatkan pencabulan fungsinya. Pada peringkat awal hepatitis, proses penangkapan dan bilirubin tidak langsung glukuronirovaniya dikekalkan, bagaimanapun, bilirubin langsung yang terbentuk dalam keadaan pemusnahan parenchyma hepatik sebahagiannya jatuh ke dalam peredaran sistemik, yang menyebabkan penyakit kuning. Pengeluaran hempedu juga pecah, bilirubin dalam usus mendapat kurang daripada biasa. Mezobilogen dibentuk kurang daripada biasa, dan jumlah yang lebih kecil diserap dalam usus. Walau bagaimanapun, walaupun mesobliogenogen kecil ini memasuki hati tidak diserap olehnya. Mesobilinogen, "mengelakkan", memasuki aliran darah, dan kemudian diekskresikan dalam air kencing, yang menentukan tindak balas positif urobilinogen. Jumlah stercobilinogen yang terbentuk juga berkurang, oleh itu kotorannya adalah hipokolik. Oleh itu, dengan penyakit kuning parenchymal, terdapat peningkatan jumlah darah bilirubin, terutamanya disebabkan langsung. Dalam najis mengurangkan kandungan stercobinogen. Reaksi urin urobilinogen adalah positif kerana pengambilan mezobilinogen. Perlu diingatkan bahawa dengan hepatitis progresif, apabila hati kehilangan fungsi detoksifikasi, sejumlah besar bilirubin tidak langsung terkumpul dalam darah. Selain itu, dengan keradangan hati yang diucapkan, "pembengkakan", mampatan kapilari dan salur hempedu boleh berlaku, kolestasis intrahepatik berlaku, yang memberikan ciri-ciri mekanikal penyakit parenchymal dengan gambaran makmal klinikal yang sesuai (najis acholic, kekurangan tindak balas kepada urobilinogen).
Dalam tab. 16.2 menunjukkan perubahan yang paling khas dalam petunjuk klinikal dan makmal untuk pelbagai jenis penyakit kuning.
Perlu diingatkan bahawa dalam praktiknya, jaundis mana-mana satu jenis dalam bentuk "tulen" jarang diamati. Kombinasi yang lebih biasa dari satu jenis atau yang lain. Oleh itu, dalam hemolisis teruk, pelbagai organ tidak dapat dielakkan, termasuk hati, yang dapat memperkenalkan unsur-unsur penyakit kuning parenchymal semasa hemolisis. Sebaliknya, jaundis parenchymal, sebagai peraturan, termasuk elemen mekanikal. Dengan jaundis obstruktif yang terhasil daripada memerah papilla duodenal utama (puting Vater) dalam kanser kepala pankreas, hemolisis tidak dapat dielakkan akibat keracunan kanser.
67. Kajian metabolisme pigmen di hati, nilai diagnostik.
Pencerminan metabolisme pigmen di hati adalah kandungan dalam darah (serta dalam najis dan air kencing) bilirubin dan produk pemulihannya. Pengenalpastian gangguan metabolisme pigmen memberikan idea keadaan fungsional geatosit, dan juga membantu untuk membezakan pelbagai jenis penyakit kuning.
pembentukan bilirubin berlaku dalam sel-sel reticuloendothelial sumsum tulang, kelenjar limfa, tetapi terutamanya limpa, dan juga di dalam hati seperti bintang retikuloendoteliotsitah (Gamb. 117). Bilirubin terbentuk daripada hemoglobin, yang dikeluarkan semasa pecahan fisiologi sel darah merah; pada masa yang sama, hemoglobin merosot ke dalam badan protein globin dan heme yang mengandung besi. Dalam sel-sel sistem reticuloendothelial, bilirubin bebas terbentuk daripada heme yang dilepaskan, yang mengalirkan darah dalam hubungan yang tidak stabil dengan protein albumin. Kandungan bilirubin bebas dalam darah adalah 8.55-20.52 μmol / l (0.5-1.2 mg%). Kebanyakannya memasuki hati, di mana ia dilepaskan dari persatuannya dengan albumin dan, dengan penyertaan enzim hati, mengikat kepada asid glucuronic, membentuk sebatian larut air, bilirubingenu-kuronid (mono- dan diglucuronide, atau terikat bilirubin), yang dieksklusi ke dalam saluran empedu.
Akibatnya, hati terlibat dalam pertukaran bilirubin, melaksanakan fungsi berikut: 1) pembentukan bilirubin dalam sel reticuloendothelial stellate; 2) memerangkap bilirubin bebas dari darah; 3) pembentukan sebatian bilirubin dengan asid glucuronic; 4) bilirubing glucuronide secretion ke hempedu (bilirubin terikat).
Dalam darah orang yang sihat hanya pigmen percuma. Dalam penyakit yang disertai dengan pelanggaran atau herotan pembuangan normal bilirubin hempedu, ia memasuki aliran darah, dan kemudian kedua-dua pigmen beredar di dalamnya (mereka boleh ditentukan secara berasingan).
Sampel kualitatif Van den Berg memberikan maklumat indikatif: jika ternyata tidak langsung, kita dapat menganggap hanya bilirubin bebas dalam darah; jika ternyata langsung, maka tidak diketahui dalam nisbah apa yang kedua-duanya adalah pigmen - tindak balas langsung positif kehadiran jumlah bilirubin percuma. Pada masa ini, mereka menggunakan pengiraan kuantitatif berasingan pecahan bilirubin. Dalam majoriti kajian yang dijalankan untuk tujuan ini, diazoreaktiv yang sama digunakan untuk ujian kualitatif (diazoreaktif I: 5 g asid sulfanilic dan 15 ml asid hidroklorik yang kuat dibubarkan dalam air suling dan isipadu diselaraskan kepada 1 l dengan air sulingan, 0.5% diazoreaktan larutan natrium nitrit; campuran diazine: 10 ml diazoreaktif I + 0.25 ml diazoreaktif II).
Ujian kualitatif: hingga 0.5 ml serum dicurahkan 0.25 ml campuran diazo. Dalam kes pemutihan serum dalam masa kurang dari 1 minit, tindak balas dianggap cepat langsung dan menunjukkan adanya bilirubin terikat dalam serum. Jika kemerahan berlaku secara perlahan (dalam masa 1 - 10 min), yang berlaku apabila bilirubin terikat yang agak kecil dilampirkan secara percuma, tindak balas itu dianggap tertunda langsung. Sekiranya tidak ada kemerahan selama lebih daripada 10 minit, tindak balas langsung dianggap negatif. Sekiranya anda ingin memastikan bahawa warna kuning serum tersebut bergantung kepada bilirubin, dua kali ganda jumlah alkohol ditambah, campuran dan penapis diazo ditambah ke dalam penapis, hasilnya cecair berubah menjadi merah jambu (reaksi tidak langsung). Terdapat banyak kaedah untuk menentukan kuantitatif pecahan bilirubin. Sesetengahnya didasarkan pada hakikat bahawa bilirubin bebas dipengaruhi oleh bahan-bahan seperti kafein, yang digunakan dalam kaedah Endrashik, metil alkohol, dan sebagainya yang paling biasa, bertindak seperti pemangkin, pemecut, memperoleh keupayaan untuk bertindak balas dengan diazoreaktan. Dalam bahagian pertama serum dirawat dengan pemecut, adalah mungkin untuk menentukan jumlah kandungan kedua-dua pecahan. Dalam bahagian lain, tanpa menambah pemecut, hanya pigmen terikat ditentukan. Mengurangkan pecahan terikatnya dari jumlah bilirubin, mereka akan mengenali pecahan percuma. Kaedah lain untuk penentuan berasingan pecahan bilirubin (kimia, kromatografi) adalah lebih kompleks.
Bilirubin percuma, tidak larut dalam air, tidak dikeluarkan oleh buah pinggang; selepas mengikat dengan asid glucuronic, ia menjadi larut dalam air apabila terkumpul di dalam darah - dengan jaundis subhepatic dan hepatik, ia dikesan dalam air kencing. Dalam saluran empedu, hanya terikat bilirubin (bilirubinglucuronide) dibebaskan. Dalam saluran empedu yang besar dan pundi hempedu (terutamanya semasa proses keradangan di dalamnya) dan seterusnya di dalam usus, sebahagian kecil bilirubin dipulihkan kepada urobilinogen, yang terletak di usus kecil atas dan memasuki hati dengan darah vena portal. A hati yang sihat adalah menangkap beliau dan mengoksidakan, tetapi badan sakit tidak dapat melaksanakan fungsi ini, urobilinogen pas ke dalam darah dan dikumuhkan dalam air kencing sebagai urobilin. Urobilinuria adalah tanda yang sangat halus dan awal kegagalan hati berfungsi. Selebihnya, sebahagian besar bilirubin dalam usus dipulihkan hingga stercobininogen. Bahagian utamanya dikumuhkan di dalam najis, berubah menjadi rektum dan keluar daripadanya (dalam cahaya dan udara) menjadi stercobilin, memberikan najis warna biasanya. Sebahagian kecil sterkobilinogen, diserap di bahagian bawah kolon, melalui vena hemoroid, melewati hati, memasuki peredaran umum dan diekskresikan oleh buah pinggang. Urin biasa sentiasa mengandungi kesan stercobilinogen, yang di bawah tindakan cahaya dan udara menjadi sterkobilin.
Kandungan tubuh urobilin dalam air kencing bertambah tidak hanya apabila fungsi hati tidak mencukupi, tetapi juga apabila hemolisis meningkat. Dalam kes ini, disebabkan pembebasan sejumlah besar hemoglobin, lebih banyak bilirubin terbentuk dan dirembes ke dalam usus. Peningkatan pengeluaran stercobilin menyebabkan peningkatan perkumuhan dalam air kencing. Sekiranya berlaku masalah pendarahan, apabila hempedu tidak masuk ke dalam usus sama sekali, tidak ada stekobilin di dalam tinja, tidak ada urobilin dalam air kencing. Apabila jaundis hepatoselular berkurangan, perkumuhan bilirubin dalam hempedu dan jumlah stercobilin dalam najis berkurangan, dan bilangan badan urobilinik dalam air kencing bertambah. Nisbah mereka, berjumlah 10: 1-20: 1, berkurangan dengan ketara, mencapai 1: 1 untuk lesi hati yang teruk. Dalam penyakit kuning hemolitik, pertumbuhan stercobilin dalam tinja jauh melebihi peningkatan kencing urin tubuh urobilinik. Nisbah mereka meningkat kepada 300: 1-500: 1. Nisbah produk pemulihan bilirubin dalam tinja dan air kencing jauh lebih penting dalam membezakan jaundis daripada nilai mutlak masing-masing.
Pertukaran pigmen.
Di bawah keadaan fisiologi, kepekatan bilirubin plasma adalah 0.3-1.0 mg / dL (5.1-17.1 μmol / l). Sekiranya paras bilirubin plasma adalah kira-kira 3 mg / dl (50 μmol / l), maka ia secara klinikal ditunjukkan dalam bentuk skalera jaundis, membran mukus dan kulit.
Bilirubin berasal dari pemusnahan enzimatik hemoglobin atau hemoprotein (cytochrome 450, cytochrome B5, catalase, tryptophanpyrrolase, myoglobin). Selepas dibebaskan enzim hemoglobin atau heme-hemoprotein oleh microsomal heme oxygenase dalam membran retikulum cytoplasmic oleh pengaktifan oksigen apabila terdedah kepada NADPH-cytochrome c reductase agidroksigema terbentuk, di mana oksigen diaktifkan memberi kesan ametinovye jambatan tetrapyrrole kitaran. Disebabkan ini, cincin protoporphyrin rosak dengan pelepasan karbon monoksida, dan kompleks biliverdin dengan besi muncul. Selepas hidrolisis, kompleks biliverdin besi dalam besi dan biliverdin IXA oleh biliverdinreduktazy cytosol dipulihkan cincin methine pusat di biliverdin biliverdin IXa2.Poskolku tiga enzim (gemoksinaza dan microsomal NADPH-cytochrome c reductase dan cytosol biliverdinreduktaza), yang menjadi pemangkin kepada pengeluaran bilirubin dari heme, dalam bentuk kompleks enzimatik pada permukaan retikulum endoplasma, biliverin pada kompleks ini dikembalikan kepada bilirubin.
Sekitar 70% pigmen hempedal terbentuk setiap hari timbul daripada hemoglobin semasa pecahan sel darah merah dalam sistem reticulo-endothelial (di limpa, sumsum tulang dan di dalam hati).
Penglibatan hati dalam pengeluaran harian bilirubin adalah 10-37%, dan di dalam hati adalah sumber utama sitokrom microsomal, catalase, dan triptofanpirrolazu Mi- mitokondria plasma cytochrome b.Takzhe dikaitkan dengan hemoglobin haptoglobin, methemoglobin atau methemalbumin hepatik berkhidmat sebagai sumber bilirubin sejak hepatosit melihat komponen heme untuk pembentukan rubub bilubin.
Selepas konjugasi bilirubin, bilirubin glukuronasi, mungkin dengan bantuan pembawa, dirembeskan melalui membran tubula ke dalam hempedu. Bromsulfalein, bahan-bahan hijau dan radiasi indocyanan dari saluran empedu bersaing untuk sistem pengangkutan bilirubin dalam membran tubula hemisfera, yang mengikuti kinetika tepu. Asid hempedu, sebaliknya, disusun oleh sistem pengangkutan lain membran dari saluran empedu, ke dalam hempedu. Dalam saluran empedu dan di dalam usus, bilirubinglyukuronid disembur tidak diserap, tetapi melalui usus kecil dan dihidrolisiskan di bahagian terminal usus kecil dan usus besar dengan bantuan bakteria v-glucuronidase. Bilirubin dikurangkan bakteria kolon untuk urobilinogen dan sebahagiannya dioksidakan kepada urobilin dalam najis Kurang daripada 20% daripada setiap hari ditubuhkan pada urobilinogen kolon yang terlibat dalam kitaran enterohepatic: ia diserap dalam usus kecil, diangkut ke hempedu, manakala baki 10% berada di dalam peredaran periferal dan kemudian diekskresikan dalam air kencing. Dalam hemolisis, penyakit hati hepatoselular dan shunt portosystemik, urobilin diekskresikan dalam air kencing.
Pelajaran 7.2 Pertukaran pigmen. Biokimia hati
Pelajaran 7.2 Pertukaran pigmen. Biokimia hati.
-untuk mengkaji struktur kimia, komposisi dan fungsi hemoglobin;
-Tahap hemoglobin dalam darah;
-mengetahui komposisi hemoglobin pada orang-orang dari kumpulan umur yang berbeza;
-mengkaji proses sintesis dan pecahan hemoglobin, membentuk kriteria yang jelas untuk pembezaan biokimia jaundis;
-mengetahui kandungan darah bilirubin dan pecahannya;
-berkenalan dengan penentuan kuantitatif hemoglobin dalam darah dengan cara hemoglobincyanide;
-dapat menentukan kepekatan urobilin dalam air kencing menggunakan jalur ujian diagnostik "UBG-fan".
Barisan yang diperlukan
Dari kursus kimia bioorganik pelajar perlu tahu:
-definisi dan klasifikasi protein kompleks;
-struktur heme dalam hemoglobin;
-ciri protein globin dalam hemoglobin (ciri-ciri struktur kuarum).
Dari segi fisiologi seorang pelajar harus tahu:
-peranan biologi hemoglobin dan myoglobin.
Soalan untuk belajar sendiri
Biosintesis Heme, sumber besi, peraturan proses Pelanggaran biosintesis hemoglobin. Hemoglobinopathies. Anemia sel Sickle Katabolisme hemoglobin, penguraian heme - pembentukan bilirubin dalam sel RES. Struktur dan sifat bilirubin tidak langsung. Neutralisasi bilirubin dalam hati. Conjugated (langsung) bilirubin - mekanisme pembentukan, struktur, sifat perkumuhan bilirubin ke dalam usus dan kerosakan selanjutnya dalam usus: produk akhir katabolisme Gangguan bilirubin dalam metabolisme bilirubin (metabolisme pigmen): jaundis
Nilai diagnostik penentuan bilirubin dalam serum dan air kencing. Ubin urobilinogen
Bahagian praktikal pelajaran
Lab 1
Penentuan kuantitatif bilirubin dalam serum
Prinsip kaedah: diazoreaktif memberikan pewarnaan langsung dengan bilirubin merah jambu. Bilirubin tidak langsung boleh diterjemahkan ke dalam keadaan larut dengan menambah reagen kafein serum, yang meningkatkan keterlarutan pigmen ini dan membolehkan anda menentukannya dengan bantuan diazoreaktif. Kandungan total bilirubin serum adalah bilirubin total. Perbezaan antara bilirubin total dan langsung boleh digunakan untuk menentukan tahap bilirubin tidak langsung. Kekuatan warna penyelesaian yang diperoleh dengan menambahkan diazoreaktif kepada serum adalah berkadar terus dengan kepekatan bilirubin.
Kemajuan kerja: Tuang 0.5 ml serum ke dalam 3 tiub. Dalam 1 tiub ujian (bilirubin langsung) 1.75 ml nat. larutan, 0.25 ml diazoreaktan dan biarkan selama 10 minit. 1.75 ml reagen kafein dan 0.25 ml nat. penyelesaian. Selepas 10 minit, ukur ketumpatan optik sampel pada photocolorimeter terhadap air dalam cuvette pada 5 mm dengan penapis cahaya hijau (530 nm). 1.75 ml reagen kafein, 0.25 ml diazoreaktif dituangkan ke dalam 3 tiub ujian (jumlah bilirubin), dan secara fotometrik menentang air selepas 20 minit. Pengiraan dibuat mengikut jadual penentukuran. Cari kandungan bilirubin total dan langsung. Untuk menentukan kandungan bilirubin tidak langsung dari jumlah bilirubin tolak pembacaan bilirubin langsung. Faktor penukaran dalam unit SI (μmol / l) ialah 17,104.
Biasanya, jumlah bilirubin kandungan adalah 3.5-20.5 μmol / l, terikat - 25% (sehingga 7 μmol / l), bebas - 75% (sehingga 12 μmol / l).
Makmal 2
Penentuan kuantitatif urobilinogen dalam air kencing menggunakan jalur diagnostik "UBG-fan"
Prinsip kaedah: kaedah ini berdasarkan tindak balas gandingan azo garam diazonium yang stabil dengan urobilinogen dalam medium berasid. Di hadapan urobilinogen, zon reaktif mengubah warna menjadi merah jambu atau merah.
Kemajuan kerja: Zon reaktif pada jalur ujian diagnostik dibasahkan dengan air kencing di bawah kajian dan, selepas 30-60 saat, warna zon reaktif dibandingkan dengan skala warna.
Kepentingan praktikal kerja ini. Penentuan jumlah bilirubin dan pecahannya, serta bilirubin dan urobilinogen dalam air kencing, adalah penting untuk memahami mekanisme berlakunya jaundis pelbagai etiologi (hemolitik, parenkim, dan obstruktif).
Dalam penyakit kuning hemolisis, hiperbilirubinemia berlaku terutamanya disebabkan bilirubin tidak langsung (percuma).
Apabila penyakit kuning parenchymal berlaku pemusnahan sel hati, perkumuhan bilirubin langsung dalam kapilari bilier terganggu, ia memasuki darah, kepekatannya dalam peningkatan darah, dan kepekatan bilirubin tidak langsung, jenis campuran hiperbilirubinemia. Dalam air kencing, urobilinogen dan bilirubin (bilirubinuria) terbuka.
Dalam jaundis obstruktif, perkumuhan tulang belakang terganggu, yang membawa kepada peningkatan mendadak dalam kandungan bilirubin langsung dalam darah dan, sebagai akibat bilirubin dalam air kencing, bilirubinuria.
Ii. Kawalan ujian akhir mengenai topik "Biokimia darah. Pertukaran pigmen "
Pertukaran pigmen
Kira-kira 80% bilirubin yang tidak disokong (tidak langsung) diperolehi daripada hemoglobin usang, dengan kira-kira 35 mg bilirubin yang dihasilkan dari 1 g hemoglobin. Pemusnahan sel darah merah tua berlaku di limpa, sumsum tulang dan hati. Peranan utama dalam pemusnahan sel darah merah adalah makrofaj; 20% daripada bilirubin yang tidak disokong disintesis dari heme dari asal lain (erythroblast, reticulocytes, myoglobin, cytochrome, dan sebagainya). Ia tergolong dalam bilirubin shunt yang dipanggil.
Dalam masa satu hari, kira-kira 300 mg bilirubin disintesis. Bilirubin yang tidak disokong (bebas atau tidak langsung) tidak boleh larut dalam air, tetapi larut dalam lemak. Dalam orang yang sihat dewasa, pigmen terikat sepenuhnya kepada albumin (protein ligan pengangkutan). Dalam bentuk ini, ia tidak dapat mengatasi penghalang buah pinggang dan otak. Satu mol albumin mengikat dua tahi bilirubin. Dengan hiperbilirubinemia yang signifikan (lebih daripada 171.0-256.5 μmol / L, atau 10-15 mg / dL), albumin tidak mempunyai kuasa yang mencukupi, dan sebahagian daripada bilirubin yang tidak disokong adalah tidak terkawal. Begitu juga dengan hypoalbuminemia, dengan sekatan albumin oleh asid lemak dan ubat-ubatan (salicylates, sulfonamides, dan lain-lain). Dengan kehadiran bilirubin yang tidak disokong tidak dikaitkan dengan albumin, risiko peningkatan kerosakan otak.
Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, pemindahan glutathione juga telah diberi peranan utama dalam mengikat dan mengangkut bilirubin yang tidak disokong.
Bilirubin yang tidak disokong (bebas, tidak langsung), yang memasuki darah menjadi sinusoid melalui reseptor, ditangkap oleh hepatosit. Perlu diingatkan bahawa bilirubin yang tidak terkoneksi di bawah pengaruh cahaya mengalami perubahan - photoisomers dan siklobilirubin terbentuk, yang dapat dibebaskan dari hempedu.
Pengangkutan intracellular bilirubin yang tidak disambungkan biasanya mengikuti laluan tidak langsung, iaitu, kedua-dua sitoplasma dan GERL digunakan. Gerakan ini berlaku dengan penggunaan ligandin - protein pengangkutan X dan Y, serta glutathiotransferase. Melangkah bersama sistem GERL, bilirubin yang tidak bersambungan memasuki reticulum endoplasma lancar. Di sini dengan bantuan bilirubing glycosyltransferase yang konjugasi (sebatian) asid glucuronic dan bilirubin berlaku dan konjugated (lurus, terikat) bilirubin terbentuk.
Bilirubin konjugasi disambungkan kepada satu atau dua molekul asid glukuronik. Dalam kes pertama, bilirubin monoglucuronide (kira-kira 15% daripada jumlah bilirubin), dalam kes kedua bilirubindiglucuronide (kira-kira 85% daripada jumlah bilirubin). Monoglucuronide bilirubin mungkin sebahagiannya terbentuk di luar hati. Adalah diketahui bahawa diglucuronid hanya mempunyai asal hepatik. Bilirubin konjugated adalah larut air, tetapi tidak larut dalam lemak, boleh menembusi halangan buah pinggang. Jenis pigmen ini agak sedikit toksik kepada otak. Walau bagaimanapun, kepekatan stabil yang tinggi meningkatkan kepekaan buah pinggang untuk endotoksin. Lebih buruk daripada bilirubin yang tidak disokong, ia mengikat albumin serum.
Ditubuhkan pada retikulum endoplasma bilirubin lancar conjugated aktif diangkut ke membran hepatosit dan biliary selepas kos tenaga tertentu (terutamanya disebabkan oleh penukaran ATP) dikumuhkan dalam kapilari hempedu. Proses ini adalah komponen rembesan hempedu. Sebilangan kecil bilirubin konjugasi dipaparkan dalam plasma. Mekanisme penyingkiran ini (sebenarnya, refluks) belum cukup dipelajari.
Sistem konjugasi bilirubin dalam hati biasanya menggunakan kira-kira 2% daripada kapasiti hepatosit, perkumuhan - 10%.
Bilirubinglyukuronid dengan hempedu memasuki usus. Mikroba usus, terutamanya dalam kolon, menjalankan penyingkiran asid glucuronic dan pembentukan mezobilubin dan mezobilinogen.
Seterusnya datang pemulihan mezobilubin dan mezobilogen (urobilinogen). Sebahagian daripada mesobilinogen diserap dalam usus dan melalui vena portal memasuki hati, di mana ia sepenuhnya berpecah menjadi dipyrroles. Apabila parenchyma hati rosak, proses pemecahan mesobliogen terganggu, dan pigmen ini memasuki aliran darah umum, dan kemudian melalui buah pinggang ke dalam air kencing.
Kebanyakan mesobilisin dari usus kecil maju ke dalam kolon, di mana, dengan penyertaan mikroflora anaerob, ia dipulihkan menjadi stercobilinogen. Bahagian utama di usus yang lebih rendah dioksidakan dan menjadi sterkobilin. 10-250 mg stercobilin dikumuhkan setiap hari. Hanya sebahagian kecil stercobilinogen memasuki vena cava inferior melalui sistem urat hemoroid dan diekskresikan melalui buah pinggang melalui air kencing.
Di bawah urobilinuria membayangkan ekskresi urin urobilin. Urobilinoids termasuk urobilin (urobilinogen, urobilin) dan stercobilin (stercobilinogen, stercobilin) badan. Pembezaan mereka tidak tersebar luas dalam amalan klinikal. urobilinuria Urobilinogenuriya dan, dalam satu tangan, dan sterkobilinogenuriya sterkobilinuriya dan - di pihak yang lain, yang disebabkan oleh sebahagian besar bahan kimia yang sama yang terdapat dalam dua bentuk - dikurangkan dan teroksida.
Hiperbilirubinemia boleh berlaku terutamanya disebabkan oleh bilirubin unconjugated, kerana, sebagai contoh, dengan penyakit Gilbert (kekeluargaan bukan hemolitik hiperbilirubinemia atau pigmen steatosis), anemia hemolitik, beberapa bentuk hepatitis kronik. Satu lagi kumpulan yang besar ini dikaitkan dengan hiperbilirubinemia berfaedah meningkatkan kepekatan konyugi-rovainogo bilirubin dan berlaku semasa hepatitis akut (virus, alkohol, ubat-ubatan),, dalam exacerbations sirosis hati dan hepatitis kronik, dan juga dengan penyakit kuning obstruktif disebabkan oleh batu atau tumor saluran hempedu utama. Menentukan kandungan bilirubin yang konjugat dan tidak disokong adalah penting untuk diagnosis penyakit hati, serta memantau perjalanan mereka.
Hemoglobin katabolisme
Sel darah merah mempunyai jangka hayat yang pendek (kira-kira 120 hari). Di bawah keadaan fisiologi dalam badan dewasa, kira-kira 1 - 2 × 1011 eritrosit per hari dimusnahkan. Katabolisme mereka berlaku terutamanya dalam sel reticuloendothelial daripada limpa, nodus limfa, sumsum tulang dan hati. Dengan penuaan eritrosit, kandungan asid sialik dalam komposisi glikoprotein membran plasma berkurangan. Komponen karbohidrat yang diubah dari glikoprotein membran erythrocyte terikat oleh reseptor sel-sel RES, dan erythrocyte itu "direndam" di dalamnya oleh endositosis. Pecahan sel darah merah dalam sel-sel ini bermula dengan pecahan hemoglobin ke heme dan globin dan hidrolisis berikutnya oleh enzim lisosom dari bahagian protein hemoglobin.
A. Catabolisme heme
Reaksi pertama katabolisme heme berlaku dengan penyertaan enzim yang bergantung kepada NADPH
Rajah. 13-10. Peraturan sintesis reseptor transferrin. Dan - dengan kandungan besi rendah di dalam sel, protein sensitif besi mempunyai afinitas tinggi untuk mRNA IRE, yang mengkodekan protein reseptor transferrin. Penambahan protein mengikat besi ke mRNA IRE menghalang kemusnahannya oleh RNAase dan sintesis protein reseptor transferrin berterusan; B - Dengan kandungan besi yang tinggi dalam sel, pertalian protein besi yang mengikat kepada IRE menurun, dan mRNA tersedia untuk tindakan RNAase, yang menghidrolisisnya. Pemusnahan mRNA membawa kepada pengurangan sintesis reseptor transferrin protein.
hemoxygenase kompleks. Sistem enzim diselaraskan dalam membran ER, dalam bidang rantai pengangkutan elektron pengoksidaan microsomal. Enzim ini mempercepat pemisahan ikatan di antara dua cincin pirol yang mengandungi residu vinil - oleh itu, struktur cincin diturunkan (Rajah 13-11). Semasa tindak balas, linear tetrapir-roll - biliverdin (pigmen kuning) dan karbon monoksida (CO) - yang diperoleh daripada karbon kumpulan methenyl terbentuk. Heme menginduksi transkripsi gen hemoksigenase, yang benar-benar khusus kepada subjek.
Ion besi yang dikeluarkan oleh pecahan heme boleh digunakan untuk mensintesis molekul hemoglobin baru atau untuk mensintesis protein lain yang mengandungi besi. Biliverdin dikurangkan kepada bilirubin oleh enzim biliverdin reduktase yang bergantung kepada NADPH. Bilirubin dibentuk bukan sahaja dalam pecahan hemoglobin, tetapi juga dalam katabolisme protein lain yang mengandungi hem, seperti cytochromes dan myoglobin. Dengan keruntuhan 1 g hemoglobin, 35 mg bilirubin dihasilkan, dan kira-kira 250-350 mg bilirubin sehari dalam orang dewasa. Metabolisme bilirubin lebih lanjut berlaku di hati.
Rajah. 13-11. Kerosakan Heme. M - (-CH3) - kumpulan metil; B - (-CH = CH2) - kumpulan vinil; P - (-CH2-CH2-COOH) adalah residu asid propionik. Semasa tindak balas, satu kumpulan metil ditukar kepada karbon monoksida dan, oleh itu, struktur cincin diturunkan. Biliverdin yang dibentuk oleh reduktase biliverdin ditukar kepada bilirubin.
Metabolisme B. bilirubin
Bilirubin, yang terbentuk dalam sel RES (limpa dan sumsum tulang), tidak larut dalam air, diangkut oleh darah dalam kombinasi dengan albumin protein plasma. Bentuk bilirubin ini dipanggil bilirubin tanpa banding. Setiap molekul albumin mengikat (atau 3) molekul bilirubin, salah satu yang terikat kepada protein yang lebih kukuh (afinitas yang lebih tinggi) daripada yang lain. Apabila pH darah beralih ke sisi asid (meningkatkan kepekatan badan keton, laktat), pertuduhan, perubahan pengesahan albumin, dan pertalian untuk bilirubin berkurang. Oleh itu, bilirubin terikat albumin mungkin dipindahkan
dari tapak mengikat dan membentuk kompleks dengan kolagen matriks ekstraselular dan lipid membran. Sebilangan sebatian dadah bersaing dengan bilirubin untuk pertalian tinggi, pusat albumin pertalian yang tinggi.
Pengambilan Bilirubin oleh sel-sel hati parenchymal
Kompleks albumin-bilirubin, yang disampaikan dengan aliran darah di hepatHb, memisahkan permukaan membran plasma hepatosit. Bilirubin yang dikeluarkan membentuk kompleks sementara dengan lipid membran plasma. penyebaran ringan bilirubin dalam hepatosit oleh dua jenis protein pembawa: ligandina (ia menyampaikan sejumlah utama bilirubin) dan Z. protein Aktiviti pengambilan hepatocyte bilirubin bergantung kepada kadar metabolisme dalam sel.
Ligandin dan protein Z juga dijumpai dalam sel-sel buah pinggang dan usus, oleh itu, jika fungsi hati tidak mencukupi, mereka dapat mengimbangi kelemahan proses detoksifikasi dalam organ ini.
Konjugasi bilirubin dalam ER yang licin
Dalam ER yang jernih hepatosit, kumpulan kutub, terutamanya dari asid glucuronic, menyertai (reaksi konjugasi) bilirubin. Bilirubin mempunyai 2 kumpulan karboksil, oleh itu ia boleh bergabung dengan 2 molekul asid glucuronik, membentuk baik
Rajah. 13-12. Bilirubing struktur diglucuronide (konjugated, "lurus" bilirubin). Asid glukuronik dilampirkan oleh ikatan ester kepada dua residu asid propionik untuk membentuk acylglucuronide.
konjugasi larut air - diglucuronide bilirubin (konjugated, atau langsung, bilirubin) (Rajah 13-12).
Donor glukuronik adalah UDP-glukuronat. Enzim spesifik, UDP-glucuronyltransferase (uridine diphosphorus glucuronyltransferase) memangkinkan pembentukan bilirubin mono- dan diglucuronid (Rajah 13-13). Sesetengah ubat, seperti phenobarbital (lihat Bahagian 12), bertindak sebagai inducer sintesis UDP-glucuronyltransferase.
Rembesan bilirubin dalam hempedu
Rembesan bilirubin konjugasi dalam hempedu mengikuti mekanisme pengangkutan aktif, iaitu. terhadap kecerunan tumpuan. Pengangkutan aktif mungkin adalah tahap pengurangan laju keseluruhan proses metabolisme bilirubin di hati. Biasanya bilirubin diglucuronid adalah bentuk utama perkumuhan bilirubin dalam empedu, tetapi mungkin.
Rajah. 13-13. Pembentukan bilirubindiglucuronide.
kehadiran sejumlah kecil monoglucuronide. Pengangkutan bilirubin konjugasi dari hati ke hempedu diaktifkan oleh ubat yang sama yang dapat mendorong konjugasi bilirubin. Oleh itu, boleh dikatakan bahawa kadar konjugasi bilirubin dan pengangkutan aktif bilirubing glucuronide dari hepatosit ke hempedu sangat saling berkaitan (Rajah 13-14).
B. Catabolisme bilirubin-diglucuronide
Di dalam usus, bilirubing glucuronides dihidrolisis oleh enzim bakteria spesifik β-glucuronidases, yang menghidrolisiskan hubungan antara bilirubin dan residu asid glucuronik. Bilirubin yang dikeluarkan oleh tindak balas ini di bawah tindakan mikroflora usus dipulihkan untuk membentuk sekumpulan tetrapyrrol yang tidak berwarna, urobilinogen (Rajah 13-15).
Dalam ileum dan usus besar, sebahagian kecil daripada urobilinogen sekali lagi diserap, dan memasuki darah vena portal di dalam hati. Bahagian utama urobilinogen dari hati dalam komposisi hempedu dikeluarkan ke dalam usus dan diekskresikan dengan najis dari badan, sebahagian urobilinogen
Rajah. 13-14. Bilirubin-urobilinigenovy kitaran di hati. 1 - katabolisme HB dalam sel reticuloendothelial daripada sumsum tulang, limpa, nodus limfa; 2 - pembentukan bentuk pengangkutan kompleks bilirubin-albumin; 3 - penerimaan bilirubin dalam peHB; 4 - pembentukan glukuronida bilirubing; 5 - rembesan bilirubin dalam komposisi hempedu dalam usus; 6 - katabolisme bilirubin di bawah tindakan bakteria usus; 7 - penyingkiran urobilinogen dengan najis; 8 - penyerapan urobilinogenov dalam darah; 9 - penyerapan urobilinogen oleh hati; 10 - sebahagian urobilinogen dalam perkumuhan darah dan buah pinggang dalam air kencing; 11 - sebahagian kecil urobilinogen yang dirembeskan dalam hempedu.
Rajah. 13-15. Struktur beberapa pigmen hempedu. Mesobilinogen adalah produk perantaraan katabolisme bilirubin dalam usus.
dari hati memasuki aliran darah dan dikeluarkan dengan air kencing dalam bentuk urobilin (Rajah 13-14). Biasanya, kebanyakan urobilinogen berwarna yang terbentuk dalam usus besar, di bawah pengaruh mikroflora usus, teroksidasi di rektum ke urobilin pigmen coklat dan dikeluarkan dengan najis. Warna najis disebabkan oleh kehadiran urobilin.
Sintesis asid hempedu daripada kolesterol dan peraturannya
Asid hempedu disintesis di hati dari kolesterol. Sesetengah asid hempedu dalam hati menjalani reaksi konjugasi - sebatian dengan molekul hidrofilik (glisin dan taurin). Asid hempedu memberikan pengemulsi lemak, penyerapan produk pencernaan dan beberapa bahan hidrofobik yang berasal dari makanan, seperti vitamin larut lemak dan kolesterol. Asid hempedu juga diserap, melalui urat yuridis sekali lagi masuk ke hati dan berulang kali digunakan untuk mengemulsi lemak. Laluan ini dipanggil peredaran enterohepatik asid hempedu.
Sintesis asid hempedu
Dalam badan, 200-600 mg asid hempedu disintesis setiap hari. Reaksi sintesis pertama - pembentukan 7-α-hydroxycholesterol - adalah pengawalseliaan. Enzim 7-α-hidroksilase, yang mengkatalisis tindak balas ini, dihalang oleh produk akhir, asid hempedu. 7-α-Hydroxylase adalah sejenis cytochrome P450 dan menggunakan oksigen sebagai salah satu substrat. Satu atom oksigen dari O2 dimasukkan ke dalam kumpulan hidroksil pada kedudukan 7, dan yang lain dikurangkan ke air. Reaksi sintesis seterusnya menyebabkan pembentukan 2 jenis asid hempedu: cholesterol dan chenodeoxycholic (Rajah 8-71), yang dipanggil "asid hempedu utama".
Konjugasi asid hempedu
Konjugasi - penambahan molekul terionis glisin atau taurin kepada kumpulan karboksil asid hempedu; meningkatkan sifat detergen mereka, kerana ia meningkatkan amphiphilicity molekul.
Konjugasi berlaku di sel-sel hati dan bermula dengan pembentukan bentuk aktif asid hempedu, derivatif CoA.
Kemudian taurine atau glisin ditambahkan, dan sebagai hasilnya 4 varian konjugasi terbentuk: taurocholic dan taurohenodeoxycholic, glycocholic atau glycohenodesoxycholic acid (mereka adalah pengemulsi lebih kuat daripada asid hempedu asal).
Konjugasi dengan gliserin terbentuk 3 kali lebih banyak daripada dengan taurin, kerana jumlah taurin adalah terhad.
Peredaran enterohepatik asid hempedu. Transformasi asid hempedu dalam usus
Produk hidrolisis lemak diserap terutamanya di bahagian atas usus kecil, dan garam asid hempedu - di dalam ileum. Sekitar 95% asid hempedu yang terperangkap dalam usus dikembalikan ke hati melalui vena portal, sekali lagi disembur ke hempedu dan digunakan semula dalam pengemulsikan lemak (Rajah 8-73). Laluan ini asid hempedu dipanggil peredaran enterohepatic. Setiap hari, 12-32 g garam asid hempedu diserap semula, kerana terdapat 2-4 g asid hempedu dalam badan, dan setiap molekul asid hempedu melewati curam ini 6-8 kali.
Sesetengah asid hempedu dalam usus terdedah kepada enzim bakteria yang melekatkan glisin dan taurine, serta kumpulan hidroksil pada kedudukan 7 asid hempedu. Asid hempedu tanpa kumpulan hidroksil ini dipanggil menengah. Asid hempedu sekunder: deoxycholic, yang terbentuk daripada cholesterol, dan lithocholic, yang terbentuk daripada deoxycholic, kurang larut, lebih perlahan diserap dalam usus, daripada asid hempedu utama. Oleh itu, asid hempedu sekunder terutamanya dikeluarkan dari najis. Bagaimanapun, asid hempedu sekunder yang diserap semula di dalam hati sekali lagi berubah menjadi primer dan terlibat dalam pengemulsian lemak. Pada siang hari, 500-600 mg asid empedu dihapuskan dari badan. Laluan perkumuhan asid hempedu serentak berfungsi sebagai laluan utama perkumuhan kolesterol dari badan. Untuk mengimbangi kehilangan asid hempedu dengan najis dalam hati, asid hempedu terus disintesis daripada kolesterol dalam jumlah yang sama dengan asid hempedu yang diperolehi. Akibatnya, kumpulan asid hempedu (2-4 g) kekal tetap.
Rajah. 8-73. Peredaran enterohepatik asid hempedu. Lingkaran cahaya - micelles hempedu; lingkaran hitam - campuran micelles empedu dan triacyl-gliserol produk hidrolisis.
Peraturan sintesis asid hempedu
Enzim pengawalseliaan untuk sintesis asid hempedu (7-α-hidroksilase) dan kolesterol (HMG-CoA reductase) dihalang oleh asid hempedu. Pada siang hari, aktiviti kedua-dua enzim berubah dengan cara yang sama, iaitu Peningkatan jumlah asid hempedu dalam hati membawa kepada pengurangan dalam sintesis kedua-dua asid hempedu dan kolesterol. Kembalinya asid hempedu ke hati semasa peredaran enterohepatic mempunyai kesan pengawalseliaan penting; gangguan peredaran membawa kepada pengaktifan 7-α-hydroxylase dan peningkatan dalam penangkapan kolesterol dari darah. Mekanisme ini mendasari salah satu cara untuk mengurangkan kepekatan kolesterol dalam darah dalam rawatan hiperkolesterolemia. Dalam kes ini, ubat yang menyerap kolesterol dan asid hempedu dalam usus dan mencegah penyerapan mereka digunakan.
Peraturan 7-α-hidroksilase dilakukan oleh mekanisme lain:
phosphorylation / dephosphosphorylation, dan bentuk phosphorylated aktif, tidak seperti HBG-CoA reductase;
perubahan jumlah enzim; kolesterol menggalakkan transkripsi gen, dan asid hempedu menindas. Hormon menjejaskan sintesis 7-α-hydroxylase: hormon tiroid mendorong sintesis, dan estrogen menindas. Kesan estrogen pada sintesis asid empedu menjelaskan mengapa cholelithiasis berlaku pada wanita 3-4 kali lebih kerap daripada lelaki.