Prinsip Mengira leukosit semasa mikroskop dalam sebilangan kuadrat ruang pengiraan dan pengiraan nombor mereka dalam 1 liter darah, dengan mengambil kira pengencangan darah dan jumlah ruang pengiraan.
Reagen: 3-5% larutan asid asetik, berwarna untuk pewarnaan nuklei leukosit dengan beberapa titisan larutan biru metilena. Penyelesaiannya mempunyai warna biru, boleh disimpan untuk masa yang lama.
Kursus penentuan. Dalam tiub ujian kering tuang 0.4 ml larutan asid asetik. 0.02 ml darah dikumpulkan dari jari (anda boleh menggunakan darah vena yang menstabilkan antikoagulan). Lap hujung pipet, kemudian tiub darah ke bahagian bawah tiub, campurkan, dail semula dan tiup campuran darah dan reagen (pipetting). Labelkan tiub dan biarkannya dikira. Simpan campuran darah dengan larutan asid asetik tidak disarankan lebih dari 2-4 jam.
Darah dicairkan dalam tiub ujian dengan asid asetik, dicampur dengan teliti dan isi dengan ruang pengiraan. Ruang penuh dibiarkan dalam kedudukan mendatar selama 1 minit untuk menyelesaikan sel darah putih. Tanpa mengubah kedudukan mendatar kamera, mereka meletakkannya di atas meja mikroskop dan pembesaran rendah (lensa mata 10 ×, kanta 8 ×) mengira sel darah putih dalam 100 dataran besar, yang sepadan dengan 1600 kecil.
Untuk ketepatan yang lebih besar, leukosit dikira merentasi grid dalam kotak besar, tidak dibahagikan kepada kotak kecil dan jalur, bermula dari sudut kiri atas grid. Untuk kontras yang lebih baik, tolak bidang pandangan, jatuhkan kondensor dan tutup apertur. Sel-sel yang terletak di dalam alun-alun dan berbaring di mana-mana dua baris dikira agar tidak mengira sel yang sama dua kali.
Pengiraan bilangan leukosit dilakukan mengikut formula:
di mana X ialah bilangan leukosit dalam 1 μl darah; dan - bilangan leukosit dalam 100 dataran besar; 20 - pencairan darah; 100 ialah bilangan dataran besar; 250 ialah faktor penukaran setiap 1 μl, kerana volum satu persegi besar ialah 1/250 μl (sebelah persegi ialah 1/5 mm, ketinggiannya adalah 1/10 mm).
Dalam praktiknya, untuk mengira bilangan leukosit dalam 1 μl darah, bilangan mereka dalam 100 kotak besar didarabkan dengan 50, dan dalam 1 liter - nilai yang dihasilkan didarabkan sebanyak 106.
Nota Apabila menghitung leukosit, ralat tidak dapat dielakkan dalam 6-8% kes.
- Dengan sejumlah besar normosit dalam darah periferal, mereka dikira dalam bilangan leukosit (kedua-dua leukosit dan normosit - sel nucleated). Untuk menetapkan bilangan leukosit dengan betul, dari jumlah bilangan sel darah nukleus perlu mengurangkan bilangan normosit.
- Kesalahan yang selebihnya adalah serupa dengan yang timbul ketika mengira jumlah sel darah merah dalam ruang pengiraan.
Kiraan leukosit
Kaedah mengira dalam kamera. Mengambil dan mencairkan darah yang dihasilkan oleh kaedah tiub. 0.4 ml cecair pencair dan 0.02 ml darah kapilari dimasukkan ke dalam tiub (lebih baik Vidalevskaya). Pencairan yang terhasil dianggap sebagai 1:20. Larutan asid asetik 3-5% berwarna biru metilen biasanya digunakan sebagai pengencer (asetik asetik cair erythrocytes, noda biru metilena nukleus leukosit). Sebelum mengisi tabung Goryaeva tiub dengan darah yang dicairkan terperangkap dengan teliti. Ruang itu diisi dengan cara yang sama seperti pengiraan sel darah merah.
Leukosit adalah lebih kecil daripada erythrocytes (1-2 setiap persegi besar), oleh itu, untuk ketepatan, bilangan dibuat dalam 100 dataran besar (ungraded). Pengiraan: 100 dataran besar (1600 kecil) dikira sebagai leukosit.
Ingat bahawa jumlah kuadrat kecil ialah 1/4000 mm3, dan darah dicairkan sebanyak 20 kali, jumlah leukosit dalam 1 μl darah dikira: 4000 20 dan dibahagikan dengan 1600 = a x 1/2. Secara praktikal, untuk mendapatkan kandungan sebenar leukosit dalam 1 μl darah, adalah mencukupi untuk membahagikan separuh bilangan yang didapati dalam pengiraan dan menambah 2 nol. Kesalahan kaedah purata ialah ± 7%.
Lebih tepat (ralat 2-3%) dan sempurna adalah penghitungan leukosit yang menggunakan peranti elektronik. Penghitungan leukosit dalam kaunter partikel dijalankan mengikut prinsip yang sama seperti erythrocytes. Pra-darah dicairkan dan dicampurkan dengan mana-mana reagen yang menjalar sel darah merah. Dalam autoanalyzer "Technicon", larutan asid asetik digunakan seperti, dalam "Culter" dan "Celloskop" - saponin atau sapoglobin, yang ditambah dicairkan (1: 500, 1: 700) dalam larutan natrium klorida isotonik (6 titis setiap 20 ml pembiakan).
Pengiraan leukocyte darah dilakukan dalam smear darah perifer yang berwarna.
Adalah lebih baik untuk dikira pada titik nipis berhampiran akhir smear, sekurang-kurangnya 200 sel (kecuali leukopenia yang disebut), dan kemudian memperoleh nisbah peratusan jenis sel darah putih tertentu. Pengiraan adalah disyorkan dalam susunan yang sama: separuh daripada sel-sel mesti dikira di atas, separuh di bahagian bawah stroke, tanpa pergi ke tepi dan tengah, zigzagging (3-4 bidang pandangan sepanjang stroke, 3-4 bidang pada sudut tepat ke tengah-tengah strok, maka 3-4 bidang ke sisi selari dengan tepi, sekali lagi pada sudut kanan ke atas dan sebagainya ke satu pihak).
Penyediaan smear. Gelas yang dibasuh dan dibersihkan dengan teliti (pinggirnya) menyentuh setetes darah di tapak suntikan. Smear membuat kaca pengisar, meletakkannya pada sudut 45 ° ke slaid di hadapan drop. Setelah membawa gelas ke drop ini, mereka menunggu sehingga darah merebak di sepanjang pinggirnya, kemudian dengan pergerakan mudah cepat mereka mengerjakan kaca penggiling ke depan, tidak mengambilnya dari subjek sebelum ia mengeringkan seluruh titisan.
Tirus yang dibuat dengan betul mempunyai warna kekuningan (nipis), tidak mencapai tepi kaca dan berakhir dengan jejak (kumis).
Mengingatkan smear kering yang dihasilkan selepas penetapan awal. Fiksasi terbaik dicapai dalam alkohol methylene mutlak (3-5 minit) atau dalam campuran Nikiforov bahagian yang sama etanol dan eter yang mutlak (30 minit).
Cat hematologi utama termasuk metilena biru dan derivatifnya - azure I (metilene azure) dan azure II (campuran bahagian yang sama biru azure I dan metilena biru), kepada eosin kuning larut air berasid.
● Lukisan oleh Romanovsky-Giemsa. Cat Romanovsky-Giemsa (buatan kilang) mempunyai komposisi berikut: Azur II - 3 g, eosin kuning larut air - 0.8 g, metil alkohol - 250 ml, dan gliserin - 250 ml. Larutan cat kerja disediakan pada kadar 1.5-2 titisan cat siap setiap 1 ml air sulingan. Cat dicurahkan ke dalam smear dengan lapisan yang mungkin lebih tinggi; pewarna masa - 30-35 minit Selepas tempoh ini, swab dibasuh dengan air dan kering di udara. Dengan kaedah ini, nukleus dapat dibezakan dengan baik, tetapi granulariti neutropilik dari sitoplasma jauh lebih teruk, jadi ia digunakan secara meluas untuk mengotorkan perut darah periferal.
● Menggabungkan warna May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa mengikut Pappenheim. Pewarna selesai, fixative May-Grunwald, yang merupakan penyelesaian biru eosinmethylene dalam alkohol metilena, ditapis ke dalam smear tetap selama 3 minit. Selepas 3 minit, jumlah air sulingan yang sama ditambah ke cat yang meliputi penyelesaian dan pewarnaan diteruskan selama 1 minit lagi. Selepas itu, cat dicuci dan smear kering di udara. Kemudian smear kering dicat dengan larutan berair yang baru disediakan cat Romanovsky selama 8-15 minit. Kaedah ini dianggap sebagai yang terbaik, terutamanya untuk smear sumsum sumsum.
Peningkatan bilangan leukosit dalam darah periferal di atas paras normal dipanggil leukositosis, penurunan dipanggil leukopenia. Leukositosis (leukopenia) jarang dicirikan oleh peningkatan berkadar (penurunan) dalam jumlah leukosit semua jenis, contohnya, leukositosis dengan penebalan darah. Dalam kebanyakan kes terdapat peningkatan bilangan (penurunan) mana-mana satu jenis sel. Peningkatan atau penurunan bilangan jenis leukosit dalam darah boleh menjadi relatif atau mutlak, bergantung kepada jumlah jumlah leukosit - normal, dinaikkan atau menurun. Perubahan dalam bilangan, nisbah bentuk individu dan morfologi leukosit bergantung pada jenis dan virulensi patogen, sifat, jarak dan tahap proses patologi, reaksi individu organisma.
Kaedah menghitung leukosit dalam ruang Goryaev
Sel darah putih - sel darah putih - memainkan peranan penting dalam perlindungan antimikrob badan. Granulosit menyuntik mikroba dan memusnahkannya dengan bantuan enzim yang tertutup dalam granul; limfosit menghasilkan antibodi dan memberikan tindak balas imun kepada badan.
Kaedah menentukan kaedah tiub ujian: tuangkan ke dalam tiub ujian 0.4 ml larutan Türk (Cecair Türk mengandungi asid asetik untuk memusnahkan sel-sel darah merah dan metilena biru untuk pewarnaan nukleus leukosit). Gunakan pipet kapilari untuk menarik 0.02 ml darah dari kejatuhan segar, perlahan-lahan tiub ke dalam tiub ujian dengan reagen dan bilaskan pipet tersebut. Campurkan dengan baik. Pada masa yang sama, pencairan darah adalah 20 kali. Satu setitik darah yang dicairkan dikumpulkan di hujung batang kaca bulat dan digunakan pada pinggir ruang kaca yang dipoles.
Pengiraan dijalankan dalam 100 dataran terputus besar, disusun oleh empat. Digunakan sedikit peningkatan.
Derivasi formula pengiraan nombor 1.
1. 100 kotak mengandungi 1600 kotak kecil (16x100)
2. Jumlah darah di atas persegi kecil 1/4000 mm3
3. Mencairkan darah sebanyak 20 kali
Bilangan leukosit dalam 1 μl darah = pada -4000-20. = Ax 50
Sebagai contoh: 130 leukosit dikira dalam 100 kotak besar grid Goryaev. Dalam 1 μl darah, jumlah leukosit akan menjadi 130 x 50 = 6500, atau 6.5-10 3.
Untuk menentukan kandungan leukosit dalam 1 liter darah, jumlah leukosit, dinyatakan dalam ribuan, mesti didarabkan dengan 10 9.
Dalam contoh kita, bilangan leukosit dalam 1 liter darah ialah 6.5-10 9.
194.48.155.245 © studopedia.ru bukan pengarang bahan yang diposkan. Tetapi menyediakan kemungkinan penggunaan percuma. Adakah terdapat pelanggaran hak cipta? Tulis kepada kami | Maklumbalas.
Lumpuhkan adBlock!
dan muat semula halaman (F5)
sangat diperlukan
Kaitan leukosit dalam darah
Leukositosis boleh menjadi mutlak (benar) dan relatif (redistributif).
Leukositosis mutlak diperhatikan dalam proses keradangan akut, nekrosis tisu, jangkitan bakteria akut (kecuali demam kepialu, brucellosis, tularemia, dll), keadaan alahan, tumor malignan (dengan kemusnahan tisu), kecederaan kepala tertutup dan pendarahan di otak, kencing manis. koma uremik, kejutan, kehilangan darah akut, sebagai reaksi utama - dengan penyakit radiasi. Peningkatan ketara dalam jumlah leukosit berlaku dengan leukemia.
Relatif (redistributif) adalah akibat daripada penerimaan leukosit dalam aliran darah dari organ-organ yang berkhidmat untuk depotnya. Ia berlaku selepas makan (makanan leukositosis), mandi panas dan sejuk, emosi yang kuat (leukocytosis vegetovaskular), kerja otot yang sengit (leukositosis myogenic), dan sebagainya.
Leukopenia Leukopenia dianggap sebagai penunjuk perencatan keupayaan fungsi sumsum tulang akibat pendedahan kepada bahan toksik (arsenik, benzena, dan lain-lain), beberapa ubat (sulfanilamides, chloramphenicol, butadione, immuno, cyclophosphamide, dll.), Virus (influenza, hepatitis virus, campak, dan lain-lain), mikroba (kepialu, brucellosis, dan sebagainya), radiasi pengionan, sinar-X dan hypersplenism (fungsi limpa meningkat).
Leukositosis dan leukopenia jarang dicirikan oleh peningkatan berkadar (penurunan) dalam jumlah leukosit semua jenis (contohnya, leukositosis dengan penebalan darah); dalam kebanyakan kes terdapat peningkatan (penurunan) dalam bilangan mana-mana satu jenis sel, oleh itu istilah "neutrophilia", "neutropenia", "limfositosis", "limfopenia", "eosinophilia", "eosinopenia", "monositosis", "monocytopenia", "Basophilia."
Dalam penilaian klinikal perubahan dalam jumlah leukosit, sangat penting dilampirkan pada nisbah peratusan bentuk individu leukosit, iaitu, formula leukosit.
Penghitungan darah Leukocyte seseorang yang sihat:
Jumlah relatif Jumlah mutlak
Basofils............................0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l
Eosinophils.........................0.5-5% 0.02-0.30 x 10 9 / l
Neutrophils: - myelocytes............ 0% tidak hadir
- ditikam... 1-6% 0.040-0.300 x 10 9 / l
- dibahagikan....47-72% 2.0-5.5 x 10 9 / l
Limfosit..................................19-37% 1.2-3.0 x 10 9 / L
Monocytes...............................3-11% 0.09-0.6 x 10 9 / L
Penghitungan leukosit dilakukan di dalam smear darah periferal berwarna. Untuk penafsiran yang betul tentang hasil kajian formula leukosit, disyorkan untuk mengira dalam kuantiti mutlak, tetapi tidak pada yang relatif. Kaedah-kaedah yang paling umum melukiskan smear oleh Romanovsky-Giemsa, Pappenheim. Di bawah rendaman, sekurang-kurangnya 200 sel dikira, dan nisbah peratusan beberapa jenis leukosit diperolehi. Analisis leukogram dengan mengambil kira parameter darah lain dan gambar klinikal adalah kaedah pemeriksaan yang berharga, membantu dalam diagnosis dan penentuan prognosis penyakit.
Penyebab utama neutropilia.
Jangkitan bakteria akut - setempat dan umum.
Keradangan atau nekrosis tisu.
Kesan ubat (kortikosteroid).
Penyebab utama neutropenia.
Jangkitan - bakteria (demam kepialu, brucellosis, tularemia, demam paratyphoid) dan virus (hepatitis berjangkit, campak, influenza, rubela dan lain-lain).
Kesan myelotoxic dan penindasan granulocytopoiesis (radiasi pengion; agen kimia - benzena, aniline, DDT, kesan ubat - sitostatics dan immunosuppressants; vitamin-B12-anemia kekurangan asid folik, leukemia akut aleukemia, anemia aplastik).
Pendedahan antibodi (bentuk imun) - hipersensitiviti terhadap ubat, penyakit autoimun (SLE, arthritis rheumatoid, leukemia limfatik kronik), manifestasi isoimun (penyakit hemolitik pada bayi yang baru lahir).
Pengagihan semula dan pemendapan dalam organ - keadaan kejutan, penyakit dengan splenomegaly dan hypersplenism.
Bentuk keturunan (neutropenia kronik benigna keluarga).
Penyebab utama eosinofilia.
Pencerobohan parasit (trichinosis).
Lesi kulit kronik - psoriasis, pemphigus, ekzema.
Tumor (varian eosinophilic leukemia).
Penyakit lain - Endokarditis fibroplastik Lefflera, demam merah.
Dalam fasa pemulihan jangkitan dan penyakit keradangan (tanda prognostik yang menggalakkan).
Punca eosinopenia (aneosinophilia).
Peningkatan aktiviti adrenokortikosteroid dalam badan.
Penyebab utama basofilia:
Leukemia myeloid kronik dan erythremia.
Penyebab utama monositosis.
Infeksi bakteria subakut dan kronik.
Jangkitan parasit - leishmaniasis, malaria.
Hemoblastosis - leukemia monosit, limfogranulomatosis, limfoma.
Syarat-syarat lain adalah SLE, sarcoidosis, arthritis rheumatoid, monositosis yang berjangkit; dalam tempoh pemulihan daripada jangkitan, apabila meninggalkan agranulositosis, selepas splenectomy.
Pengurangan jumlah monosit adalah penting terutamanya dalam menilai nisbah limfosit-monositik dalam tuberkulosis pulmonari.
Penyebab utama lymphocytosis.
Jangkitan - virus akut (mononucleosis berjangkit, campak, rubella, cacar air), bakteria kronik (tuberkulosis, sifilis, brucellosis), protozoal (toxoplasmosis).
Hemoblastosis (leukemia limfositik, limfoma).
Penyakit lain - hipertiroidisme, penyakit Addison, vitamin B12-anemia kekurangan folik, anemia hypo dan aplastik.
Lymphocytopenia diperhatikan di SLE, penyakit Hodgkin, tuberkulosis meluas dari kelenjar getah bening, di peringkat terminal kegagalan buah pinggang, penyakit radiasi akut, keadaan imunodefisiensi, mengambil glukokortikoid.
Peningkatan atau penurunan bilangan jenis leukosit dalam darah boleh menjadi relatif atau mutlak. Jika hanya peratusan jenis sel darah putih yang tertentu berubah, neutrophilia relatif, eosinopenia relatif, dan lain-lain berlaku. Peningkatan atau penurunan kandungan mutlak jenis leukosit, iaitu bilangan sel per unit volum darah, dipanggil neutrophilia mutlak, eosinopenia mutlak, dan sebagainya.
Peralihan formula ke kiri (meningkatkan bilangan bentuk neutrofil muda) adalah tanda keradangan atau proses nekrotik dalam tubuh.
Peralihan formula leukosit ke kanan adalah ciri-ciri penyakit radiasi dan vitamin-B12-anemia kekurangan asid folik.
Ketiadaan atau pengurangan ketara dalam bilangan semua jenis leukosit granular - granulosit (neutrophils, eosinophils, basofils) ditentukan oleh istilah agranulocytosis. Bergantung kepada mekanisme kejadian, myelotoxic (kesan sinaran pengionan, pengambilan sitostatik) dan imun (hapten dan agranulocytosis autoimun) dibezakan.
Leukosit (leucocytus)
Leukosit. Penentuan kuantitatif leukosit. Mengira leukosit menggunakan kamera Goryaeva. Kandungan kuantitatif leukosit. Leukositosis.
Sel darah putih
Bilangan leukosit dalam darah bergantung kepada kelajuan pembentukan mereka, dan penggerak mereka dari sumsum tulang, serta penggunaan dan penghijrahan mereka ke tisu (ke lesi), ditangkap oleh paru-paru dan limpa. Proses-proses ini, sebaliknya, dipengaruhi oleh beberapa faktor fisiologi, dan oleh itu jumlah leukosit dalam darah orang yang sihat adalah tertakluk kepada turun naik: ia meningkat pada akhir hari, semasa tekanan fizikal, tekanan emosi, pengambilan makanan protein, dan perubahan mendadak dalam suhu ambien.
Penentuan kuantitatif leukosit
Leukosit dikira menggunakan kamera Goryaev dan menggunakan kaunter automatik.
Mengira leukosit menggunakan kamera Goryaeva
Dengan kaedah in vitro mengambil darah untuk menghitung leukosit:
- 0.4 ml larutan 3-5% asid asetik yang berwarna biru metilena dicurahkan ke dalam tiub. Gunakan pipet kapilari untuk menarik 20 μl darah dari titisan segar (pencairan 20 kali), dengan berhati-hati meniupnya ke dalam tiub ujian dengan reagen dan bilaskan pipet tersebut. Campurkan dengan baik;
- kaca penutup yang bersih dan kering digosok ke dalam ruang supaya cincin pelangi terbentuk pada titik sentuhan;
- darah dicairkan dalam tiub ujian, kacau dengan baik. Akhir batang kaca bulat mengambil setetes darah dan membawanya ke tepi kaca yang dipancarkan dari ruang;
- selepas mengisi ruang, ia ditinggalkan selama 1 minit untuk berehat untuk pemendapan leukosit;
- Leukosit dianggap pembesaran rendah (objektif × 8 atau × 9, kanta mata × 10 atau × 15) dengan bidang pandangan gelap (dengan kondenser yang diturunkan atau diafragma yang sempit);
- untuk keputusan yang memuaskan, leukosit dikira dalam 100 kotak besar.
Mengetahui jumlah kuadrat besar dan tahap pengenceran darah, cari jumlah leukosit dalam 1 μl dan 1 l darah. Bahagian persegi besar ialah 1/5 mm, luasnya 1/25 mm2, jumlah ruang di atas persegi ini adalah 1/250 mm3.
Formula untuk mengira sel darah putih:
di mana B adalah bilangan leukosit dalam 100 dataran besar;
P - tahap pencairan (20).
Kiraan leukosit
Norm: 4.0-9.0 × 10 9 / L
Peningkatan jumlah leukosit di atas 9.0 × 10 9 / l dipanggil
leukositosis, penurunan bilangannya di bawah 4.0 × 10 9 / l - leukopenia. Walau bagaimanapun, walaupun 3.5 × 10 9 dalam 1 l leukosit untuk beberapa individu mungkin menjadi norma. Menurut kesusasteraan, orang-orang seperti ini telah meningkatkan ketahanan imun dan mereka kurang cenderung menjadi sakit, yang sepertinya disebabkan oleh tindak balas imun untuk memiliki rizab leukosit dalam tisu, di mana terdapat 50-60 kali lebih banyak daripada dalam aliran darah. Jelas sekali, dalam individu yang sihat dengan bilangan sel darah putih yang rendah dalam darah periferal, rizab mereka dalam tisu juga meningkat. Fenomena ini dijelaskan oleh sifat keturunan dan kekeluargaan atau dengan peningkatan pengaruh sistem saraf parasympatetik.
Leukopenia boleh berfungsi dan organik.
Leukopenia berfungsi dikaitkan dengan disregulasi pembentukan darah dan diperhatikan:
- dengan beberapa jangkitan bakteria dan virus (demam kepialu, influenza, cacar, rubella, penyakit Botkin, campak);
- di bawah tindakan dadah (sulfonamides, analgesik, anticonvulsants, antithyroid, cytostatic dan ubat lain);
- semasa kerja-kerja otot, pengenalan protein asing, kesan saraf dan suhu, kelaparan, keadaan hipotonik;
- leukocytopenia palsu mungkin dikaitkan dengan pengagregatan leukosit dalam penyimpanan jangka panjang darah pada suhu bilik (lebih daripada 4 jam).
Leukopenia organik akibat aplasia sumsum tulang dan penggantiannya dengan tisu adipose, berlaku apabila:
- anemia aplastik;
- agranulocytosis;
- leukemia leukopenik;
- beberapa bentuk penyakit Hodgkin;
- radiasi pengion;
- hypersplenism (utama dan menengah);
- penyakit kolagen.
Leukositosis
Leukositosis adalah tindak balas sistem hematopoietik kepada kesannya
faktor eksogen dan endogen. Terdapat leukositosis fisiologi dan patologi.
Leukositosis fisiologi adalah:
- pencernaan - selepas makan, terutamanya protein yang tinggi; bilangan leukosit tidak melebihi 10.0-12.0 × 10 9 / l dan selepas 3-4 jam ia kembali normal;
- dengan tekanan emosional (adrenalin), penuaan fizikal yang teruk, penyejukan, pendedahan cahaya matahari yang berlebihan (selaran matahari), pentadbiran beberapa hormon (katekolamin, glucocorticosteroids, dan lain-lain), pada separuh kedua kehamilan, semasa haid dan pengagihan leukosit tidak sekata dalam darah arus perdana.
Leukositosis patologi dibahagikan kepada mutlak dan relatif.
Leukositosis mutlak - peningkatan bilangan leukosit dalam darah sehingga beberapa ratus ribu (100.0-600.0 × 10 9 / l dan lebih).
- Selalunya diperhatikan dalam leukemia: dalam leukemia kronik - dalam 98-100% kes, dalam leukemia akut - dalam 50-60%. Mengubah nisbah sel leukosit dalam sumsum tulang dan salur darah berfungsi sebagai asas untuk diagnosis leukemia.
Relatif leukositosis diperhatikan:
- proses keradangan dan berjangkit akut, kecuali demam tifoid, selesema, cacar, rubella, penyakit Botkin, campak. Leukositosis terbesar (sehingga 70.0-80.0 × 10 9 / l) diperhatikan dalam sepsis;
- di bawah pengaruh bahan toksik (racun serangga, endotoksin), radiasi pengionan (selepas penyinaran);
- akibat daripada tindakan kortikosteroid, adrenalin, histamin, acetylcholine, dan persediaan digitalis;
- dengan penyisiran tisu (nekrosis), infarksi miokard, trombosis arteri periferal dengan perkembangan gangren, luka bakar, pleurisy eksudatif, perikarditis, uremia, koma hepatik;
- kehilangan darah yang ketara dalam kecederaan, pendarahan dalaman, ginekologi dan lain-lain.
Peningkatan bilangan leukosit dalam penyakit berjangkit dalam kebanyakan kes disertai dengan peralihan formula leukosit ke kiri
Kiraan leukosit dan jumlah leukosit.
Untuk menghitung leukosit, darah dicairkan dalam campuran atau dalam tiub ujian. Untuk tujuan ini, gunakan penyelesaian 3-5% asid asetik (untuk pemusnahan sel darah merah), berwarna dengan sebarang pewarna aniline (untuk pewarnaan nukleus leukosit). Kilang pengiraan diisi dengan cara yang sama seperti pengiraan sel darah merah. Leukosit dikira dalam 100 dataran besar. Dalam grid Goryaev, mudah untuk mengira mereka dalam kotak yang tidak terputus (terdapat 100 daripada mereka di grid). Memandangkan pencairan darah dan jumlah bendalir di atas dataran, kirakan pengganda berterusan. Apabila pembiakan 20 kali ia adalah 50.
Apabila bekerja dengan tiub ujian, mereka pra-tuang 0.38 ml cecair di dalamnya dan lepaskan 0.02 ml darah ke dalamnya. Untuk menghitung pengiraan automatik dalam tiub ujian, sel darah merah hemolyze dengan saponin. Kiraan sel darah putih normal ialah 4.3 • 10 9 -11.3 • 10 9 / l, atau 4300-11 300 dalam 1 μl darah.
Penghitungan Leukocyte dikira dalam smear berwarna.
Smear yang baik memenuhi syarat-syarat berikut: ia adalah nipis, dan unsur berbentuk terletak di dalam satu lapisan; dalam kes ini, smear berwarna kuning dan lut. Smearing yang baik adalah seragam, dan sel-sel tidak rosak oleh smearing. Agar darahnya terletak sekata pada kaca, ia degreased dengan membakar pembakaran gas di atas api atau disimpan dalam campuran alkohol dan eter. Dengan hujung kaca, mereka menyentuh sel darah merah yang baru dikeluarkan dan menyebarkannya tanpa henti pada kaca. Sebelum pewarnaan, smear diperbetulkan dengan rendaman dalam metanol selama 3 minit, dalam etanol atau campurannya dengan eter selama 30 minit. Terdapat beberapa pembetulan lain. Pecutan kering selepas penetapan dipenuhi dengan pewarna.
Untuk membezakan sel-sel darah (definisi formula leukosit) menggunakan pewarnaan berbeza. Pewarna yang paling banyak digunakan oleh Romanovsky-Giemsa. Pewarna ini adalah campuran asid lemah (eosin) dan lemah alkali (azure II) cat. Sel-sel dan bahagian-bahagiannya, bergantung kepada reaksi medium, melihat satu atau lain komponen pewarna di dalamnya: bahan berasid (basophilic) berwarna azure blue, alkali (oxyphilic) berwarna merah eosin; Neutral melihat kedua-dua warna dan menjadikan ungu.
Formula leukosit merujuk kepada peratusan bentuk leukosit darah individu.
NB! Untuk pengiraan yang cukup tepat, perlu melihat sekurang-kurangnya 200 sel darah putih.
Pengiraan dilakukan dengan sistem perendaman. Oleh kerana sel-sel tidak terletak di dalam smear (yang lebih besar pergi ke tepi), penting untuk mematuhi urutan pergerakan pada smear, di mana pinggiran dan kawasan pertengahan akan dilihat sama. Salah satu daripada kedua-dua kaedah pergerakan digunakan: salah satu daripada mereka menggerakkan stroke dari tepi atas ke bahagian bawah, bergerak ke atas 2 hingga 3 bidang pandangan di sepanjang tepi, kemudian pergi ke arah yang bertentangan ke tepi atas, dan lain-lain. Dalam kaedah kedua, mereka bergerak dari tepi dengan 5 -6 medan ke tengah-tengah strok, maka jumlah yang sama sisi, kemudian kembali ke pinggir, alihkan beberapa medan ke sisi dan ulangi gerakan kembali sehingga 50 sel dikira. Lihat 4 dari laman-laman ini di 4 sudut smear. Mengira 200 sel, nombor dibahagikan kepada separuh dan menentukan bilangan setiap sel darah putih.
Leukosit adalah unsur darah, dengan cepat bertindak balas terhadap pelbagai pengaruh luaran dan perubahan dalam tubuh. Penentuan jumlah leukosit boleh menjadi nilai diagnostik yang besar, kerana ia mengungkapkan keadaan organ-organ pembentuk darah atau respons mereka terhadap efek berbahaya. Peningkatan bilangan leukosit - leukositosis - adalah hasil pengaktifan leukopoiesis, pengurangan jumlah mereka - leukopenia - mungkin bergantung pada perencatan organ pembentuk darah, kekurangan mereka, dan peningkatan pecahan leukosit di bawah tindakan antibodi anti-leukosit 1. Neutrofil. Kumpulan yang paling berubah-ubah leukosit adalah neutrophils, jumlah yang meningkat dengan banyak jangkitan, keracunan dan kerosakan tisu.
Ciri-ciri neutroposesis aktif bukan sahaja meningkatkan bilangan neutrofil dalam darah, tetapi juga bentuk bentuk yang belum matang di dalamnya: bilangan sel-stab yang bertambah, neutrofil muda muncul, kadang-kadang juga myelosit. Ini "peremajaan" komposisi neutropilik dipanggil peralihan leukosit ke kiri. Peranan neutrofil pelindung ditentukan oleh fungsi phagocytic mereka, tindakan bakterisida dan pembebasan enzim proteolitik yang mempromosikan penyerapan tisu nekrotik dan penyembuhan luka.
Selalunya, anjakan regeneratif berlaku di hadapan sebarang proses keradangan atau tumpuan nekrosis. Peralihan kiri yang sangat tajam ke promeletosit dan juga myeloblast dengan leukositosis penting dipanggil reaksi leukemoid. Penurunan bilangan neutrofil - neutropenia mutlak - berlaku apabila sumsum tulang menghalang pendedahan kepada toksin beberapa mikroorganisma (agen penyebab demam kepialu, brucellosis, dan lain-lain) dan virus, radiasi pengion, sebilangan dadah.
2. Limfosit. Lymphocytosis diperhatikan dalam tempoh pemulihan daripada penyakit berjangkit akut, dengan mononucleosis berjangkit, limfositosis berjangkit, leukemia limfositik, rubella, brucellosis, thyrotoxicosis.
Limfopenia mutlak berlaku dalam penyakit radiasi, lesi sistemik sistem limfa: limfoma, lymphosarcoma.
3. Eosinophils. Mereka didapati dalam darah dalam jumlah yang agak kecil (didapati terutamanya dalam tisu), tetapi bilangan mereka meningkat, kadang-kadang ketara, dalam proses alergi (penyakit serum, asma bronkial), pencerobohan helminthic, dan dermatosis prurit.
Pengurangan jumlah eosinofil - eosinopenia - sehingga kehilangan lengkapnya diperhatikan dalam sepsis, bentuk tuberkulosis yang teruk, kepialu, dan mabuk yang teruk.
4. Basofils. Adakah pembawa mediator penting metabolisme tisu (darah "setara" sel-sel tisu lemak). Apabila organisma sensitif, jumlah mereka bertambah, dan apabila alergen diperkenalkan semula, ia berkurangan dengan ketara akibat dari kerosakan mereka.
5. Monocytes. Peningkatan bilangan monosit - monositosis - merupakan penunjuk perkembangan proses imun. Monosit dianggap sebagai analogi makrofaj tisu. Monocyte didapati dalam beberapa penyakit kronik (chroniosepsis, tuberkulosis, sifilis). Monocytopenia kadang-kadang diperhatikan dalam bentuk demam kepialu hipertoksik septik yang teruk.
Agranulocytes. Ciri khas agranulocytes adalah nukleus yang tidak dibahagikan dan sitoplasma basofilik (biru).
Lymphocyte adalah saiz leukosit yang terkecil. Inti adalah bulat, bujur atau berbentuk kacang; menduduki sebahagian besar sel, berwarna sangat. Sitoplasma kebanyakan limfosit dengan rim sempit mengelilingi nukleus, berwarna dalam warna biru muda dan dijelaskan kepada nukleus.
Monocyte adalah sel darah terbesar. Inti teras yang tidak teratur dan warna yang agak ringan. Sitoplasma adalah warna biru-abu-abu, berasap, tidak dijelaskan kepada inti
Di samping sel-sel ini, jarang berlaku dalam darah biasa, dan sel-sel plasma selalunya boleh berlaku dalam penyakit. Mereka dibezakan oleh teras padat yang terletak secara eksentrik, selalunya struktur seperti roda. Jumlah sel ini meningkat dengan penyakit berjangkit tertentu, sepsis luka, dan pelbagai myeloma.
Apabila mengira formula leukosit, perhatian tidak hanya dibayar kepada perubahan kuantitatif di dalamnya, tetapi juga kepada perubahan kualitatif dalam unsur-unsur bentuk. Terdahulu, perubahan degeneratif dalam leukosit telah diperhatikan. Dengan mabuk yang teruk, granulariti neutrofil menjadi berlimpah, besar, sangat berwarna dan dipanggil toksik (atau toksogenik). Kadang-kadang, cairan darah terdapat di dalam darah, dicat seperti bahan nuklear leukosit. Ini adalah botani Botkin - Humprecht yang dipanggil - sisa kromatin nuklear, menunjukkan kelembapan leukosit yang meningkat, menyebabkan pecahannya - leukositosis
99. Kaedah menentukan kumpulan darah, konsep faktor Rh.
1. Penentuan kumpulan darah mengikut standard sera:
Peralatan berikut diperlukan:
o dua set standard hemagglutinating sera I (0), II (A), III (B) kumpulan dua siri yang berbeza dan satu botol serum IV (AB)
o botol dengan larutan isotonik natrium klorida dengan pipet
o plat kering kering dibasuh
o slaid kaca
jarum jarum steril untuk menusuk daging jari
o bola kasa steril,
Sera standard bagi penentuan kumpulan darah mengikut sistem ABO dihasilkan dengan tanda warna khusus.: I (0) - tidak berwarna, II (A) - biru, III (B) - merah, IV (AB) - kuning. Serum disimpan pada 4-10 ° C Serum harus ringan dan telus. Kehadiran serpihan, sedimen, kekeruhan adalah tanda serum tidak sesuai. Tanda-tanda aglutinin pertama harus muncul tidak lebih dari 30 saat.
Plat dibahagikan kepada 4 segi empat dengan pensil berwarna dan pada arah jam mengikut arah yang ditetapkan kuadrat I (0), II (A), III (B). Serum besar serum dua kumpulan I (0), II (A), W (B) dimasukkan ke dalam plat bersamaan plat dengan pipet. Pad jari dirawat dengan alkohol dan jarum ditusuk kulit. Titisan darah pertama dikeluarkan dengan bola kasa, jatuh berikutnya di bahagian yang berlainan dari slaid yang digunakan secara berturut-turut pada titisan serum dan diaduk dengan teliti. Setetes darah perlu 5-10 kali lebih rendah daripada penurunan serum. Kemudian dengan menggoncang piring itu dengan sempurna campurkan darah dengan serum. Keputusan awal dinilai selepas 3 minit, selepas itu titisan larutan natrium klorida isotonik ditambahkan, dicampur kembali dengan menggoncang piring, dan setelah 5 menit penilaian terakhir reaksi aglutinasi dilakukan.
Dengan ujian isohemagglutination positif, serpihan dan kernel dari sel darah merah yang dipatuhi tidak menyimpang apabila menambah larutan isotonik natrium klorida dan kacau.
Apabila tindak balas negatif jatuh serum pada plat telus, merah jambu yang sama, tidak mengandungi serpihan dan bijirin.
4 tindakbalas berikut tindak balas aglutinasi dengan sera standard kumpulan I (0), II (A), III (B) adalah mungkin.
v Semua 3 sera dalam kedua-dua siri tidak agglutinate. Ujian darah -
Saya berkumpulan.
v Reaksi isohemagglutination negatif dengan kumpulan P (A) serum kedua-dua siri dan positif dengan kumpulan serum I (0) dan III (B). Ujian darah -
Kumpulan II (A).
v Reaksi isohemagglutination adalah negatif dengan serum kumpulan III (B) dalam kedua-dua siri dan positif dengan serum kumpulan I (0) dan II (A). Ujian darah -
III (B) kumpulan.
v Serum I (0), II (A), III (B) kumpulan memberi reaksi positif dalam kedua-dua siri. Darah adalah kumpulan IV (AB). Tetapi sebelum memberikan kesimpulan sedemikian, adalah perlu untuk menjalankan reaksi isohemagglutination dengan serum standard IV (AB) kumpulan menggunakan prosedur yang sama. Ujian isohemagglutination negatif membolehkan akhirnya memberikan darah ujian kepada kumpulan IV (AB).
2. Konsep faktor Rh.
Satu lagi antigen (agglutinogen) dijumpai dalam eritrosit, yang dipanggil faktor Rh. Semua orang dibahagikan kepada individu yang mempunyai darah Rh-positif (Rh +) dan Rh-negatif (Rh). Telah didirikan bahawa 85% orang dalam eritrosit mengandungi faktor Rh, iaitu darah mereka adalah Rh-positif, dan 15% tidak mengandungnya, iaitu darah orang-orang ini adalah Rh-negatif. Kepada faktor Rh (antigen), biasanya tidak ada anti-Rh-agglutinin (antibodi siap pakai) dalam darah. Antibodi tersebut muncul dalam serum darah hanya sebagai hasil imunisasi seseorang dengan darah Rh-negatif dengan sel darah merah Rh-positif. Imunisasi sedemikian berlaku disebabkan oleh pemindahan darah Rh-positif berulang kepada penerima Rh-negatif atau semasa mengandung seorang wanita dengan Rh-negatif Rh-positif darah. Diimunisasi dengan cara ini, orang menjadi sensitif: apabila mereka ditransfused dengan darah Rh-positif, komplikasi serius berkembang - kejutan darah transfusi.
Mengira bilangan leukosit dan platelet
Faktor yang mempengaruhi ketepatan kajian sel darah putih
- penyimpanan darah panjang pada suhu bilik
Norma kiraan sel darah putih
Umur Bilangan leukosit
- 1 hari 11.6 - 22.0
- 1 minggu 8.1.- 14.3
- 1 bulan 7.6 - 12.4
- Dewasa 4.0 - 9.0
Kaedah untuk menentukan bilangan leukosit dalam darah.
- Mengira bilangan leukosit dalam ruang pengiraan
- Mengira leukosit dalam penganalisis hematologi
Menentukan bilangan leukosit dalam ruang pengiraan.
- Penghitungan leukosit di bawah mikroskop dilakukan selepas menyiram sel darah merah dalam 100 kotak besar kiraan pengiraan dan dikira semula untuk 1 liter darah, berdasarkan jumlah kotak dan pencairan darah. Kira leukosit perlu dibuat dalam masa 2-4 jam selepas pengumpulan darah.
- Sekiranya ada sel-sel merah nukleus dalam darah periferal, mereka tidak dilepaskan dan dikira bersama-sama dengan leukosit. Dalam kes ini, untuk menentukan jumlah sebenar leukosit, bilangan sel dalam baris merah dikurangkan daripada jumlah bilangan sel yang dikira.
- Sebagai contoh: Jumlah leukosit dalam pengiraan dalam ruang (atau penganalisis) -45x109 / l. Apabila mengira formula leukosit, didapati 50 erythroblas (normoblas) hadir setiap 100 leukosit.
Kami mengira jumlah sebenar leukosit dalam darah:
150 sel - 45 x 109 / l
100 sel (leukosit) - X
X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 * 10 / l
Oleh itu, jumlah sebenar leukosit dalam darah adalah 30 x109 / l.
Sumber utama kesilapan dalam perhitungan leukosit di dalam ruang:
- Nisbah darah dan asid asetik yang salah diambil dalam tiub ujian.
- Larutan asid asetik yang disiapkan secara tidak betul (pada kepekatan lebih daripada 5%, sesetengah leukocytes mungkin lyse, yang akan mengakibatkan pengurangan hasil).
- Pendedahan sampel yang berpanjangan pada suhu di atas 28 ° C, yang dapat mempercepatkan lisis leukosit dalam sampel dan membawa kepada meremehkan hasilnya.
- Pengisian bilik Goryaev yang salah. Seperti pengiraan sel darah merah, kamera mesti ditinggalkan selama 1 minit untuk menyelesaikan sel-sel.
- Kamera Goryaev tidak dibasuh dengan baik selepas definisi sebelumnya. Leukosit yang tinggal di dalam ruang boleh memaksimumkan hasil analisis.
Kaedah pengiraan platelet
- dalam bilik pengiraan
Setiap kumpulan kaedah mempunyai kelebihan dan kekurangan.
- Pengiraan platelet dalam ruang adalah cukup tepat, tidak memerlukan pengiraan bilangan sel darah merah. Sebaliknya, kaedah ini lebih susah payah, kerana platelet dalam bentuk asli diwakili oleh unsur-unsur kecil dan kurang jelas. Kelemahan kaedah ini adalah menghitung platelet pada waktu yang akan datang selepas mengambil darah.
- Menentukan bilangan platelet dalam darah smear adalah jauh lebih rendah dalam ketepatannya kepada kaedah kebuk atau kaunter automatik. Kesalahan dalam menghitung salur darah boleh disebabkan oleh kualiti yang tidak baik dalam smear dan penyebaran platelet yang tidak sekata, penentuan bilangan sel darah merah yang tidak tepat. Kelemahan yang ketara dalam kaedah ini adalah keperluan untuk menghitung platelet dan sel darah merah secara serentak dalam darah. Kelebihannya adalah keupayaan untuk mempelajari platelet pada bila-bila masa, tanpa mengira masa pengumpulan darah.
- Kaedah menentukan platelet menggunakan penganalisis hematologi membolehkan anda menentukan dengan tepat bilangan platelet, jumlah purata dan pengedaran mengikut jumlah.
Kaedah bersatu mengira bilangan leukosit darah dalam ruang pengiraan;
Kaedah untuk mengira bilangan leukosit dalam darah
Bersatu 2 kaedah untuk menentukan bilangan leukosit dalam darah:
- dalam bilik pengiraan;
- menggunakan penganalisis hematologi.
Prinsip Leukosit dikira di bawah mikroskop dalam jumlah tertentu ruang pengiraan dengan pencairan darah berterusan selepas pemusnahan sel darah merah.
Reagen: 3-5% larutan asid asetik, berwarna dengan larutan metilena biru untuk noda nukleus leukosit dan memudahkan pengiraan mereka. Penyelesaiannya berwarna biru, stabil dalam storan.
Peralatan khas: mikroskop, mengira ruang Goryaeva.
Kursus penentuan. Dengan menggunakan alat pengukur atau dispenser automatik, betul-betul 0.4 ml larutan asid asetik dituangkan ke dalam tiub ujian aglutinasi dan 0.02 ml (Sali kapilari) darah ditambah kepadanya. Basuh kapilari beberapa kali dengan larutan asid dan campurkan kandungan tiub. Ini mengakibatkan pencairan darah sebanyak 20 kali. Tinggalkan sehingga mengira, tetapi tidak lebih daripada 2-4 jam selepas pensampelan darah. Bilik Goryaev disediakan untuk kerja dengan menyapu kaca penutup supaya cincin pelangi muncul. Sekali lagi, goncangkan kandungan tiub dengan teliti dan isi ruang Goryaev dengan campuran ini menggunakan pipet Pasteur atau batang kaca dengan hujung cair. Biarkan ruangan pengiraan yang diisi selama 1 minit dalam kedudukan mendatar untuk pemendapan leukosit. Leukosit dikira dalam 100 dataran yang tidak terkumpul besar dalam ruang pengiraan di bawah syarat-syarat: condenser diturunkan, lensa mata 10x atau 15x, kanta 8x. Penghitungan bermula dari sudut kiri atas grid kamera Goryaev. Ketika menghitung leukosit, mereka dipandu oleh peraturan: semua sel di dalam alun-alun dan garis penandaan dihitung jika mereka kebanyakannya masuk ke dalam alun-alun. Sel-sel yang berpotongan dengan garis pemisah betul-betul separuh, dikira hanya pada dua sisi segiempat (contoh, kiri dan atas).
Pengiraan Apabila mengira bilangan leukosit dalam 1 μl darah, gunakan formula:
- bilangan leukosit dalam darah 1mkl;
a - bilangan leukosit, dikira dalam 100 dataran besar;
4000 - faktor penukaran volum kepada 1 μl, berdasarkan jumlah kuadrat kecil, iaitu μl;
1600 - bilangan dataran kecil yang dikira;
20 - pencairan darah.
Untuk menukarkan bilangan leukosit dalam unit SI (dalam 1 l darah), angka hasilnya didarabkan sebanyak 10 6.
Secara praktiknya untuk menentukan kandungan leukosit dalam 1 l darah, bilangan leukosit, dikira dalam 100 kuadrat besar ruang pengiraan, didarabkan dengan 50, dibahagikan dengan 1000 (iaitu, dipindahkan ke koma dengan 3 tanda ke kiri) dan didarabkan dengan 10 9.
Kaedah mengira leukosit dalam ruang Goryaev, norma petunjuk dan penyimpangan
Bilik Goryaev adalah alat untuk mengukur bilangan sel dan zarah dalam jumlah tertentu cecair (darah, air kencing), yang terdiri daripada objek tebal khas dan kaca penutup.
Slaid kaca mempunyai kawasan tersembunyi di tengah, di mana digunakan grid 225 kotak besar. Daripada segiempat ini, 25 adalah sama rata dibahagikan kepada 16 kotak kecil. Oleh kerana volum grid ini, pengiraan dilakukan lebih tepat berbanding dengan peranti pengiraan yang lain.
Perkhidmatan kamera
Selepas menggunakan instrumen, slaid dibasmi kuman dengan rendaman dalam larutan formalin 4% selama satu jam atau dalam larutan etanol 70% selama setengah jam. Selepas itu, ruang itu dibasuh dengan air suling. Cecair yang berlebihan dikeluarkan dengan kain lembut. Perlu diberi perhatian terhadap hakikat bahawa kamera tidak boleh disapu dengan swab kapas disebabkan oleh serat yang berpaut kepadanya. Gelas di tempat yang kering.
Semasa penggunaan kamera, PE dikira yang terletak di dalam alur grid dan di bahagian atas dan kiri garisan perimeternya. Dalam kes ini, zarah-zarah yang menyentuh garisan kanan dan bawah perimeter semasa pengiraan sel ini tidak termasuk.
Penentuan leukosit dalam darah
Kaedah mengira leukosit
Pengiraan bilangan leukosit bermula dengan pencairan darah dalam penyelesaian 3-5% asid etanoik dengan metil biru sebanyak 20 kali. Bahan kerja sebelum menggunakan lap kering dengan kasa.
Kaca penutup mestilah disapu sebelum penampilan cincin berwarna Newton. Seterusnya, ruang itu diisi dengan darah yang dicairkan, sementara dua titik pertama dilepaskan ke kertas penapis. Cecair memasuki ruang kerana harta kapilari air. Adalah penting untuk memastikan tiada aliran masuk ke dalam alur ketika mengisi. Sekiranya ini berlaku, cecair dikeluarkan dengan kertas penapis dengan perlahan. Kemudian meninggalkan grid sahaja seminit, menunggu FusionExcel untuk menghentikan pergerakannya.
Angka sel darah putih dilakukan dalam seratus dataran besar dengan pembesaran rendah, iaitu, dengan lensa 10x dan 8x objektif, menurut peraturan Egorov. Angka yang dihasilkan digunakan dalam formula.
X = (n × 250 × 20) / 100 atau X = n × 50
X - bilangan leukosit.
n ialah bilangan yang diperolehi dengan mengira dalam ruang.
Bilangan leukosit ditentukan, dengan mengambil kira bilangan kotak besar grid - 100 dan pencairan darah - 20.
Bagaimana cara menghitung leukosit
Kadar leukosit dan kelainan
Kadar leukosit pada manusia ialah 4.0 - 9.0 × 1029 / l. Atau, secara berbeza, kira-kira 6,000 sel darah putih terletak dalam 1 kubik mm darah.
Faktor-faktor fisiologi luaran boleh mempengaruhi penyimpangan dari norma:
- pengambilan makanan sebelum menderma darah;
- tekanan;
- kehamilan atau haid pada wanita;
- hipotermia atau terlalu panas;
- usaha fizikal yang hebat sebelum ujian.
Sekiranya bilangan sel darah putih melebihi 9.0 × 1029 / l (leukosit ditinggikan), keadaan ini dipanggil leukositosis. Gambar yang sama dapat dilihat dengan penyakit darah ganas, jangkitan, kerosakan radiasi dan keracunan.
Dadah juga boleh meningkatkan jumlah leukosit. Nekrosis tisu, pendarahan berat, termasuk akibat operasi, koma buah pinggang, penyakit jantung - semua ini boleh menyebabkan leukositosis.
Kejatuhan jumlah leukosit di bawah 3.9 × 1029 / l dipanggil leukopenia. Walau bagaimanapun, dalam sesetengah orang bilangan tetap leukosit ditetapkan pada 3.5 × 109 / l. Adalah dipercayai bahawa orang tersebut mengekalkan rizab sel-sel ini dalam tisu 50 kali lebih banyak daripada dalam darah. Terdapat juga leukopenia berfungsi selepas pentadbiran analgesik, sulfonamida, dan ubat-ubatan lain, selepas kerja otot yang panjang, akibat jangkitan dan virus (typhoid, influenza, dan campak).
Formula leukosit
Semua jenis leukosit merupakan formula leukosit. Di atasnya, anda boleh mengenal pasti patologi tertentu. Norma formula berbeza-beza mengikut umur dan tempoh kehidupan seseorang. Peralihan jelas kelihatan pada wanita semasa kehamilan atau selepas melahirkan anak.
Kaedah yang berbeza digunakan untuk mengira nisbah jenis sel-sel ini, tetapi semuanya berkaitan dengan hakikat bahawa sel-sel yang lebih berat (contohnya basofil) terletak lebih dekat ke pinggir smear, dan limfosit, seperti sel-sel cahaya, kekal di tengah-tengah.
- Kaedah Filipchenko. Dalam kaedah ini, pengiraan dilakukan di sepanjang garis lurus sempadan sempadan dari satu hujung ke yang lain. Strok secara mental dibahagikan kepada tiga bahagian.
- Kaedah Schilling. Leukosit dikira dalam empat kawasan yang mempunyai smear.
Data yang diperolehi direkodkan dalam jadual. Individu bilangan setiap jenis sel darah putih dikira oleh formula. Menandakan unsur-unsur yang kelihatan. Skor disimpan sehingga saat ini sehingga jumlah semua sel dikira adalah 100.
Kaedah untuk mengira leukosit dalam air kencing
Dalam air kencing dikira bilangan leukosit dalam sel Goryaeva Nechiporenko. Analisis ini diperlukan untuk memantau penyakit buah pinggang. Pemeriksaan berkala untuk air kencing membantu memantau ketepatan rawatan dan keberkesanan terapi yang ditetapkan.
Pengumpulan air kencing
Dalam kajian ini hanya air kencing pagi pertama di tengah-tengah kencing. Adalah penting bagi pesakit untuk mengikuti peraturan asas untuk mengumpul biomaterial ini. Latihan tambahan khas untuk kajian ini tidak diperlukan.
Kaedah pengiraan
10 ml air kencing yang baru dikumpulkan disentri selama tiga minit pada 2.5 ribu revolusi seminit. Sebelum ini, perlu memastikan bahawa air kencing, untuk menghindari perpecahan separa sel, mempunyai tindak balas asid yang lemah.
Menggunakan pipet dengan hujung sempit, tarik, keluarkan lapisan atas. In vitro meninggalkan 0.5 ml air kencing hingga 1 ml, bergantung kepada jumlah sedimen.
Endapan itu dicampur dengan lembut dengan supernatan. Penyelesaian yang terhasil digunakan untuk mengisi ruang pengiraan Goryaev menurut prinsip yang sama, yang digunakan semasa mengira PV darah. Kamera dibiarkan bersendirian selama 3 hingga 5 minit.
Sel darah putih mesti dikira dalam kotak besar di seluruh grid dengan lensa 7x dan lensa 40x.
Angka yang dihasilkan digunakan dalam formula:
X = (a / 0.9) × (1000 / V)
X - bilangan leukosit dalam 1 ml air kencing.
a - jumlah yang dikira dibahagikan dengan jumlah ruang dalam 1 μl sedimen air kencing.
v - Jumlah air kencing yang diambil untuk kajian ini.
1000 - jumlah sedimen.
Ini penting! Norma leukosit: dalam 1 ml air kencing tidak lebih dari 2 × 10 ³ sel darah putih.
Kaitan leukosit dalam darah
Kakitangan makmal mengesan jumlah darah leukosit yang paling kerap menggunakan ruang Goryaev. Penghitungan leukosit dalam bilik Goryaev adalah kaedah yang kurang tepat daripada penentuan leukosit yang menggunakan peranti elektronik. Besarnya ralat ialah ± 7%.
Bagaimana pengiraan dilakukan
- Ke dalam tiub tuangkan 0.4 mililiter cecair mencairkan, serta 0.02 mililiter darah kapilari. Pembiakan siap dianggap sama dengan 1:20.
- Sebagai cecair mencairkan, larutan asid asetik 3 atau 5% biasanya digunakan. Ia adalah pra-berwarna dengan metilena biru, yang oleh warna reaksi nukleus leukosit.
- Sebelum mengisi ruang, tiub Goryaev digegarkan secepat mungkin. Mengisi kamera adalah sama seperti pengiraan sel darah merah.
Ciri pengiraan
Dengan jumlah leukosit yang lebih rendah daripada sel darah merah, ia adalah untuk alasan ini pengiraan dibuat dalam 100 kotak besar. Dalam 100 kotak, kiraan leukosit dikira.
Dengan volum kecil 14,000 milimeter padu dan pencairan darah 20 kali, bilangan leukosit dikira seperti berikut: 4000x20, dan kemudian dibahagikan dengan 1600. Ternyata 1/2 x a.
Untuk mendapatkan kiraan sel darah putih dalam 1 μl, angka yang dikira perlu dibahagikan dengan 2 dan menambah dua lagi nol.
Penyimpangan leukosit dari peringkat menunjukkan leukositosis dan leukopenia, dan memerlukan peperiksaan terperinci segera, kerana terdapat kebarangkalian tinggi kehadiran tuberkulosis, pneumonia, sepsis, demam kepialu, penyakit radiasi.